Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Флуоресцентные_методы_диагностики_в_медицине_Колтовой_Н_А_Краевой

.pdf
Скачиваний:
5
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
8.06 Mб
Скачать

2.1.1.9 Спектрофотометрия высушенной сыворотки крови.

1985 - Ермолаев Юрий Сергеевич. Триптофановая фосфоресценция при комнатной температуре и структурное состояние белков и биологических мембран. Диссертация кандидата биологических наук. Минск. 1985. 139 с. В работе исследовался белок в виде раствора, порошка и белковой пленки. Для приготовления белковых растворов использовали 0,155 М фосфатный буфер или 0,2 М раствор КСІ в дистиллированной воде. Порошкообразные препараты белков перед измерением уравновешивали в течение суток с атмосферой 50% влажности при комнатной температуре. Белковые пленки получали из концентрированного раствора белка. Белковый раствор объемом 0,2 мл заливали на кварцевую подложку размером 9x20 мм, и медленно высушивали при комнатной температуре.

2012 – Мельник О.Г. (Харьков, ХНМУ) Диагностика профессиональных пылевых заболеваний бронхолегочной системы с помощью фосфоресцентного метода. 2012.

Для исследования интенсивности люминол-индуцированной фосфоресценции на кварцевую пластину наносили 50 мкл сыворотки крови и 10 мкл 3% люминола, высушивали при 30ºС до образования твердой пленки и помещали в фосфороскоп. Источником возбуждающего света была ртутная лампа ДРК-120. С помощью монохроматора ДМР-4 выделяли спектральные линии с длиной волны 297, 404 и 434 нм, при которых наблюдаются наиболее выраженные изменения структурно-функциональной организации макромолекул. Ширина выходной щели монохроматора составляла 2 мм. Излучение квантов фосфоресценции фиксировали с помощью ФЭУ-130 при комнатной температуре в режиме подсчета фотонов счетчиком СБС-2.

Таблица 2-2. Интенсивность люминол-индуцированной флуоресценции в различных диапазонах.

2005 - Мажуль В.М. Зайцева Е.М. Шавновский М.М. и др. Фосфоресценция при комнатной температуре аморфных агрегатов и амилоидных фибрилл, образующихся в результате неправильного фолдинга белков. Цитология. 2005. т.47. № 11. с.978-987.

101

2.1.1.10 Исследование спектров возбуждения сыворотки крови.

1-спектр возбуждения сыворотки крови при регистрации на длине волны 336 нм.

2007 - Кутушов Михаил Владимирович. Спектра поглощения, люминесценции и степени поляризации плазмы крови у здоровых и больных. Мир фармации и медицины. 2007. с.12-13.+ В работе отмечается, что при разведении плазмы водой спектры флуоресценции получаются более четкими. Возможно, это вызвано тушением флуоресценции при большой концентрации белков. Измерение флуоресценции проводилось на спектрофлюориметре «Hitachi U-300» в диапазоне 200-700 нм. При возбуждении длиной волны 306 нм появляется два

максимума флуоресценции - 339 (белок-?) и 650 (порфирины-?) нм.

Рис. 2-23. Спектр возбуждения и флуоресценции плазмы крови при разведении дистиллированной водой в три и в 60 раз. Спектр возбуждения регистрировался при длине волны люминесценции 336 нм. Регистрировалось несколько пиков от 259 до 292 нм.

Рис. 2-24. Спектры возбуждения плазмы крови при разведении плазмы дистиллированной водой в 60, 300, 600 и 1200 раз. Спектр возбуждения регистрировался при длине волны люминесценции 336 нм.

При разведении 1:60 имеется только три пика 291, 271 и 257 нм. При дальнейшем разведении появляется дополнительный максимум 282 нм. При разведении 1:600 уменьшается пик 291 и возрастает пик 282, которая остается при дальнейших разведениях, и появляется новая полоса 240 нм. При дальнейшем разведении вместо 240 появляются два пика 227 и 235 нм.

Полоса возбуждения 282 нм соответствует полосе поглощения плазмы крови при 278 нм

– это полоса триптофана.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

102

2-спектр возбуждения сыворотки крови при регистрации на длине волны 360 нм.

1987 - Минск – Институт Физики - Залеская Галина Адамовна

1987 – Залесская Г.А. Гололобов А.Е. Многофотонное колебательное возбуждение многоатомных молекул при дезактивации посторонними газами. Минск. ИФ. 1987. 21с.

2010 - Залесская Г.А. Маслова Т.О. (Минск, Институт Физики НАН Беларуссии) Спектры флуоресценции плазмы крови при ультрафиолетовом облучении in vivo. Журнал прикладной спектроскопии. Июль-август 2010. т.77. №4. с.618-626.+

Спектры флуоресценции регистрировались на спектрофотометре СМ2203 (фирмы Solar, Минск) в диапазоне 280-400 нм. Регистрировался спектр возбуждения при регистрации на длине волны 360 нм. Спектр возбуждения имеет два максимума – 220-230 и 275-280 нм, что соответствует спектрам возбуждения триптофана.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

3-спектр возбуждения сыворотки крови при регистрации на длине волны 635 нм.

2004 - Прокопьев Владимир Егорович. Биофизические механизмы воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения на биологические ткани и оптические методы диагностики их состояния. Диссертация доктора физико-математических наук. Томск. 2004.+

При язвенной болезни желудка в 90% случаев появляся пик 625 нм. Спектр возбуждения флуоресценции на длине волны 635 нм содержит пики 405, 500, 540 и 580 нм. Полоса 625 нм совпадает с полосой поглощения протопорфирина IX

103

2.1.2 Зарубежная литература по автофлюоресценции сыворотки крови.

1976 - Warner M, Callis J, Davidson ER, Christian GD: (USA) Multicomponent analysis in clinical chemistry by use of rapid scanning fluorescence spectroscopy. Clinical Chemistry. 1976; 22: 14831492.+

1976 - McKenzie D, Henderson AR. An artifact in lactate dehydrogenase isoenzyme patterns, assayed by fluorescence, occurring in the serum of patients with end-stage renal disease requiring maintenance haemodialysis. Clin Chim Acts 70, 333-336 (1976).

1976 - Poh-Fitzpatrick MB, Lamola AA. Direct spectrofluorometry of diluted erythrocytes and plasma: a rapid diagnostic method in primary and secondary porphyrinemias. J Lab Clin Med 1976;87: 362–70.

1978 - Vladutiu AO,Cunningham RE, Walshe J. Attempts to characterize the fluorescent compound(s) in serum of patients with chronic renal failure. Clinical Chemistry. 24, 1084-1085 (1978).+

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1980 - Schwertner H, Hawthorne SB: Albumin-bound fluorescence in serum of patients with chronic renal failure. Clinical Chemistry. 1980; 26: p.649-652.+

1982 - Schwertner HA. Isolation and chromatographic analysis of unidentified fluorescence in biological fluids of patients with chronic renal disease. Nephron 31, 209-211 (1982).

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1983 - Wickens DO, Norden AG, Lunec J, Dormandy TL. Fluorescence changes in human gammaglobulin induced by free-radical activity. Biochim Biophys Acts 1983;742:607-16.

1988 - Xu. X, Meng. J and Hou. S. The characteristic fluorescence of the serum for cancer patients. Journal of luminescence 1988, 219-220.

1989 - Wenchong, L. Some fluorescence observation on the canceration tissue and the blood of cancer patients. Proc. SPIE. 1989. 1054, p.196–199.

1993 - Gminski J, Joanna M, Machalski M, Drózdz M ( 1993) Elastin metabolism parameters in sera of patients with lung cancer. Neoplasma 40: p.41–44.

1997 - Munch, G. Keis, R. Wessels, A. et al. Determination of advanced glycation end products in serum fluorescence spectroscopy and competitive ELISA. Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1997; 35: 669-677.

1999 - Steinar Hustad, Per Magne Ueland, and Jørn S chneede. Quantification of Riboflavin, Flavin Mononucleotide, and Flavin Adenine Dinucleotide in Human Plasma by Capillary Electrophoresis and Laser-induced Fluorescence Detection. Clinical Chemistry 1999; v. 45, p.862-868.+

2006 - Lan X-F, Liu J-G, Liu Y, Luo X-S, Tang X-G, Lu S-Y, Ni X-W (2006). Spectroscopy research on cholesterol in hypercholesterolemia serum, spectroscopy and spectral analysis, 26(3): 467-470.

2012 - A. Lawaetz, R. Bro, M. Kamstrup-Nielsen, I. Christensen, L. Jørgensen, and H. Nielsen,

Erratum to: Fluorescence spectroscopy as a potential metabonomic tool for early detection of colorectal cancer," Metabolomics 8 (supplement 1): 122 (2012). Регистрировался двумерный спектр флуоресценции плазмы крови. Возбуждение 250-450 нм, флуоресценция 300-600 нм.

104

1985 – Austria – Institute of Organic Chemistry – L einer M.

1983 - Leiner MJP, Wolfbeis OS, Schaur RJ, Tillian HM. Fluorescence topography in biology. I: Ultraviolet fluorescence topograins of rat sera and decrease of tryptophan fluorescence in Yoshida ascites hepatoma-bearing rats. IRCS Med Sci 1983;11: 675-6.

1983 - Leiner MJP, Wolibeis OS, Schaur RJ, Tillian JIM. Fluorescence topography in biology. II: Visible fluorescence topograms of rat sera and cluster analysis of fluorescence parameters of sera of Yoshida ascites hepatoma-bearing rats. IRCS Med Sci 1983;11: 841-2.

1985 - Wolfbeis, O. Leiner, M. Mapping of the total fluorescence of human blood serum as a new method for its characterization. Analytica Chimica Acta. 1985. 167, p.203-215.

1986 - Leiner MJP, Schaur RJ, Desoye G, Wolfbeis OS: Fluorescence topography in biology. III:

Characteristic deviations of tryptophan fluorescence in sera of patients with gynecological tumors. Clinical Chemistry. 1986: 32 (10), p.1974-1978.+ Спектрофлуориметр Aminco SPF 500.

Зарегистрирован двумерный спектр флуоресценции сыворотки (триптофана) в норме (287,337) и при раке. Зарегистрирован сдвиг максимума флуоресценции при раке. На разностном спектре присутствуют пики (295,324) и (288,368)ю

Рис. 2-25. Двумерный спектр флуоресценции сыоротки крови в норме, и разность между флуоресценцией в норме и при раке.

1987 - Leiner M, Wolfbeis OS, Schaur RJ, Tillian HM: Fluorescence topography in biology: visible fluorescence topograms of rat sera and cluster analysis of fluorescence parameters of sera of Yoshida ascites hepatoma-bearing rats. IRCS Med Sci, 1987; 11: 841-842.

1990 - Hubmann M, Leiner, MJP, Schaur, RJ: Ultraviolet fluorescence of human sera: I. Sources of characteristic differences in the ultraviolet fluorescence spectra from normal and cancer-bearing

humans Clin. Chem. 1990; 36(11): p.1880-1883.+

Спектрофлуориметр Hitachi Model F-4000, возбуждение 280 нм.

Рис. 2-26. Сравнение спектра флуоресценции чистого альбумина и модельного раствора альбумина в фосфатном буфере при различной концентрации альбумина.

105

Рис. 2-27. Сравнение спектров флуоресценции альбумина в трех формах – кристаллический, лиофилизированный, в растворе.

2010 – Marc J.P. Leiner; Otto S Wolfbeis. Biochemic al Applications Of 3-Dimensional Fluorescence Spectrometry. Proc. SPIE 0909, Time-Resolved Laser Spectroscopy in Biochemistry, 134 (June 24, 1988); doi:10.1117/12.945377

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1997 – India – Anna University - Madhuri S.

1997 - Madhuri S, Aruna P, Bibi M, Gowri V, Kotesswaran D, Ganesan S. Ultraviolet fluorescence

spectroscopy of blood plasma in the discrimination of cancer from normal. SPIE 1997, 2982, 41-45.

Исследовалась флуоресценция плазмы крови. Возбуждение 250-340 нм. При возбуждении 300 нм. Вычислялось отношение I340/I440. В норме оно меньше 11, при опухоли оно больше 11.

1999 - Madhuri, S. Vengadesan, N. Aruna, P. Kotesswaran, D. Venkatesan, P. Ganesan, S. Native fluorescence characteristics of blood plasma of normal and liver diseased subjects. Medical Science Research 27, 635-639 (1999).

1999 – Singaravelu Ganesan; S. Madhuri; V. Anuradha ; A. Namasivayam; Native fluorescence characteristics of blood plasma during rat liver regeneration. Proc. SPIE 3599, Optical Diagnostics of Biological Fluids IV, 15 (May 17, 1999);

2003 - Madhuri S, Vengadesan N, Aruna P, Koteeswaran D, Venkatesan P. Ganesan S.. (India) Native

fluorescence spectroscopy of blood plasma in the characterization of oral malignancy. Photochem Photobiol. 2003. 78(2): 197-204. Исследуется спектр флуоресценции плазмы крови при возбуждении 405 и 420 нм.

2006 - V.Masilamani, R.kalaivani, Osamah al-daghri, H.Raja, S.E.Sivanandam, Laskman anand,S.Ganesan, Apdul rahman diab, M.al-salhri, Chandramohan, R.Thirunarayanan and.Vijayasarathi “Optical diagnosis of cancer from blood components” Egyptian Journal of Biophysics,Vol 12, no 1, Jan 2006.

2009 - Ebenezar J, Aruna P, Ganesan S (2009) Synchronous fluorescence spectroscopy for the detection and characterization of cervical Cancers in vitro. Photochem Photobiol 86(1):77–86.

2011 - K. Muthuvelu, Sivabalan Shanmugam, Dornadula Koteeswaran, S. Srinivasan, P. Venkatesan, Prakasarao Aruna, Singaravelu Ganesan, “Synchronous luminescence spectroscopic characterization of blood elements of normal and patients with cervical cancer”, Proc. SPIE, 2011, Vol 7895, 78950M.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1999 – China – Tianjin University – Xiaozhou L.

1999 - Xiaozhou Li. Qiuyu Wang. Junxiu Lin (China) Laser-induced blood serum fluorescence and

Raman spectroscopy for cancer diagnosis. Proc. SPIE 3863, 1999 International Conference on Biomedical Optics, 301 (September 17, 1999). doi:10.1117/12.364402. Анализируется спектр флуоресценции здоровых людей и пациентов с раком. Концентрация бета-каротина в крови у здоровых людей намного больше, чем у больных раком.

2011 - Xiaozhou Li. Xiangxiang Tian ; Rong Wang ; Ming Lei (China) Lung cancer diagnosis based on serum autofluorescence. IT in Medicine and Education (ITME), 2011 International Symposium on (Volume:2 ). P.680-682.

106

2.1.3 Автофлюоресценция клеток крови.

Флуоресценция эритроцитов (red cell).

1934 - Keller Ch. Seggel K. Uber das Vorkommen fluorescirender Erytrocyten. Folia haematol. 1934.

52. III. 241-249.

Келлер и Зеггель обнаружили в крови здоровых людей и у больных различными формами малокровия при облучении жидких препаратов УФ или коротковолновым синим светом обнаружили отдельные эритроциты, которые обладали кратковременной красной флуоресценцией. Они назвали их флуоресцитами (флюоресцитами) (Fluorescite). В норме они составляли 0,1% от общего числа эритроцитов. Их количество значительно возрастало при заболевании железодефицитной анемии, при малокровии, вызванном отравлением свинцом, при усиленной регенерации крови. Зингель считал, что появление в крови флуоросцитов является признаком дефицита железа. В случае отравления свинцом - нарушение гемоглобинообразования. По данным Зеггеля содержание протопорфирина составляет нормально до 12 г в 100 мл крови и 30г в 100 г вещества эритроцитов. При отравлении свинцом количество флуоресцитов увеличивается до 10% и больше, а содержание протопорфирина в 100 г эритроцитов достигает 1600г. При этом часто обнаруживается слабая флуоресценция всех эритроцитов и свечение эритробластов. Нормально же первичная флуоресценция фторосодержащих элементов эритроидного ряда наблюдается только до 6-го месяца внутриутробной жизни.

1950 - Hamperl H. Флуоресцирующие гранулированные клетки. Arch. Path. Anat. Physiol.

(Virchow’s), 318, p.32-47. 1950. CH. Abstr. 44. 8973. 1950.

Флуороциты широко распространены в организме. Они содержат много мелких гранул, которые флуоресцируют желтым светом. Они красятся кислым фуксином и воспринимают импрегнирование серебром по Масону. Автор полагает, что флуороциты образуются в результате действия макрофагов на вещества, выделяющиеся при разложении крови.

1954 - Козенов находил большое количество флуоресцитов (около 10%) при порфириновых фотодерматозах.

1957 - Зубжицкий Ю.Н. Новый люминесцентный метод одновременного выявления эритроцитов и кровяных пластинок. Журнал общей биологии. 1957. 18. №5. с.402-404.

1975 - Vlassopoulos K, Melissinos K, Drivas G (1975) The erythrocytes protoporphyrin in chronic renal failure. Clin Chim Acta 65(3):389–392 C

1977 - Percarmona GP, Bracone A, David O, Sartori ML: Regulation of NAD and NADH synthesis in human red cells. Acta Biol Med Ger, 1977; 36(5-6): 759-63.

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1977 - Тула - НИИ Новых медицинских технологий

1977 - Кидалов В. П. Комаров А. П. Самойлов В. О. и др. Люминесцентный метод анализа воздействий слабых магнитных полей на организм Материалы 3-го международного симпозиума по электромагнитной экологии (ЭМС 97). СПб. ГК РФ по высш. образованию, Минсвязи РФ, МАНВШ и др. 1997. с.120-122.

1977 - Сясин Н.И. Самойлов В.О. Кидалов В.Н, Бигдай Е.В.) Люминесцентный метод анализа изменений тканевого дыхания. Проблемы терапевтической и хирургической пульмонологии. Сборник материалов. СП6. МЗ РФ, ГНЦП, РАМН. 1997. с.45-46.

1977 - Сясин Н.И. Кидалов В. Н. Комаров А. Н. Самойлов В. О Люминесцентный метод анализа воздействий слабых магнитных полей на организм. Материалы 3-го международного симпозиума по электромагнитной экологии (ЭМС-97). СП6. 1997. с.89.

107

1986 - Зайцева К.К. Кидалов В.Н. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1986.

т.11. №7. с.112-114.

1989 - Кидалов В. Н. Лысак В. Ф. Квантитативная эритрограмма и возможность ее использования в клинике и эксперименте. Лабораторное дело. 1989. № 8. с.36-40.

1998 - Муромцев В.А. Кидалов В.Н. Медицина в 21 веке. СПб. ИНТАН. 1989. 131с.

2001 - Кидалов В.Н. Якушина Г.Н. Значение дисгармонических изменений конфигурации и свечения эритроцитов при выстраивании ими краевой линии. Матер. науч. конф. посвящ. 80летию профессора А.С. Мозжухина. СПб.: ВМА, 2001. с.52-54.

2002 - Кидалов В.Н. Сясин Н.И. Хадарцев А.А. Якушина Г.Н. Значение естественной флуоресценции (биолюминесценции) элементов живого организма с позиции энергообмена. Вестник новых медицинских технологий. 2002. № 2. с.27-28.

2004 - Сясин Н.И. Изменения автофлюоресценции кожи здоровых людей при проведении дыхательных проб. Реабилитационно-восстановительные технологии в физической культуре, спорте, восстановительной, клинической медицине и биологии. Тула. 2004. С 59 - 64.

2005 - Кидалов В.Н. Хадарцев А.А. Сясин Н.И. Якушина Г.Н. Краюхин А.В. Автофлюоресценция нативных тканей и клеток крови и ее значение для медицинской практики. Монография. Тула - Санкт Петербург, 2005.108 с.

2005 - Хадарцев А.А. Кидалов В.Н. Якушина Г.Н. Квасов Д. В. Возможности изучения автофлюоресценции живых объектов в медико-биологических исследованиях. Владикавказский медико-биологический вестник. 2005. т5. №. 9-10. С. 50-54.+ 2005 - Хадарцев А.А. Кидалов В.Н. Якушина Г.Н. Чуб С.Г. Автофлюоресценция в комплексной

диагностике эффектов лазерофореза янтарной кислоты. Владикавказский медикобиологический вестник. 2005. т5. №9-10. с.220-224.

2005 - Кидалов В.Н. Краюхин А.С. Лушнов М.С. Сясин Н.И. Хадарцев А.А. Якушина Г.Н. Изменения формы, ультраструктуры и флуоресценции эритроцитов перифирической крови, трансформирующихся в пойкилоциты. Вестник новых медицинских технологий. 2005. № 3-4.

С. 26-29.

2005 - Сясин Николай Иванович. (Тула, НИИ Новых медицинских технологий) Значение биоспектрофотометрии нативной флуоресценции клеток покровных тканей и крови для медицинских исследований. Диссертация кандидата биологических наук. Тула, 2005. 162с. Исследована автофлуоресценция клеток крови при возбуждении светом с длиной волны 455465 нм и 520-530 нм. При этом получуется информация об активности молекул пиридиннуклеотидов и флавопротеинов.

2014 - Сясин Н.И. Борисова О.Н. Автофлюоресценция, клеточное дыхание и современные возможности его неинвазивного исследования (обзор литературы). Встник новых медицинских технологий. 2014. №1.+

Флуоресценция лимфоцитов (white cell).

Вкрови существенной флуоресценцией обладают лишь лейкоциты. Флуоресценция гранулоцитов в 2,5-6 раз выше флуоресценции лимфоцитов. Флуоресценция моноцитов средняя между лимфоцитами и гранулоцитами. Интенсивность флуоресценции тромбоцитов очень низкая. Эритроциты обычно не флуоресцируют.

Вгранулах эозинофилов содержится вещество, от которого зависит их способность к аутофлюоресценции. Благодаря этому свойству эозинофилы можно отличать от других элементов крови в люминесцентном микроскопе (WWeil, Chused, 1981). Эозинофилы представляют собой особый класс гранулоцитов, отличающийся своим происхождением, строением, спектром энзимов, кинетикой своеобразной ролью в адаптационных реакциях.

1929 - Borst M. Konigsdorfer H. Untersuchungen uber die Porphyria mit besonderer Berucksichtigung der Porphyria congenital. Leipzig. 1929. Авторы описали первичную красную флуоресценцию эритробластов. Эритробласты - это клетки костного мозга, из которых образуются эритроциты. Они обнаружили флуоресценцию при исследовании очагов экстрамедуллярного

108

эмбрионального кровотворения при облучении УФ светом, и установили присутствие в них порфиринов. В настоящее, время флюоресцирующие эритробласты обнаружены при различных формах анемий.

1981 - Weil, G. J. and T. M. Chused. 1981. Eosinophil autofluorescence and its use in isolation and analysis of human eosinophils using flow micro-fluorometry. Blood 57:1099–1104.

1993 - Barnes, D. S. Aggarwal, S. Thomsen, M. Fitzmaurice, and R. R. Kortum. 1993. A characterization of the fluorescent properties of circulating human eosinophils. Photochem. Photobiol 58:297–303.

------------------------------------------------------------------------------------------------------

1995 – Italy –Florence – Monici M.

1995 - Monici, M. Pratesi, R. Bernabei, P.A. et al. (1995). Natural fluorescence of white blood cells: spectroscopic and imaging study. J. Photochem. Photobiol. B: Biol. 30, 29–37. Исследовалась флуоресценция белых клеток крови в суспензии и под микроскопом. Показано, что флуоресценция агранулоцитов и гранулоцитов в суспезии отличается при возбуждении 250-370 нм. Различие увеличивается при возбуждении 250-265 нм. С помощью микроспектрофотометрического анализа отдельных клеток на флуоресцентном микроскопе по спектру флуоресценции можно различать лимфоциты, моноциты, нейтрофилы и эозинофилы. Наблюдение проводилось в видимом диапазоне 440-580 нм при возбуждении 366-436 нм.

2003 – Monici M, Agati G, Fusi F, Pratesi R, Paglie rani M, Santini V, Bernabei PA. Dependence of leukemic cell autofluorescence patterns on the degree of differentiation. Photochem Photobiol Sci. 2003 Oct;2(10):981-7.

2005 – Monici M. Cell and tissue autofluorescence r esearch and diagnostic applications. Biotechnol Annu Rev. 2005;11:227-56.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1960 - Санкт-Петербург - ГОИ

1960 - Брумберг Е.М. Барский И.Я. Кондратьева т.М. Черноградская Н.А. Шудель М.С. (СанктПетербург, ГОИ) Ультрафиолетовая флуоресцентная микроскопия форменных элементов костного мозга и периферической крови. Доклады АН СССР. 1960. т.135. с.1521.

1961 - Барский И.Я. Брумберг Е.М. Кондратьева т.М. Черногрядская Н.А. (Санкт-Петербург, ГОИ) Ультрафиолетовая флуоресценция форменных элементов костного мозга и периферической крови животных и человека в норме и патологии. 1. Ультрафиолетовая флуоресценция клеток костного мозга и периферической крови животных при лучевом поражении. Биофизика. 1961. т.6. №1. 114-118.

1961 - Барский И.Я. Брумберг Е.М. Кондратьева т.М. Черногрядская Н.А. (Санкт-Петербург, ГОИ) Ультрафиолетовая флуоресценция форменных элементов костного мозга и периферической крови животных и человека в норме и патологии. 2. Ультрафиолетовая флуоресценция клеток костного мозга и периферической крови животных при лучевом поражении. Биофизика. 1961. т.6. №5. 605-609.

1963 - Розанова Л.М. Барский И.Я. Брумберг Е.М. Ультрафиолетовая флуоресценция клеток крови людей, больных лейкозами. ДАН СССР. 1963. т.150. №4. с.907-908.

1981 - Лобанок Е.С. Мажуль В.М. Конев С.В. Матвейков Г.П. Калия Е.С. (Минск, Институт фотобиологии) Способ диагностики аутоиммунных заболеваний. Патент 1629787. 1981.+ Цель достигается тем, что лимфоциты крови облучают в течение 2-5 мин светом длиной волны 265-300 нм. Диагностику заболевания проводят по затуханию фосфоресценции мембраны клеток. Это позволяет оценить их дефектность. При снижении фосфоресценции до

30% и более от нормы диагностируют заболевание.

109

2001 - Томск - НИИ Онкологии

2001 - Прокопьев В.Е. Удут В.В. Борозновская Н.Н. Рентгенолюминесцентная диагностика состояния цельной крови. Межд. науч.-практич. конф. «Медицинские и экологические аспекты ионизирующей радиации»: Тез. докл. Томск, 2001. с.125-126.

2002 - Удут В.В. Прокопьев В.Е. Микроспектральный анализ в изучении состояния периферической крови. Новые технологии в медицине. 2-я Объединенная научная сессия СО РАН и СО РАМН. Новосибирск. 2002. с.45.

2004 - Прокопьев Владимир Егорович. Биофизические механизмы воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения на биологические ткани и оптические методы диагностики их состояния. Диссертация доктора физико-математических наук. Томск. 2004.

278с.+

Исследование рентгенолюминесценции крови.

Обнаружены и исследованы спектры катодо- и рентгенолюминесценции сухих образцов цельной крови в видимой области спектра и проведено их сравнение со спектрами флуоресценции при возбуждении оптическим излучением на длинах волн вблизи 400 нм. Показано, что активаторами излучения двух наиболее сильных полос флуоресценции крови с центрами на длине волны 710 нм и 760 нм являются трехвалентные ионы железа, находящиеся в различных координационных положениях в активных центрах металлопорфиринов белковых молекул крови. Установлено, что при всех видах возбуждения образцов крови больных, интенсивность флуоресценции длинноволновой полосы 760 нм повышается по сравнению с кровью здоровых доноров.

Исследование флуоресценции мембран эритроцитов.

Рис. 2-28. Спектр флуоресценции мембран эритроцитов в норме (2) и при заболевании язвенной болезнью желудка (1). Так же представлен разностный спектр.

Исследовался спектр флуоресценции мембран эритроцитов больных язвенной болезнью желудка. Оказалось, что появяются пики, соответствующие протопорфирину IX. В мембранах эритроцитов происходит накопление протопорфирина IX и его димерных и агрешированных форм.

110