28. Санитарно-показательные микроорганизмы воды

Ответ. Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ) — это представители нормальной микрофлоры, которые выделяются естественным путем в окружающую среду и там сохраняются, поэтому служат показателями санитарного неблагополучия, потенциальной опасности исследуемых объектов. СПМ воды являются бактерии группы кишечной палочки (БГКП), энтерококки, стафилококки. К группе кишечной палочки принадлежат бактерии родов Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter и другие представители семейства Enterobacteriaceae, наличие БГКП (термотолерантные колиформные бактерии, общие колиформные бактерии, общая микробная численность бактерий) в воде свидетельствует о фекальном загрязнении и соответственно — о возможной контаминации воды патогенными микроорганизмами кишечной группы. Термотолерантные колиформные бактерии (ТКБ) более достоверный индикатор загрязнения продуктами жизнедеятельности. Этот показатель свидетельствует о свежем фекальном загрязнении. В большинстве случаев в этой группе обнаруживается кишечная палочка Escherіchіa colі. Общие колиформные бактерии (ОКБ) формируют бактерии семейства Enterobacteriacea (Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella). Многие представители этой группы относятся к нормальной микрофлоре желудка, поэтому превышение ОКБ может говорить о возможном фекальном загрязнении, связанном с деятельностью человека. Общая микробная численность бактерий (ОМЧ) показатель является индикатором загрязнения органическими соединениями (например, содержащихся в фекалиях) и различными формами азота. С другой стороны, в ОМЧ входят как опасные бактерии (например, высокопатогенный штамм кишечной палочки Escherіchіa colі), так и практически безвредные и повсеместно встречаемые сенные палочки (Bacillus subtillis).

29. Методы индикации патогенных микроорганизмов

Ответ. Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий методом мембранной фильтрации (основной метод). Метод основан на фильтрации установленного объема воды через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальной питательной среде с лактозой и последующей идентификации колоний по культуральным и биохимическим признакам. Анализируют 3 объема по 100 мл, можно дробить объемы (10, 40, 100, 150 мл). Отмеренный объем воды фильтруют через мембранные фильтры. Фильтры помещают на среду Эндо (до трех фильтров на 1 чашку) и инкубируют t0 370 С в течение 24 часов. Если нет роста – отрицательный результат – ОКБ и ТКБ не обнаружены. Если есть типичные лактозопозитивные колонии с отпечатком на обратной стороне фильтра, подсчитывают, подтверждают их принадлежность к ОКБ и ТКБ. Для этого исследуется: оксидазная активность; принадлежность к грамотрицательным бактериям; ферментация лактозы до КГ (в двух пробирках – при 37 С и 44 С). Споры сульфитредуцирующих клостридий – спорообразующие анаэробные палочковидные бактерии, редуцирующие сульфит натрия на железо-сульфитном агаре при 44 С в течение 16-18 часов. Метод основан на выращивании посевов в железо-сульфитном агаре в условиях, приближенных к анаэробным, и подсчете числа черных колоний. Объем воды 20 мл прогревают на водяной бане 75-80 С в течение 15 минут для исключения вегетативных форм, затем фильтруют через бактериальный фильтр, который помещают в пробирку с расплавленным железо-сульфитным агаром (70-80 С), остужают, помещают в термостат 44 С на 16-18 часов.