Задание 1. Регистрация потенциала действия седалищного нерва лягушки
1) Собрать экспериментальную установку для регистрации ПД нервного волокна согласно предложенной схеме (Рис. 9).
Рисунок 9. Схема экспериментальной установки для регистрации ПД седалищного нерва лягушки. 1 генератор импульсов; 2 изолирующий трансформатор; 3 осциллограф; 4 раздражающие электроды; 5 отводящие электроды; 6 ванночка; 7 нерв
2) Приготовить препарат седалищного нерва лягушки. Выделенные седалищные нервы должны быть, как можно большей длины. Нерв поместить в раствор Рингера для холоднокровных (далее – физиологический раствор).
3) Нерв уложить на электроды так, чтобы он не касался стенок ванночки. Провисая между раздражающими и отводящими электродами, нерв должен касаться дна ванночки. На дне ванночки должна быть фильтровальная бумага, смоченная физиологическим раствором.
4) Установить минимальную чувствительность осциллографа. Подключить генератор импульсов ко входу осциллографа. Провести измерение длительность импульсов и пауз между ними при всех положениях переключателя и ручек регулировки напряжения.
5) Установить с помощью переключателей генератора импульсов длительность импульса 0,1 мс, длительность пауз 5 и 10 мс, уменьшить напряжение на генераторе до 0.
6) Подключить осциллограф к отводящим электродам. Увеличивая напряжение на генераторе, получить устойчивое изображение импульса артефакта и двухфазного потенциала действия. Для получения максимальной амплитуды ПД пипеткой удалить некоторое количество физиологического раствора, находящегося между электродами, а также пинцетом установить расстояние между отводящими электродами а пределах 3-7 мм.
7) Проверить способность нерва к двухстороннему проведению возбуждения. Для этого нерв повернуть на 1800 относительно центра ванночки и получить ПД.
8) Измерить с помощью осциллографа амплитуду полуволн ПД, а также длительность латентного периода и длительность полуволн ПД.
9) Грубым пинцетом передавить нерв между отводящими электродами и зарегистрировать однофазный ПД.
10) Грубым пинцетом передавить нерв между раздражающими электродами. В случае отсутствия потенциала действия сменить полярность раздражающих электродов.
11) Зная длительность латентного периода и расстояние между катодом и первым отводящим электродом, вычислить среднюю скорость распространения волны возбуждения по седалищному нерву лягушки.
Задание 2. Изучить проведение возбуждения по волокнам а-группы седалищного нерва лягушки
1) Собрать экспериментальную установку для регистрации ПД нервного волокна согласно предложенной схеме (Рис. 9).
2) Приготовить препарат седалищного нерва лягушки. Выделенные седалищные нервы должны быть, как можно большей длины. Нерв поместить в раствор Рингера для холоднокровных (далее – физиологический раствор).
3) Нерв уложить на электроды так, чтобы он не касался стенок ванночки. Провисая между раздражающими и отводящими электродами, нерв должен касаться дна ванночки. На дне ванночки должна быть фильтровальная бумага, смоченная физиологическим раствором.
4) Установить с помощью переключателей генератора импульсов длительность импульса 0,1 мс, длительность пауз 5 и 10 мс, уменьшить напряжение на генераторе до 0. Включить генератор импульсов и осциллограф. Установить минимальную чувствительность осциллографа.
5) Увеличивая напряжение на раздражающих электродах, отметить положение ручки регулировки напряжения, при котором появляется потенциал действия -волокон. Определить скорость проведения возбуждения по -волокнам А-группы (см. задание 1).
6) Увеличивая напряжение на раздражающих электродам, измерить латентные периоды и пороги раздражения для α- и β-волокон, а также минимальное напряжение, при повышении которого дальнейшее роста первой полуволны не происходит.
7) Измерить средний рефрактерный период нервных волокон. Для этого, уменьшая длительность паузы между раздражениями, отметить длительность паузы, при которой наблюдается исчезновение потенциала действия. При измерении рефрактерного периода длительность импульсов должна находиться в пределах 0,1 – 2 мс.
8) Вычислить лабильность волокон А-группы.
При оформлении отчета зарисовать импульс артефакта и потенциала действия α- , β- и -волокон А-группы.
9) Построить кривую «сила - длительность», определить по ней реобазу, хронаксию и полезное время для каждого типа волокон А-группы.