- •Санмед теория
- •1. Предмет, цели и задачи санитарной микробиологии. История развития санитарной и медицинской микробиологии
- •2. Значение проведения мониторинга состояния окружающей среды для предотвращения распространения инфекционных заболеваний
- •3. Методы оценки микробиологического загрязнения среды патогенами
- •4. Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах
- •5. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы кишечной палочки)
- •6. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (анаэробные споровые сульфатредуцирующие бактерии)
- •7. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы протея)
- •8. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (стрептококки и стафилококки)
- •9. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы кишечной палочки)
- •10. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (анаэробные споровые сульфатредуцирующие бактерии)
- •11. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы протея)
- •12.Методы определения санитарно-показательных микроорганизмов (стрептококки и стафилококки)
- •13. Количественные показатели санитарного состояния среды: микробное число, титр, индекс
- •14. Микрофлора воздуха
- •15. Особенности санитарно-микробиологических исследований воздуха в закрытых помещениях, в больших городах, на предприятиях пищевой и микробиологической промышленности
- •16. Методы отбора проб воздуха и используемые для этого приборы
- •17. Методы определения микробного загрязнения воздуха
- •18. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха
- •19. Определение общей численности сапрофитных микроорганизмов
- •20. Обнаружение стафилококков в воздухе закрытых помещений. Определение стрептококков и способы их идентификации
- •21. Определение патогенных микроорганизмов в воздухе
- •22. Значение санитарного состояния воздушной среды помещений в передаче инфекций
- •23. Вода как источник инфекционных заболеваний
- •24. Цели и задачи санитарно-микробиологического исследования воды
- •25. Биологические и микробиологические методы обследования микрофлоры воды
- •26. Контроль качества питьевой воды
- •27. Методы отбора проб воды для бактериологического исследования
- •28. Санитарно-показательные микроорганизмы воды
- •29. Методы индикации патогенных микроорганизмов
- •30. Определение числа сапрофитной микрофлоры воды
- •31. Определение числа бактерий группы кишечных палочек, бактериофагов в воде
- •32. Комплексная санитарно-микробиологическая оценка качества воды с учетом органолептических, гельминтологических и химических данных
- •33. Регламентирующая документация для комплексной санитарно-микробиологической оценки качества воды (госТы, санитарные правила и методические указания и др.)
- •34. Критерии безусловного показателя загрязненности воды и ее непригодности для любых целей
- •35. Биологическое загрязнение почв
- •36. Микрофлора почвы
- •37. Причины загрязнения почв
- •38. Распределение микроорганизмов в почве
- •39. Санитарно-микробиологический контроль почв, его цель, задачи
- •40. Методы санитарно-микробиологического контроля почв
- •41. Методы отбора проб почвы для микробиологического анализа, способы их транспортировки и хранения
- •42. Подготовка проб почвы для микробиологического анализа
- •43. Определение бгкп – титрационный метод, метод мембранных фильтров
- •44. Использование сред накопления при санитарно-микробиологическом исследовании почв
- •45. Посев на плотные питательные среды
- •46. Метод прямой микроскопии, подсчет микроорганизмов
- •47. Определение общего числа сапрофитных бактерий в образце исследуемой почвы
- •48. Определение термофильных, нитрифицирующих бактерий и их значение при оценке состояния почв
- •51. Характеристика спорообразующих патогенных микроорганизмов, постоянно обитающих в почве
- •52. Характеристика групп патогенных микроорганизмов, попадающих в почву с выделениями человека и животных
- •53. Способы обнаружения в почве сальмонелл
- •54. Способы обнаружения в почве шигелл
- •55. Способы обнаружения в почве клостридий столбняка и ботулизма
- •56. Перфрингенс-титр как важнейший критерий для санитарной оценки почвы и ее самоочищения
- •57. Методы определения перфрингенс-титра
- •58. Особенности микробной обсемененности пищевых продуктов
- •59. Специфическая микрофлора пищевых продуктов как обязательное звено в технологии их приготовления (Lactococcus lactis, Lactococcus bulgaricus, Lactococcus acidophilus)
- •60. Неспецифическая микрофлора пищевых продуктов – микробы сапрофиты, условно-патогенные
- •61. Неспецифическая микрофлора пищевых продуктов – патогенные микроорганизмы
- •62. Микроорганизмы, вызывающие порчу пищевых продуктов
- •63. Заболевания передающиеся через пищевые продукты: пищевые инфекции
- •64. Заболевания передающиеся через пищевые продукты: пищевые отравления
- •65. Лабораторная диагностика пищевых бактериальных отравлений
- •66. Значение микробиологического анализа для выяснения причин пищевых токсикоинфекций
- •67. Соблюдение санитарно-гигиенических норм и правил на всех стадиях производства
- •68. Санитарно-гигиенический контроль за производством как неотъемлемая составляющая в предотвращении пищевых инфекций и отравлений
13. Количественные показатели санитарного состояния среды: микробное число, титр, индекс
Ответ. Количественные методы позволяют определить степень микробного загрязнения объектов окружающей среды и, следовательно, их потенциальную опасность для здоровья человека. К косвенным количественным методам относят: определение общего микробного числа (или общей микробной обсемененности, или общего количества бактерий); количественный учет санитарно-показательных микроорганизмов. Общее микробное число (ОМЧ) - количество микроорганизмов в единице объема исследуемого объекта. Выражается в кл/мл, кл/г, кл/м3 или КОЕ/мл, КОЕ/г, КОЕ/м3. При определении ОМЧ исходят из предположения, что, чем оно больше, тем выше вероятность попадания в объект патогенных микроорганизмов. Определение ОМЧ должно проводиться с соблюдением определенных правил: пробы, взятые асептично из разных участков исследуемого объекта, или средние пробы должны транспортироваться в лабораторию в условиях, исключающих добавочное загрязнение, а также размножение или отмирание микроорганизмов. В лаборатории пробы гомогенизируют, затем отмеряют определенные весовые или объемные количества материала и подвергают его исследованию. Существует два метода определения ОМЧ: метод прямого подсчета и метод количественного посева различных разведений образцов и проб исследуемого материала на питательные среды. Количественные показатели характеризуют степень обсемененности данного объекта микроорганизмами, т.е общее микробное число в единице веса (объема) - обычно в 1г (1см3). Существует два метода определения микробной обсемененности: метод прямого подсчета и метод количественного посева проб исследуемого объекта или его разведений на питательные среды. Прямой подсчет микроорганизмов в исследуемом объекте проводится под микроскопом в счетных камерах Горяева или в камерах, специально сконструированных для счета бактерий. Предварительно пробу исследуемого объекта подвергают обработке, чтобы получить гомогенную взвесь. Для лучшего учета бактерий в исследуемую суспензию добавляют краситель, чаще всего эритрозин. Можно проводить прямой подсчет и на мембранных фильтрах, через которые пропускают исследуемую жидкость или взвесь. Метод прямого подсчета применяется в экстренных случаях, когда необходимо срочно дать ответ о количественном содержании бактерий, например, при авариях в системе водоснабжения, при оценке эффективности работы очистных сооружений и т. п. Метод прямого подсчета кажется простым и удобным, однако он имеет ряд существенных недостатков, снижающих его ценность и из-за этого довольно редко используется. Существенным недостатком его является невозможность подсчитать бактерии, когда образуются их скопления или когда они «прилипают» к частицам исследуемого субстрата, не удается подсчитать мелкие микроорганизмы, не говоря уже о вирусах. И наконец, метод прямого подсчета не дает возможности отличить живые микроорганизмы от погибших. Создание автоматических приборов для регистрации общей микробной обсемененности, таких как фотоэлектрические и электронные счетчики, делает метод прямого подсчета более перспективным. Метод количественного посева исследуемого материала на плотные питательные среды применяется наиболее часто. Из приготовленных серийных десятикратных разведений исследуемой жидкости или суспензии по 1 мл переносят в стерильные чашки Петри (начиная с большего разведения, каждое разведение отдельной пипеткой) и заливают расплавленным и остуженным до 45—50 °С мясопептонным агаром - МПА (глубинный посев). Для равномерного смешивания чашки слегка двигают по поверхности стола и после застывания агара помещают в термостат. После инкубации подсчитывают число выросших колоний и с учетом разведения высчитывают число жизнеспособных микробов в единице объема исследуемого объекта. Если посевы выращивали при 30°С, то показателем общей обсемененности исследуемого материала является КМАФАнМ (или МАФАнМ). КМАФАнМ не определяют только у продуктов, при производстве которых используют заквасочные культуры. В зависимости от вида продукта и способа его производства этот показатель может свидетельствовать об общем санитарно- эпидемиологическом состоянии продукта, свежести или начальной стадии порчи внешне доброкачественного продукта, хотя во многих случаях метод считается приблизительным из-за невозможности выявить все микроорганизмы в объекте на одной питательной среде, т.к. их физиолого-биохимические свойства различны. Кроме того, режим инкубации также не соответствует требованиям всех микроорганизмов в ассоциации, не дают роста микробы, находящиеся в комочках исследуемого объекта, а если и наблюдается рост колоний, то, возможно, не из одной особи. Наконец, часть микроорганизмов теряет способность к размножению в силу антагонизма, конкуренции и других причин. Несмотря на недостатки этого показателя, для многих продуктов КМАФАнМ нормируется. Для количественной характеристики применяются две группы методик: определения титра и индекса. Титр - это тот наименьший объем исследуемого материала (в миллилитрах) или весовое количество (в граммах), в котором обнаружена хоть одна особь санитарно-показательного микроорганизма. Например, для определения титра кишечной палочки в воде засевают несколько разных объемов (от 100 до 0,1 или до 0,01 мл в зависимости от предполагаемой степени загрязнения объекта) в жидкие сахарные питательные среды. Размножение в них кишечных палочек регистрируется по наличию брожения-расщепления углевода до кислоты и газа. Пересев на плотные дифференциально-диагностические среды и идентификация выросших колоний позволяют выяснить те объемы, в которых присутствовала кишечная палочка. Затем с помощью специальных таблиц, определяют ко ли-титр. Набор таблиц входит в ГОСТ. Индекс - количество особей санитарно-показательного микроба, обнаруженного в определенном объеме (количестве) исследуемого объекта. Для воды, молока, других жидких продуктов - в 1 л, для почвы, и пищевых продуктов - в 1 г. Индекс - величина, обратная титру, поэтому перерасчет титра в индекс и обратно можно производить по формуле: Титр = 1000/индекс; Индекс = 1000/ титр. Соответственно для почвы и пищевых продуктов: Титр = 1/индекс; Индекс = 1/титр. Индекс чаще определяют путем применения мембранных фильтров или посева различных разведений исследуемых субстратов на питательные среды. Выбор того или иного санитарно-показательного микроорганизма зависит от исследуемого объекта и конкретной задачи. Соответственно говорят, например, о титре или индексе протея или маслянокислых бактерий и т.п. Нередко (и во многих ГОСТах это узаконено) одновременно исследуется и ведется количественный учет двух или более санитарно-показательных микроорганизмов. Качественные показатели указывают на отсутствие (присутствие) микробов конкретных видов в определенной массе продукта. Прямое выявление в пищевых продуктах патогенных или условно-патогенных микробов и их ядов проводится в соответствии с существующими нормативными документами. Обычно проверяют наличие микроорганизмов p.p.Salmonella, Staphylococcus, Cl.botulinum и их токсинов, Cl.perfringens, Bac.cereus и др. Согласно требованиям ГОСТов патогенные микроорганизмы и их токсины должны отсутствовать в определенном объеме (массе) материала, подвергнутого исследованиям (25, 50 г и т.д.).