Туберкулез

Туберкулез (Tuberculesis) – хронически протекающая инфекционная болезнь человека, многих видов сельскохозяйственных и диких животных, а также птицы, характеризующаяся образованием в различных органах специфических узелков – туберкулов, склонных к творожистому перерождению.

Историческая справка. Туберкулез известен с древнейших времен. В 1У в. до н.э. Гиппократом были описаны клинические признаки этой болезни у человека и рекомендованы способы лечения. Термин "туберкулез" впервые употребил французский врач Леннек (1819), а заразительность болезни доказал Ж.А.Виллемен (1865). Возбудителя туберкулеза открыл Р.Кох (1882). Он же в 1890 г изготовил диагностический препарат туберкулин. Следует отметить, что русский ученый Х.Гельман изготовил туберкулин еще в 1888 г, но опубликовал об этом позже - лишь в 1892 г. В 1924 г. Кальметт и Герен изготовили вакцину БЦЖ для профилактики туберкулеза людей.

Туберкулез широко распространен во многих странах мира. Особенно часто туберкулез регистрируется во время войн и экономических спадов в странах. В некоторых странах (США, Англия, Голландия, Швеция) он практически ликвидирован.

Большой вклад в изучение туберкулеза животных и разработку оздоровительных мероприятий внесли С.Н.Вышелесский, П.П.Вишневский, М.К.Юсковец, П.И.Кокуричев, И.В.Поддубский, В.И.Ротов, А.В.Акулов, Н.А.Налетов и др.

В Чувашии в 1960 – 1966 гг туберкулез был распространен среди крупного рогатого скота Алатырского, Козловского, Батыревского, Комсомольского, Порецкого, Шемуршинского и Яльчиксого районов.

Возбудитель туберкулеза относится к микроорганизмам семейства Mycobacterioceae рода Mycobacterium. Известны следующие виды возбудителя, вызывающих туберкулез у людей - Myc.tuberculesis, животных - Myc.bovis, птиц - Myc.avium, мышей - Myc.murium, холоднокровных - Myc. poikilotermum. По морфологии и культуральным свойствам они сходны. Это тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки длиной 0,8 – 5,5 мкм, располагающиеся в мазках одиночно или группами. Встречаются также ветвистые, нитевидные и коккоподобные формы микроба. Оболочка микробной клетки содержит жировосковидное вещество, в протоплазме отмечается зернистость. Микобактерии строгие аэробы, неподвижны, спор и капсул не образуют, кислото-, спирто- и щелочеустойчивые, окрашиваются по методы Циля-Нельсона в ярко-красный цвет, а другая микрофлора – в синий цвет. Для выращивания микроба применяют глицериновые МПБ, МПА, картофель, яичные и синтетические среды. Растут культуры медленно. Колонии микобактерий человеческого вида появляются через 20 – 30 суток, бычьего – 20 – 60, птичьего вида – 11 – 15 суток. При отсутствии роста посевы рекомендуется выдерживать в термостате 3 месяца.

Отдельные виды возбудителя туберкулеза имеют неодинаковую вирулентность к различным видам животных и человека. К Myc.tuberculesis наиболее чувствительны люди, восприимчивы свиньи, кошки, собаки, рогатый скот, пушные звери, а птица не заболевает (кроме попугаев). К Myc.bovis чувствительны все сельскохозяйственные и дикие животные, пушные звери и человек, но не восприимчивы птицы. К возбудителю птичьего вида чувствительны пицы, свиньи и очень редко заражаются им другие млекопитающие животные и человек. Животные, инфицированные микобактериями птичьего вида, реагируют на туберкулин для млекопитающих.

Микобактерии весьма устойчивы к воздействию различных факторов внешней среды и химических веществ, что объясняется наличием жировосковидного вещества в микробной клетке. Возбудитель сохраняют жизнеспособность в навозе 7 мес, в высохших фекалиях – до года, в почве – более 2 лет, речной воде – до 2 мес, замороженном мясе – до года, соленом мясе – 45 – 60 дней, масле – до 45 дней, сыре – 45 – 100 дней, молоке – до 10 дней. Пастбища, на которых выпасались больные животные, остаются инфицированными весь летний период. Нагревание молока до 70⁰С убивает возбудителя за 10 мин, а кипячение – через 3 – 5 минут. Лучшими дезинфицирующими средствами являются щелочной 3%-ный раствор формальдегида, взвесь хлорной извести с содержанием 5% активного хлора, 10%-ный раствор однохлористого йода и 20%-ная взвесь свежегашеной извести путем 3-кратной побелки с интервалом в 1 ч.

В природе имеется большая группа атипичных микобактерий, являющаяся в основном сапрофитами. Они способны размножаться в организме и создавать сенсибилизацию к туберкулину для млекопитающих.

Эпизоотологические данные. К туберкулезу восприимчивы более 55 видов млекопитающих животных и около 25 видов птиц. Болеет туберкулезом и человек.

Источником возбудителя являются больное животное, из организма которого возбудитель выделяется с фекалиями, выделением из носа, молоком. Основной путь заражения алиментарный, не исключается респираторный путь, возможно внутриутробное и трансовариальное заражения. Факторами передачи возбудителя могут быть загрязненные корма, вода, пастбища, навоз, предметы и т.д.

Туберкулез распространяется сравнительно медленно, что объясняется длительностью инкубационного периода болезни (до 45 дней). Распространению способствуют снижение резистентности организма животных в результате нарушений технологии содержания, кормления и эксплуатации и воздействиями различных стресс-факторов. Определенной сезонности не отмечено.

Патогенез. Возбудитель, попав в организм, проникает в легкие или другие органы. На месте локализации микроба развивается воспалительный процесс, проявляющейся клеточной пролиферацией и экссудацией. Происходит скопление многоядерных гигантских и эпителиоидных клеток, окруженных плотным слоем лимфоидных клеток. Экссудат, скопившийся между клетками, свертывается, образуя сеть фибрина, формируется бессосудистый туберкулезный узелок – туберкул. Вначале он имеет серовато округлую форму, величиной с булавочную головку или горошину. Затем узелок окружается соединительнотканной капсулой. Ткань внутри капсулы отмирает и превращается в творожистую массу (казеозный распад).

Если возбудитель развивается только на месте внедрения (легкие, кишечник), то такой свежий, изолированный очаг называют первичным эффектом. Из него микобактерии попадают в регионарный лимфоузел, где также развиваются патологические изменения. Одновременное поражение органа и регионарного лимфоузла называют полным первичным комплексом. Развитие процесса только в лимфоузле называют неполным первичным комплексом.

При благоприятном течении болезни соединительнотканная капсула уплотняется, первичный очаг обызвествляется, развитие инфекционного процесса прекращается. При понижении резистентности организма происходит расплавление стенок туберкулезного узелка, диссеминация возбудителя и появления множественных полупрозрачных узелков (милиарный туберкулез). Мелкие туберкулы могут сливаться, образуя крупные туберкулезные фокусы. Микобактерии из туберкулезных фокусов попадают в кровь, происходит генерализация процесса и развитие туберкулезных очагов в различных органах. При генерализованной форме туберкулеза и обширных поражениях в легких нарушается газообмен, угнетается эритропоэз, наблюдается анемия, понижается продуктивность, наступает истощение и смерть животного.

Течение и симптомы. Инкубационный период от 14 до 45 дней (время появления положительной реакции на туберкулин). Первичные поражения туберкулеза клинически не проявляются. Появление клинических форм свидетельствует о длительном течении болезни.

По месту локализации патологического процесса различают легочную, кишечную, генитальную формы туберкулеза, встречаются поражения вымени и серозных покровов и генерализованный туберкулез.

Условно различают открытый (активный) туберкулез, когда возбудитель выделяется с мокротой, фекалиями, молоком во внешнюю среду и закрытый (латентный) без выделения возбудителя во внешнюю среду. При поражении матки, кишечника и молочной железы процесс считают открытым.

У крупного рогатого скота при туберкулезе чаще поражаются легкие с развитием респираторного симптомокомплекса. Встречаются поражения кишечника, молочной железы, половых органов и генерализованная форма.

У свиней туберкулез протекает бессимптомно. Иногда наблюдаются поражения подчелюстных, заглоточных лимфоузлов, легких.

Овцы и козы туберкулезом болеют редко и бессимптомно. При сильном поражении клинические признаки сходны с таковыми у крупного рогатого скота.

Туберкулез у птиц протекает с неясными клиническими признаками (вялость, снижение яйценоскости, поносы, истощение). В основном наблюдаются поражения кишечника, печени, мочеполовых органов, конечностей.

Среди пушных зверей туберкулезом поражается чаще всего молодняк. Отмечены поражения органов дыхания (легочная форма) и пищеварения (поражения кишечника и печени) с возникновением соответствующих симптомов болезней. У лисиц иногда на коже возникают длительные незаживающие язвы.

Патологоанатомические изменения. Характерным для туберкулеза является наличие в различных органах и тканях животного специфических туберкул (узелков) величиной от просяного зерна до куриного яйца и более. Они окружены соединительнотканной капсулой, содержащие творожистую массу казеозного распада, иногда с обызвествлением.

У больного туберкулезом крупного рогатого скота лимфоузлы грудной полости поражаются в 100% случаев, легкие – 99, печень – 8, селезенка – 5, вымя –3, кишечник в 1% случаев (П.И.Кокуричев, 1950). У свиней туберкулезные поражения чаще находят в лимфоузлах брыжейки и головы и реже в печени и других органах. У птицы они локализованы в основном в печени (90% случаев), селезенке (70%), костях и кишечнике.

Диагноз на туберкулез ставят на основе анализа эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических и гистологических изменений и результатов бактериологических, биологических, аллергических методов исследований, а также использованием молекулярно-генетических (ПЦР) анализов. Основными методами исследования на туберкулез являются аллергическая туберкулиновая проба, патологоанатомическое и бактериологическое исследования.

Благополучие хозяйств по туберкулезу контролируется ежегодным проведением во всех хозяйствах и населенных пунктах клинических осмотров и плановых поголовных туберкулинизаций животных:

• коров и быков-производителей – два раза в год, молодняка (начиная с 2-х месячного возраста) и скота на откорме – один раз в год;

• лошадей, мулов, ослов, овец и коз – в зависимости от эпизоотической обстановки;

• всех взрослых свиноматок и молодняка после отъема во всех племхозяйствах – один раз в год, а на остальных свинофермах - в зависимости от эпизоотической обстановки;

• взрослых птиц исходных линий и прародительских стад на племзаводах и селекционно-племенных птицеводческих станциях – один раз в год;

• животных, принадлежащих гражданам исследуют на туберкулез одновременно с проведением туберкулинизаций на фермах.

Основным методом прижизненной диагностики туберкулеза является аллергическое исследование. Туберкулинизацию проводят ежегодно во всех хозяйствах.

Для исследования применяют туберкулин – стерильный фильтрат убитых культур возбудителя туберкулеза. В России используют следующие виды аллергенов:

-сухой очищенный туберкулин ППД (протеин пурифиед дериват) для млекопитающих, применяется для туберкулинизации млекопитающих;

-сухой очищенный туберкулин ППД для птиц, применяется для исследования птиц и свиней;

-комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ).

Используют внутрикожный, глазной, внутривенный и пальпебральный методы туберкулинизации.

При внутрикожном методе туберкулин вводят:

крупному рогатому скоту, буйволам, оленям, маралам, антилопам – в области средней трети шеи;

быкам, слонам, носорогам, бегемотам – в подхвостовую складку;

верблюдам – в кожу брюшной стенки или области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра;

свиньям – в области наружной поверхности уха (с одной стороны туберкулин для млекопитающих, с другой стороны туберкулин для птиц), поросятам в возрасте 2 – 3 мес. – в кожу поясничной области, отступя от позвоночника на 5 – 8 см, используя только безыгольный инъектор;

овцам и козам – в нижнее веко, отступя от края 1,5 – 2 см;

собакам и представителям хищных – в области бесшерстной внутренней поверхности бедра или локтевой складки;

обезьянам, сумчатым, пушным зверям – интрапальпебрально в верхнее веко;

кошкам – в области внутренней поверхности уха;

курам – в бородку; индейкам, гусям и уткам – в подчелюстную складку;

фазанам, павлинам, попугаям, голубям, журавлям, цаплям, аистам, фламинго – в области наружной поверхности голени, отступив от сустава на 1 - 2 см.

Шерсть в месте введения туберкулина выстригают, перья выщипывают, кожу обрабатывают 70%-ным спиртом.

Туберкулин вводят в дозе 0,2 мл всем животным независимо от вида и возраста, а кошкам, обезьянам, птице и пушным зверям – в дозе 0,1 мл; взрослым верблюдам – 0,3 мл.

Учет и оценку реакции на первое внутрикожное введение проводят у крупного рогатого скота, буйволов, верблюдов, слонов, носорогов, бегемотов, оленей и обезьян через 72 часа; у коз, овец, свиней, собак, кошек и пушных зверей через 48 часов; у птиц через 30 – 36 часов.

Реакция признается положительной, если в месте введения туберкулина:

-у крупного рогатого скота, буйволов, верблюдов, антилоп и оленей имеется утолщение кожной складки на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышение местной температуры);

-у быков, свиней, собак, кошек, и птиц образуется ощутимая припухлость; обезьян, овец, коз и пушных зверей – при видимом различии правого и левого века.

В неблагополучных по туберкулезу хозяйствах и при сомнительных случаях проводят повторное введение туберкулина в то же место и в той же дозе сразу после читки реакции на его первое введение. Реакцию учитывают через 24 часа после второго введения.

В неблагополучных хозяйствах животных реагирующих на внутрикожную пробу считают больными туберкулезом. В благополучных хозяйствах их считают подозреваемыми в заражении возбудителем туберкулеза и с ними проводят комплекс дополнительных исследований для подтверждения или исключения диагноза.

Глазную туберкулиновую пробу применяют для диагностики туберкулеза у лошадей. У крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной пробой для дополнительного выявления больных в неблагополучных хозяйствах.

Туберкулинизацию глазным методом проводят двукратно с интервалом в 5 – 6 суток. Туберкулин в количестве 3 – 5 капель наносят пипеткой на слизистую оболочку нижнего века или на поверхность роговицы. Учет реакции проводят после первого введения туберкулина через 6, 9, 12 и 24 часа, после второго – через 3, 6, 9 и 12 часов. Реакция признается положительной, если возникает выделение из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, сопровождающая гиперемией и отеком конъюнктивы.

Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя. Туберкулин вводят после проведения внутрикожной пробы только взрослым животным, за исключением коров в течение одного месяца до и после отела. Перед введением туберкулина у животных измеряют температуру. Она должна быть не выше 39,5⁰С. Животному вводят туберкулин в яремную вену в дозе 1 мл 50% раствора туберкулина на 100 кг массы тела. Учет реакции ведут измерением температуры тела через 3, 6 и 9 часов. Реагирующим считается при повышении температуры тела на один и более градусов выше 39,5⁰С.

Симультанную аллергическую пробу применяют для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота и свиней при дифференциации парааллергических реакций к птичьим и атипичным микобактериям. Для этого используют одновременные введения животным 2 аллергенов: ППД-туберкулина для млекопитающих в стандартном растворе и ППД-туберкулина для птиц или комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ) и определения достоверности различия в интенсивности (степени проявления) реакций на эти аллергены. Проведение симультанной пробы допускается не раннее, чем через 30 дней после последней туберкулинизации животных. Туберкулины вводят внутрикожно в симметричные участки тела животных (шеи, уха и т.д.) в дозе 0,2 мл. Учет и оценку реакций проводят у крупного рогатого скота через 72 часа, у свиней – через 48 часов по общепринятым методом учета туберкулинизации. По интенсивности реакций оценивают результаты исследований групповым методом.

Пальпебральный метод туберкулинизации крупного рогатого скота применяют одновременно с внутрикожной туберкулиновой пробой для дифференциации специфических и параспецифических реакций при первичной постановке диагноза. Учет и оценку реакции проводят через 72 часа после введения препарата. Реакция считается положительной если на месте введения препарата образуется ощутимая припухлость.

Бактериологическое исследование проводят микроскопическим, культуральным и биологическим методами.

Для микроскопии готовят мазки, окрашивают по Цилю-Нильсену и просматривают под микроскопом. Микобактерии можно обнаружить при микроскопии при содержании 100 тыс и более бактерий в 1 мл исследуемого материала. Результаты микроскопии не дают основания для постановки диагноза на туберкулез у животных, кроме птиц.

Бактериальные исследования проводят для выделения культуры микобактерий и определения вида возбудителя. Такое исследование дает положительные результаты при наличии 20 – 100 микобактерий в 1 мл материала. Перед посевом на питательные среды патматериал обрабатывают специальными методами в соответствующих растворах кислот. Посевы делают на специальные плотные яичные среды Левенштейна-Йенсена, ФАСТ-3Л, Финн-2, Гельберга, Петраньяни. Посевы инкубируют при температуре 37 – 38⁰С в течение 3 месяцев. Их просматривают еженедельно. Рост микобактерий бычьего вида обнаруживается на 20 – 60 сутки, человеческого на 20 – 30, птичьего – на 1 – 20, атипичных микобактерий – на 3 – 30 сутки. При этом изучают сроки и характер роста, характеристику колоний, тинкториальные и морфологические свойства микобактерий. Для дифференциации микобактерий их в дальнейшем пересевают на различные питательные среды и выращивают при различных температурных режимах: 20 - 22⁰, 37 - 38⁰ и 45⁰С.

В основном для определения видовой принадлежности микобактерий используют биологическую пробу. Для этого заражают морских свинок, кроликов и кур. Видовую принадлежность определяют по следующим данным:

-при развитии генерализованного процесса у морских свинок и кроликов – бычий вид;

-при отсутствии поражений или незначительных изменениях у кроликов и генерализованном процессе у морских свинок – человеческий вид;

-при наличии поражений у кур и септическом процессе у кроликов – птичий вид.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). ПЦР является молекулярно-генетическим экспресс-методом исследования, основанным на обнаружении в материале специфических фрагментов ДНК, характерных только для определенного вида возбудителя. Применяют при постановке диагноза на туберкулез, для определения видовой принадлежности возбудителя, отсутствии видимых изменений или возникших затруднениях при постановке диагноза.

Диагноз на туберкулез у млекопитающих животных считается установленным в следующих случаях:

-при обнаружении патологических изменений характерных для туберкулеза;

-при получении положительного результата ПЦР и из исследуемого материала выделена культура микобактерий бычьего, человеческого или птичьего вида со свойствами, характерными для этих возбудителей болезни;

-при получении положительного результата биологического исследования на туберкулез.

У свиней:

-при положительных результатах ПЦР и выявлении бактериологическими исследованиями возбудителя туберкулеза бычьего или человеческого вида.

У птиц считается установленным:

-при обнаружении характерных патологических изменений, с подтверждением диагноза микроскопическими исследованиями (обнаружением микобактерий в мазках из патматериала);

-при отсутствии видимых изменений, но при положительных результатах ПЦР;

-при выделении культуры микобактерий птичьего вида (от попугаев - птичьего или человеческого вида).

Лечение не проводят. Для профилактики можно использовать тубазид и другие препараты.

Иммунитет при туберкулезе нестерильный. Для специфической профилактики в пушном звероводстве используется сухая вакцина БЦЖ.