2. Указания к занятию:

Внимательно изучите инструкцию.
Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторных работ.
Соблюдайте осторожность в работе с концентрированными минеральными кислотами.
Используйте резиновые груши, работая с пипетками.

3. Практическая часть.

Лабораторная работа № 1. Осаждение белков при кипячении.

Реактивы: 1) 1% раствор яичного белка;

2) 1%, 10% уксусная кислота;

3) насыщенный раствор NаС1;

4) 10% раствор NаОН.

Название реакции	Принцип	Метод проведения	Результат
Опыт 1: осаждение при кипячении	Белки являются термолаби-льными соединениями и при нагревании свыше 50-60°С денатурируются	5 кап. 1% раствора яичного белка нагреть до кипения	Раствор белка мутнеет
Опыт 2: осаждение 1% уксусной кислотой	Белок выпадает в осадок, т.к. его раствор приближа-ется к изоэлектрической точке и белок теряет заряд	5 кап. 1% раствора яичного белка + 1 кап 1% р-ра уксусной кислоты, нагреть до кипения	Выпадает осадок
Опыт 3: осаждение 10% уксусной кислотой	В сильнокислой среде денатурированный белок в осадок не выпадает, т.к. его частицы перезаряжаются, несут положительный заряд, что повышает их устойчивость в растворе.	5 кап. 1% раствора яичного белка + 1 кап 10% р-ра уксусной кислоты. Нагреть до кипения.	Осадок на образуется
Опыт 4: Осаждение 1% р-ом уксусной к-ты и насыщ. р-ом хлорида натрия	В кислой среде с добавлением насыщенного раствора хлорида натрия уменьшается величина положительного заряда (одного из факторов устойчивости белка).	5 кап. 1% раствора яичного белка + 5 кап 1% р-ра уксусной кислоты + 2 кап. насыщ. р-ра хлорида натрия, нагреть до кипения	Выпадает осадок.
Опыт 4: осаждение 10% раствором щелочи	В сильнощелочной среде денатурированный белок в осадок не выпадает, т.к. его частицы перезаряжаются; несут отрицательный заряд, что повышает их устойчивость в растворе.	5 кап. 1% раствора яичного белка + 2 кап 10% раствора NаОН, нагреть до кипения	Осадок не образуется

Лабораторная работа № 2: Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами.

Реактивы: 1) конц. Н₂SО₄, НС1, НNО₃;

2) 1% раствор яичного белка.

Название реакции

Принцип

Метод проведения

Результат

Опыт 1: осаждение кон-центрирован-ными минера-льными кисло-тами

Концентрированные кислоты (Н₂SО₄, НС1, НNО₃ и др.) вызывают денатурацию белка за счет удаления факторов устойчивости белка в растворе. Не должно быть в избытке Н₂SО₄, НС1, т.к. осадок будет растворяться. Избыток НNО₃ растворение осадка не производит.

№1 №2 №3

5 кап. 5 кап. 5 кап.

конц. конц. конц.

Н₂SО₄ НС1 НNО₃

+5кап. +5кап. +5кап.

р-ра р-ра р-ра

белка белка белка

осадок осадок осадок

При встряхивании растворяются осадки в 1 и 2 пробирках. В 3-ей пробирке осадок не растворяется, вот почему для определе-ния малых количеств белка в моче в клин. лабораториях пользу- ются азотной к-той.

Выпадение осадков. При осаждении азотной кислотой осадок не растворяется при встряхи-вании.