2.2 Характеристика обследованных больных

Для решения поставленных в работе задач были обследованы 1830 больных в возрасте от 18 до 82 лет (средний возраст 50,8 ± 15,8 лет), из них 1043 (57%) женщин и 787 (43%) мужчин, у которых были выявлены изменения ногтевых пластинок, характерных для онихомикоза.

В соответствии с критериями включения и исключения, в исследование этиологии онихомикоза стоп были включены 1740 больных с клиническими признаками онихомикоза в возрасте от 18 лет до 82 лет, средний возраст составил

51,8 ± 14,5 лет. Из них мужчин было 734 (45%) в возрасте 50,21 ± 15,5 года, а женщин – 1006 (55%) в возрасте 50,25 ± 14,5 лет.

В соответствии с критериями включения/исключения лечение было назначено 303 больным в возрасте от 18 до 74 лет (средний возраст 52,8 ± 16,7 года), 168 (55%) женщинам и 135 (45%) мужчинам. Исследование закончили 300 пациентов. У 3 больных развились нежелательные явления, из-за чего они досрочно выбыли из исследования. Данные этих больных в оценке эффективности не учитывали, так как их выбытие произошло на первом месяце терапии.

2.3 Клинико-лабораторные и инструментальные исследования

303 больным онихомикозом, получавшим лечение в микологической клинике, проводили лабораторные исследования:

– клинический анализ крови;

– биохимический анализ крови (с определением уровня билирубина, АЛТ, АСТ, креатинина).

Для диагностики и определения тяжести сопутствующих заболеваний больным проводили физикальный осмотр и инструментальные исследования – ЭКГ, УЗИ органов брюшной полости и почек, и/или ФГДС (по показаниям). При впервые выявленных соматических заболеваниях пациентов консультировали врачи смежных специальностей (терапевт, ангиохирург, ревматолог, эндокринолог или гастроэнтеролог). Особое внимание уделяли той патологии

органов и систем, которая могла бы ограничивать применение или влиять на эффективность системных антимикотиков с учетом особенностей их биодоступности.

2.4 Микологическое исследование

Микологическое исследование включало прямую микроскопию патологического материала и посев образцов, в которых были обнаружены элементы грибов, а также определение чувствительности возбудителей к антимикотическим препаратам.

Мы использовали диагностические критерии онихомикоза, обусловленного недерматомицетами, рекомендованные международными экспертами (Gupta,

2011): 1) положительный результат микроскопического исследования с КОН; 2) выделение культуры микромицета; 3) повторное выделение культуры при повторном заборе биоматериала, либо высев одного и того же вида гриба в 5 из 20 точек посева; 4) отсутствие роста дерматомицета.

Для одного пациента выполнено гистологическое исследование. Микроскопию соскобов с ногтевых пластинок проводили с использованием

30% раствора КОН. Подготовленные препараты просматривали в световом микроскопе при увеличениях 100х и 400х. Для лучшей визуализации характерных грибных структур (гифы гриба, артроспоры, дрожжевые почкующиеся клетки, псевдомицелий), добавляли в препараты флюорохром – калькофлюор белый и просматривали препарат в люминесцентном микроскопе [1].

Для первичной изоляции грибов использовали агаризованную среду Сабуро с 2% глюкозы, содержащую антибиотик (40 мг/л левомицетина). Посевы инкубировали при температуре +28⁰С в течение 2-4 недель. При отсутствии роста в течение 30 дней результаты культивирования считали отрицательными. При появлении роста в первичном посеве проводился отсев колонии на свежую дифференциальную среду для получения чистой культуры, которая служила материалом для идентификации выделенного микромицета. Полученный при

посеве дерматомицет считали истинным возбудителем онихомикоза. Культуры нитчатых грибов идентифицировали до вида по макро- и микроморфологическим признакам, согласно определителю грибов. Видовая идентификация дрожжей включала тест на «ростковые» трубки, биохимические тесты с использованием коммерческой тест-системы «Auxacolor 2» (BioRad, США) [1].