- •13. Методы экспериментальной работы с лабораторными животными.
- •Правила обращения с животными после эксперимента.
- •14. Методы изучения цнс и внд.
- •15. Электрофизиологические методы исследования функций организма животных.
- •Анализ экг
- •16.Методы исследования висцеральных систем
- •17. Токсикологические методы исследования
- •18. Методы световой микроскопии
- •Методы световой микроскопии
- •Метод светлого поля
- •Метод темного поля
- •Метод фазового контраста
- •Поляризационная микроскопия
- •Метод интерференционного контраста
- •Метод исследования в свете люминесценции
- •19. Методы цито- и гистологических исследований
- •20. Методы микротехники
- •23. Электрохимические методы анализа (электрофорез и др.)
- •24. Хроматографические методы анализа.
- •25. Спектральные методы анализа.
- •1.По решаемым задачам:
- •2.По применяемым методам:
- •26. Кинетические методы анализа
- •28. Методы изучения ферментативной активности.
- •1 Мкмоль/мин м.Е. (международная единица)
- •29. Методы генетического (гибридологического) анализа
- •30. Методы изучения генетики человека.
- •31.Получение трансгенных организмов.
- •32. Исследование эмбриологического материала.
- •33. Методы анализа и коррекции гамет
- •34. Экологическое моделирование и прогнозирование
- •35. Антропометрические методы исследования
- •21. Методы культивирования протопластов, клеток и тканей.
- •37. Методы генной инженерии.
- •38. Методы промышленной биотехнологии.
- •39. Методы иммобилизации ферментов.
- •40. Гибридомная технология получения моноклональных антител.
29. Методы генетического (гибридологического) анализа
Методы генетического (гибридологического) анализа - основные методы генетики.
Гибридологический анализ – это способ изучения наследственных свойств организма путем скрещивания (гибридизации) его с родственной формой и последующим анализом признаков потомства.
Ген. анализ позволяет установить генотип отдельной особи или популяции.
Гибридологический анализ впервые применил Г. Мендель (1865) для изучения механизма передачи наследственных задатков (генов) от родителей потомкам и для изучения взаимодействия генов у одного и того же организма. Мендель значительно усовершенствовал метод:
Работал с чистыми линиями (гомозиготами)
У скрещиваемых особей выделял отдельные контрастные признаки и изучал наследование только этих признаков.
Вел количественный учет потомков, несущих изучаемый признак
Скрещивал несколько пар растений с одинаковыми признаками, а потомство суммировал, тем самым увеличивая объем выборки
Проводил индивидуальный анализ потомства (позволял растениям самоопыляться и прослеживал несколько поколений)
Усовершенствование метода и удачный объект (горох посевной) позволили Менделю открыть его законы.
Закон чистоты гамет. Перед началом своих опытов Мендель 3 года проверял чистосортность гороха. Из 35 сортов им были выбраны 14 (т.е.7 пар признаков)
Положения:
- наследуются не признаки, а зачатки признаков (гены)
- каждый организм несет по 2 наследственных зачатка (гена) по каждому признаку
- наследственные зачатки не смешиваются, а передаются в чистом виде из поколения в поколение.
Организм может быть чистым (АА,аа) или нет (Аа), а гаметы всегда чисты – з-н чистоты гамет.
1 з-н Менделя. При скрещивании организмов отличающихся по одной паре альтернативных признаков потомство первого рода единообразно и доминантно – закон единообразия.
2й з-н Менделя. При скрещивании Ф1 в потомстве Ф2 наблюдается распределение признаков в соотношении 3:1 по фенотипу и 1:2:1 по генотипу.
3й з-н Менделя. При скрещивании организмов, отличающихся по 2м и более парам альтернативных признаков наследование идет независимо (как при моногибридном скрещивании) и в потомстве Ф2 появляются новые сочетания признаков, которых не было у родителей и прародителей. (Ф1 и П). Закон независимого наследования (закон комбинирования).
Пример: ди- и тригибридные скрещивания на горохе.
А-желтые, а-зеленые, В-гладкие, в-морщинистые
Р ААВВ х аавв
Ф1 АаВв (гладкие, желтые)
Р (Ф1) АаВв х АаВв
|
АВ |
Ав |
аВ |
ав |
АВ |
ААВВ |
ААВв |
АаВВ |
АаВв |
Ав |
ААВв |
ААвв |
АаВв |
Аавв |
аВ |
АаВВ |
АаВв |
ааВВ |
ааВв |
ав |
АаВв |
Аавв |
ааВв |
аавв |
- гетерозиготы
- гомозиготы
Ж
Как
при моногибр.скрещ.
Гл:Морщ=12:4=3:1
АА:Аа:аа=4:8:4=1:2:1
ВВ:Вв:вв=4:8:4=1:2:1 (как при моногибр. скрещ)
Распределение: признаков по фенотипу 9:3:3:1.
Запись генов проявившихся в генотипе это фенотипический радикал организма. Вероятность наступления 2х независимых событий равна произведению вероятностей каждого. (3А+1а) (3В+1в) = 9АВ+3Ав+3Ва+1ав
Законы Менделя соблюдаются только при определенных условиях:
Признак контролируется одной парой генов
Полное доминирование (НО: может быть и неполное доминирование, пример красный*белый=розовый)
Равновероятное соотношение гибридов всех типов гамет
Равновероятное сочетание гамет при оплодотворении (ХХ *ХУ; Ф1 ХХ, ХУ соотношение 50:50, но на самом деле ХУ больше, т.к. сперматозоиды несущие У-хромосому более подвижны и быстрее достигают яйцеклетки)
Равновероятная выживаемость всех типов зигот (пример с платиновыми и черно-белыми лисами: Аа-платина, аа-черно-белый, АА-нежизнеспособна, и погибает внутриутробно)
Регулярность полового размножения.
Большое количество особей в Ф2
Для полигибридного скрещивания:
- гены должны находиться в разных хромосомах
- не должно быть взаимодействия неаллельных генов.
В этих случаях всегда ставится анализирующее и реципрокное скрещивания.
Реципрокное скрещивание – пара скрещиваний, когда в одном случае признак приносит мать, а в другом отец. Доля матери и отца в наследовании одинакова.
Анализирующее скрещивание – скрещивание на рецессивного родителя для установления чистосортности (чистопородности).
Пример: черные и рыжие быки.(А-черный, а-рыжий)
Р АА(муж) х аа (жен) Аа(муж) х аа(жен)
Ф1 Аа, Аа (бык чистопородный) Аа, аа (бык нечистопородный)