- •Часть I. Общая медицинская микробиология, вирусология и иммунология
- •Часть I
- •Глава 1
- •Глава 2
- •Тема 2.1. Изучение морфологии бактерий и их тинкториальных свойств. Простые методы окраски
- •Тема 2.3. Морфологические особенности
- •Глава 3
- •Тема 3.2. Идентификация бактерий
- •Глава 4
- •Глава 5
- •Тема 5.1. Морфология и структура вирусов. Вирусоскопические методы исследования
- •Тема 5.2. Культивирование вирусов и других облигатньгх внутриклеточных паразитов (риккетсий, хламидий)
- •Тема 6.1. Модификационная изменчивость, мутации, рекомбинация и перенос генов между бактериями
- •Глава 7 методы стерилизации.
- •Тема 7.1. Методы оценки антимикробного действия химических и физических факторов
- •Тема 7.2. Методы оценки эффективности действия антимикробных препаратов
- •Глава 8
- •Тема 8.1. Микрофлора воды, воздуха и почвы. Методы санитарно-бактериологического исследования воды, воздуха и почвы
- •Тема 8.3. Микрофлора организма человека
- •Глава 10
- •Тема 10.2. Методы количественного определения специфических антител (серодиагностика)
- •Тема 10.3. Методы оценки иммунного статуса организма человека
- •Тема 10.4. Методы оценки клеточного и гуморального иммунного ответа. Вакцины. Иммунные сыворотки и иммуноглобулины
- •Часть II
- •Глава 11
- •Тема 11.1. Методы клинико-диагностических микробиологических исследований и оценка полученных результатов
- •Глава 12
- •Тема 12.1. Аэробные бактерии -возбудители гнойно-воспалительных заболеваний и раневых инфекций
- •Тема 12.2. Анаэробные бактерии - возбудители гнойно-воспалительных и раневых инфекций
- •Глава 13
- •Тема 13.2. Возбудители брюшного тифа, паратифов и иерсиниозов. Дисбактериоз
- •Тема 13.3. Возбудители пищевых
- •Глава 14
- •Тема 14.2. Возбудители менингококковой инфекции, коклюша и дифтерии
- •Тема 14.3. Возбудители туберкулеза, проказы и актиномикоза
- •Тема 15.1. Возбудители сифилиса и мягкого шанкра
- •Тема 15.2. Возбудители гонореи, урогенитального хламидиоза, микоплазмоза и уреаплазмоза
- •Глава 16
- •Тема 16.1. Возбудители чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы, лептоспироза и других зоонозных инфекций
- •Глава 17
- •Глава 18
- •Глава 19
- •Тема 20.1. Микробиологическая диагностика кишечных вирусных инфекций и вирусных гепатитов
- •Глава 21
- •Тема 21.1. Микробиологическая диагностика вирусных поражений кожи, слизистых оболочек, лимфоидной и железистых тканей
- •Глава 22
- •Тема 22.1. Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных онкогенными вирусами человека и вирусами иммунодефицита человека
- •Глава 23
- •Глава 24
- •Тема 24.1. Микробиологическая диагностика протозойных инфекций
Тема 2.3. Морфологические особенности
И УЛЬТРАСТРУКТУРА АКТИНОМИЦЕТОВ И СПИРОХЕТ
Введение. Актиномицеты (Actinomyces) относятся к порядку Actinomycetales, включающему семейства Actinomycetaceae, Strep-tomycetaceae и Nocardiaceae. Актиномицеты имеют нитевидную форму. Они способны к ветвлению и могут образовывать структуры, напоминающие мицелий одноклеточных грибов (рис. 2.3.1). Встречаются также палочко- и кокковидные формы. Нити имеют длину 100—600 мкм и толщину 0,2—1,2 мкм. Актиномицеты неподвижны, лишены выраженной капсулы, жгутиков и пилей. Как и другие бактерии, актиномицеты окрашиваются простыми методами или по методу Грама. Актиномицеты относятся к фирмикутным бактериям и окрашиваются грамположительно. В отличие от других бактерий они способны размножаться не только поперечным делением, но и спорами.
Спирохеты относятся к порядку Spirochaetales. Они представляют собой извитые подвижные бактерии. Патогенные спирохеты входят в семейство Spirochaetaceae и принадлежат к трем родам: Borrelia, Treponema и Leptospira. Их основные морфологические признаки представлены в табл. 2.3.1.
Клетка спирохеты имеет форму нити, закрученной в виде спирали. Клеточная стенка обладает строением, типичным для грациликутных бактерий. В периплазматическом пространстве располагаются сократительные фибриллы — эндофлагеллы, которые прикрепляются к полюсам клетки с обоих концов, оплетают тело бактерии по направлению к центру клетки, где они переплетаются между собой. Фибриллы обладают сокра-
Таблица 2. 3.1. Морфологические признаки спирохет Род Число и характер Характер движения Окраска по методу завитков Романовского— Гимзы Borrelia 3—10, крупные, Толчкообразное, Сине-фиолетовая неравномерные сгибательно-по-ступательное Treponema 8—12, мелкие, Плавное, сгиба- Бледно-розовая равномерные тельно-поступа-тельное Leptospira Многочисленные Очень активное, Розово-сиренева-первичные завит- вращательно-по- тая ки, вторичные ступательное завитки в виде буквы S |
План
Программа
Определение формы актиномицетов в препарате, окрашенном по методу Грама.
Методы изучения морфологии спирохет с дифференциацией по морфологическим признакам.
Определение формы и подвижности спирохет в прижизненных препаратах.
Исследование спирохет в окрашенных препаратах.
Изучение электронограмм спирохет и спирилл.
Демонстрация
Препарат из чистой культуры актиномицетов. Окраскапо методу Грама.
Подвижность лептоспир (темнопольная микроскопия).
Боррелии в препарате толстой капли крови (окраска по методу Романовского-Гимзы).
а Задание студентам
Изучить морфологию актиномицетов в препарате. Зарисовать.
Изучить морфологию лептоспир с помощью методатемнопольной микроскопии. Зарисовать.
Изучить морфологию боррелий в препарате толстой капли крови. Зарисовать.
Методические указания
Морфологию спирохет изучают в нативных препаратах и в мазках, окрашенных по методу Романовского-Гимзы. Препараты исследуют с помощью темнопольной или фазово-кон-трастной микроскопии, наблюдая за активным и характерным движением спирохет и особенностями их формы.
Приготовление мазка из крови. На чистое обезжиренное стекло ближе к одному из его концов поместить каплю крови. Другое предметное стекло со шлифованым краем прижать под углом 45° к капле крови, а затем скользящим движением передвинуть его к другому концу нижнего стекла. При этом кровь распределится по предметному стеклу тонким слоем. Высушить препарат на воздухе, фиксировать в жидком фиксаторе (метиловый спирт или смесь этилового спирта и эфира).
Окраска препарата по методу Романовского-Гимзы (смесь метиленового синего, эозина и азура). На мазок нанести рабочий раствор красителя (2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды) на 10—20 мин. Затем препарат промыть водой и высушить на воздухе.
Боррелии — возбудители возвратного тифа (B.recurrentis) окрашиваются в фиолетовый, эритроциты крови — в розово-коричневый, ядра лейкоцитов — в фиолетовый цвет. Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый, лептоспиры — в розово-сиреневатый цвет.
Признак Риккетсии Хламидии Микоплазмы Размеры, 0,5— 4 мкм, поли- 0,25— 1,0 мкм, 0,2— 0,3 мкм, круг-форма морфны: встреча- шаровидные, ово- лые, овальные ются кокковид- идные или палоч- или нитевидные ные, палочковид- ковидные клетки* клетки ные, реже нитевидные клетки Особен- КС по типу фа- КС по типу гра- Лишены КС. Име-ности циликутных. Не циликутных; ли- ют выраженный строения имеют макрокап- шены пептидо- S-слой. Не имеют сулы, жгутиков, гликана. Не име- макрокапсулы, Неподвижны. Не ют макрокапсу- жгутиков. Не об-образуют споры лы, жгутиков. Не- разуют споры, подвижны. Не об- Подвижны за счет разуют споры внешнего цито-скелета Окраска По методу Здро- По методу Рома- — довского невского— Гимзы (микроколонии внутри клеток) Методы Световая, фазово- Световая, фазово- Электронная мик-выявле- контрастная, лю- контрастная, лю- роскопия ния минесцентная, минесцентная электронная мик- (для выявления роскопия микроколонии внутри клеток); электронная микроскопия |
План
Программа
1. Изучение морфологии риккетсий, хламидий и мико-плазм.
Демонстрация
Хламидий в инфицированных клетках эпителия уретры, мазках-отпечатках из органов и культурах клеток.
Электронограммы риккетсий, хламидий и микоплазм.
Задание студентам
Изучить морфологию риккетсий в препарате, окрашенном по Здродовскому.
Изучить морфологию хламидий.
3. Изучить морфологию микоплазм.
Методические указания
Окраска риккетсий по методу Здродовского
Окрасить мазок разведенным фуксином Циля (10—15 капель на 10 мл дистиллированной воды) в течение 5 мин.
Промыть водой.
Обработать мазок 0,5 % раствором лимонной кислоты или 0,01 % раствором хлористоводородной кислоты.
Промыть водой.
Окрасить метиленовым синим в течение 1 мин.
Промыть водой и высушить препарат.
Риккетсий, окрашенные по методу Здродовского, имеют красный цвет, цитоплазма клеток, в которых они паразитируют, — голубая, ядра — синие.