Проведение анализа

(использовать центрифужные пробирки).

Отмерить, мл	Проба, мл	Эталон	Контрольный раствор
1. Кислота перхлорная	0,5	0,5	0,5
2. Сыворотка крови (или моча)	0,5	-	-
3. Калибратор 10 ммоль/л	-	0,5	-
4. Дистиллированная вода	-	-	0,05

Инкубируем пробы 10 минут при 37ºС. Затем центрифугируем опытную пробу при 1000 об/мин 5-10 минут. Из опытной пробы отбираем супернатант и используем в следующем этапе анализа.

Готовим 3 пробирки: опытную, калибровочную и контрольный раствор. Во все пробирки вносим по 2,0 мл рабочего реагента. В опытную пробу – 0,1 мл супернатанта; в калибровочную – 0,1 мл раствора из калибровочной пробы (см. начало анализа), в контрольный раствор вносим 0,1 мл раствора из контрольной пробы (см. начало анализа). Реакционную смесь тщательно перемешать и инкубировать 20 минут при 37ºС или 30 минут – на столе при комнатной температуре! После инкубации измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной пробы, длина волны 500 нм, кювета 1 см. Окраска стабильна не менее часа после окончания инкубации при предохранении от прямого солнечного света.

РАСЧЕТ:

НОРМАЛЬНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ: 3,9 – 5,6 ммоль/л.

4. Закрепление знаний, умений учащихся.

4.1. Выполнение лабораторной работы.

4.2. Учет результатов.

5. Контроль конечного уровня знаний, умений.

5.1. Оформление работы. Начальная интерпретация полученных результатов.

5.2. Обсуждение этапов анализа.

5.3. Решение ситуационных задач.

Задача 1.

У обследованных лиц было определено содержание глюкозы в крови: 4,4 ммоль/л; 6,5 ммоль/л; 10,2 ммоль/л; 12,4 ммоль/л. Дайте оценку результатам.

Задача 2.

С_СТ = 16,62 ммоль/л.

Е_СТ = 0,30.

Е_ОП = 0,22.

Чему равна концентрация глюкозы в крови?

Задача 3.

У пациента натощак уровень глюкозы в крови 7,2 ммоль/л. Какие дополнительные исследования следует провести для подтверждения или отрицания диагноза «сахарный диабет»?

Задача 4.

При проведении анализа на содержание глюкозы в крови глюкозооксидазным методом Е_ОП = 0,2; Е_К = 0,1; С_К = 10 ммоль/л. Определить концентрацию глюкозы в крови, дать интерпретацию результату анализа.

5.4. Фронтальная беседа.

1. Выберите правильный ответ.

А. Исследование каких биохимических показателей крови следует провести для оценки состояния углеводного обмена:

а) общий белок;

б) мочевина;

в) натрий;

г) калий;

д) тест толерантности к глюкозе.

Б. Исследование каких биохимических показателей мочи следует провести для выявления нарушений углеводного обмена:

а) сахар;

б) пигменты;

в) кетоновые тела;

г) белок.

2. Почему у больных сахарным диабетом наблюдается ацидоз?

3. Почему у больных сахарным диабетом необходимо следить за содержанием калия и натрия в крови?

4. Каково клиническое значение определения глюкозы в биологических жидкостях?

5. В чем принцип определения глюкозы в биологических жидкостях?

6. Какую роль играет Н₂О₂ в этом процессе?

7. В какой среде протекают реакции этого метода?

8. Как готовят опытную пробу?

9. Как готовят контрольную пробу?

10. Как рассчитать концентрацию глюкозы при использовании глюкозооксидазного метода?

6. Домашнее задание: Практическая тетрадь – выучить содержание практического занятия № 37 (2). Повторить по учебнику Камышников «Методы клинических лабораторных исследований» стр. 547 – 550. Повторить «Патологию углеводного обмена» (см. лекционный матриал).

УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ

«МОЗЫРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ»

П Р А К Т И Ч Е С К О Е З А Н Я Т И Е № 37