Глава 2. Объект и методы исследований

2.1 Объекты исследований

Исследования проводились на базе кафедры БФУ им. И. Канта в период с июля 2010 по февраль 2012. Объект исследований – полнорационный сухой гранулированный комбикорм для бройлеров в возрасте 5-8 недель (20-32 дня), неизвестного химического состава, взятый трижды в разное время года:

- июнь 2010;

- декабрь 2010;

- апрель 2011.

Фирменное наименование организации, в которой были взяты пробы: ООО «Торгово-Птицеводческая Компания «БАЛТПТИЦЕПРОМ». Место нахождения: Россия, г. Калининград, пос. им. А. Космодемьянского. Вид деятельности – производство и реализация продукции птицеводства.

2.2 Методы исследования

Методологическую основу исследования составляют труды в области промышленного птицеводства, кормления сельскохозяйственных животных, кормопроизводства, витаминологии, биологии, цитологии, физиологии человека и животных, химии, медицины и агрономической токсикологии.

Для проведения практических исследований были использованы методики измерений каротиноидов, аскорбиновой кислоты, рутина, антоцианов и суммарной концентрации водорастворимых антиоксидантов, взятые на кафедре медицинской экологии в БФУ им. Канта.

В работе использованы индуктивные и дедуктивные методы обобщения данных, полученных эмпирическим путем; теоретический метод, связанный с изучением литературы, а так же математический и статистический методы обработки полученных мною в ходе опытов данных.

2.2.1. Спектрофотометрический метод количественного определения каротиноидов

Для определения каротиноидов берется навеска корма 0,50 г. Навеска растирается в фарфоровой ступке, добавляется 5 мл ацетона. Растирание материала в ступке проводится до получения однородной кашицы. Затем полученную массу фильтруют и доводят объем вытяжки до 10 мл.

Количественное определение проводится спектрофотометрическим методом без предварительного разделения в 100%-ной ацетоновой вытяжке с последующим расчетом по формуле Хольма (1). Для расчета концентрации определяется оптическая плотность экстракта при длинах волн 440, 644, 662 нм.

С _кар = 4,7 · Е ₄₄₀ — 0,268 · (5,134 · Е₆₆₂ + 20,44· Е₆₄₄) (1)

Из значений инстинкций при этих длинах волн вычисляется концентрация пигмента в ацетоновой вытяжке в мкг/мл. Исходя из найденных концентраций, рассчитывают содержание его в исследуемом образце в мкг/г (2);

(2)

где С — концентрация пигмента (мкг/г);

С_х - концентрация пигмента (мкг/мл);

V — объем вытяжки;

n — коэффициент разбавления;

m — навеска.

2.2.2. Определение содержания аскорбиновой кислоты методом титрования

Для определения аскорбиновой кислоты (витамин С) берется образец 1,0г и переносится в ступку, добавляется 10мл смеси кислот (1% раствор соляной кислоты и 1% раствор щавелевой кислоты в соотношении 1:4), растирается до однородной массы и переносится в мерную колбу на 25мл , в которой объем раствора доводится до метки смесью кислот. Полученный раствор отфильтровывается. В колбу для титрования помещается 10мл дистиллированной воды и добавляется 5,0мл гомогенизированного раствора. В каждую колбочку для титрования вносится на кончике ножа KJ и 5-6 капель 1% раствора крахмала. Титруется 0,001 Т раствором KJO₃ до перехода в синий цвет. Рассчитывается содержание витамина С по формуле (3) :

(3)

где

Х – содержание витамина С в мг%;

Т – титр KJO_3;

V – объем вытяжки;

V_{1 –} объем вытяжки, взятой на титрование;

а – количество KJO_{3 ,} пошедшее на титрование;

N – масса навески.