- •Глава 1 Актуальные вопросы этиологии, диагностики и лечения
- •Глава 2 материалы и методы исследования …………………... 44
- •Глава 3 результаты исследования ………………………….……… 54
- •3.5 Этиология онихомикоза стоп ………………………….…………………. 58
- •Глава 1 Актуальные вопросы этиологии, диагностики и лечения онихомикоза, обусловленного недерматомицетами (обзор литературы)
- •1.1 Этиология онихомикоза стоп
- •1.2 Этиология онихомикоза кистей
- •1.3 Лабораторная диагностика онихомикоза
- •1.4 Типы поражения ногтевых пластин при онихомикозе
- •1.5 Факторы риска развития онихомикоза
- •1.6 Чувствительность микромицетов – возбудителей онихомикоза in vitro
- •1.7 Лечение онихомикоза
- •Глава 2 материалы и методы исследования
- •2.1 Общая характеристика исследования
- •2.2 Характеристика обследованных больных
- •2.3 Клинико-лабораторные и инструментальные исследования
- •2.4 Микологическое исследование
- •2.5 Методология оценки чувствительности возбудителей онихомикоза к антимикотическим препаратам
- •2.6 Лечение больных онихомикозом
- •2.7 Методы статистического анализа полученных данных
- •Глава 3 результаты исследования
- •3.1 Демографическая характеристика обследованных больных с онихомикозом стоп
- •3.2 Результаты лабораторных исследований крови больных онихомикозом, получавших лечение
- •3.3 Сопутствующие заболевания у больных онихомикозом, получавших лечение
- •3.4 Результаты микологического обследования больных
- •3.5 Этиология онихомикоза стоп
- •3.6 Этиология онихомикоза кистей у больных, получавших лечение
- •3.7 Клинические особенности типов изменения ногтевых пластинок при онихомикозе стоп
- •3.8 Изучение in vitro чувствительности недерматомицетов к антимикотическим препаратам
- •3.9 Клинические варианты типов поражения ногтевых пластинок стоп
- •3.10 Клиническая характеристика поражения ногтей кистей у больных онихомикозом
- •3.11 Факторы риска развития онихомикоза стоп
- •3.12 Факторы риска развития онихомикоза кистей
- •3.13 Оценка эффективности комплексного лечения онихомикоза стоп и кистей
- •3.14 Клинические случаи онихомикоза, обусловленного недерматомицетами
- •3.14.1 Клинический случай онихомикоза стоп, обусловленный Fusarium sp.
- •3.14.2 Клинический случай онихомикоза стоп, обусловленный Candida dubliniensis.
- •3.15 Алгоритм лечения онихомикоза, обусловленного недерматомицетами
- •Глава 4 заключение
2.5 Методология оценки чувствительности возбудителей онихомикоза к антимикотическим препаратам
Для определения чувствительности возбудителей онихомикоза к антимикотическим препаратам использовали 2 метода (диско-диффузионный метод и серийных разведений).
Определение чувствительности дрожжей к флуконазолу проводили диско- диффузионным методом CLSI М-44A [73]. При этом использовали диски, содержащие 25 мкг флуконазола, модифицированный агар Мюллера-Хинтон. Длительность инкубации составляла 18-24 часа, при температуре 350С. Учет результатов определения чувствительности штаммов дрожжей к флуконазолу проводили, измеряя диаметр зон подавления роста на микробиологическом анализаторе BIOMIC Vision [5]. Критерии интерпретации результатов представлены в таблице 3.
Таблица 3 – Критерии интерпретации результатов определения чувствительности
дрожжей - возбудителей онихомикоза.
Антимикотический препарат |
Концентрация в диске (мкг) |
Диаметр зоны отсутствия роста грибов (мм) |
****МПК (мкг/мл) |
||||
У* |
У/Ч** |
Ч*** |
У* |
У/Ч** |
Ч*** |
||
Флуконазол |
25 |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
≥64 |
16-32 |
≤8 |
Примечание: У* – устойчивые штаммы, У/Ч** – штаммы с дозозависимой
чувствительностью, Ч*** – чувствительные штаммы, МПК**** – минимальная подавляющая концентрация (МПК): наименьшая концентрация, которая при
определенных условиях in vitro, предотвращает видимый рост грибов в пределах определенного времени.
Для определения чувствительности нитчатых грибов к тербинафину и итраконазолу использовали метод последовательных разведений в жидкой среде Сабуро [22].
Культуры выращивали в течение 2-х недель, затем готовили рабочую взвесь из зрелых культур в физиологическом растворе густотой 5 Ед по стандарту мутности. Количество вносимой рабочей взвеси в каждую пробирку ряда составляло 0,1 мл. В каждом опыте ставили 3 контроля: 1) культуры (1 мл питательной среды + 0,1 мл рабочей взвеси культуры (без антимикотика);
2)питательной среды (1 мл среды, без культуры и антимикотика);3)антимикотика
(0,9 мл питательной среды + 0,1 мл исходного разведения антимикотика, то есть
100 мкг действующего вещества-субстанции).
Все ряды подготовленных разведений с культурами и контрольные пробирки выдерживали при температуре 370С или 280С (в зависимости от вида и штамма) до появления роста гриба в первом контроле.
Минимальной подавляющей концентрацией (МПК) антимикотика считали разведение в той пробирке, в которой визуально отсутствует рост микромицета.
Определение чувствительности дрожжей и нитчатых недерматомицетов к антимикотикам выполнено Выборновой И.В., научным сотрудником НИЛ микологического мониторинга и биологии грибов НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России.