Тема 20. Лейкоцитарная формула и ее изменение при патологии. Лейкозы (2 часа)

Цель занятия: изучить нормальные и патологические форменные элементы делой крови, изучить морфологические изменения крови при лейкозах и показать диагностическую и пргностическую ценность клинического исследования периферической крови.

Вопросы для подготовки к занятию.

1. Что понимают под лейкоцитарной формулой? Какие бывают сдвиги лейкоцитарной формулы?

2. Что понимают под лейкозом и какие виды лейкозов различают? Причины и патогенез лейкозов.

3. Чем отличается лейкоз от патологического лейкоцитоза. Оснащение: микроскоп с иммерсионной системой —

12 шт., иммерсионное масло — 12 фл., мазки крови с лейкоцитозом — 24 шт., мазки с лейкозной кровью — 24 шт.

Лейкоцитарная формула — это процентное соотношение различных форм лейкоцитов крови. При определенных пато­логических процессах наблюдаются изменения в лейкоцитар­ной формуле (табл. 2).

Лейкоформула пишется в строку по начальным буквам названия лейкоцитов:

Б	Э	Нейтрофилы				Л	М
		М	Ю	П	С

0,5—1 3—7 — 0,5—1 3—5 40—50 30—50 4—8

Подсчет лейкоцитарной формулы ведут по мазкам крови. Для этого мазок крови мысленно делят на три части. В ме­сте проведения мнимой линии наносят каплю иммерсионного масла и исследуют под микроскопом. В мазке определяют четыре таких места. В каждом месте считают 25 или 50 раз­личных лейкоцитов (всего 100 или 200 клеток). Исследова­ние мазка проводят по системе лабиринтов, начиная с края мазка вглубь и вновь на край. Такая система исследования объясняется тем, что лейкоциты в силу своих физических свойств располагаются не одинаково: лимфоциты — в глуби­не мазка, нейтрофилы и мон,оциты — по краю.

72

Таблица 2

Лейкоцитарная формула здоровых животных (Кудрявцев А. Л.,974)

Вид животного	Базофилы	Эозинофилы	Нейтрофилы			Лимфоциты	Моноциты
			Ю	П	С

Лошадь 1,0 4,0 4,0 54,0 34,0 3,0

КРС 1,0 6,5 0,5 3,0 28,0 57,5 3,5

Овца 0,5 7,5 1,0 4,0 40,0 45,0 3,0

Свинья 0,5 2,5 1,0 3,0 44,0 45,0 4,0

Собака 0,5 6,0 — 4,0 55,0 31,0 3,5

Кролик 1,0 2,0 7,0 27,0 56,0 7,0

Мышь 1,0 2,0 3,0 23,0 68,0 3,0

Каждый замеченный лейкоцит немедленно записывают

или откладывают на счетной машине.

Те м а 21. Осмотическая резистентность и скорость оседания эритроцитов в норме и при патологии (2 часа)

Цель занятия: ознакомиться с методами определения ос­мотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) и скоро­стью оседания эритроцитов (ООЭ).

Вопросы для подготовки к занятию

1. Что понимают под осмотической резистентностью эритроцитов?

1. Причины изменения ОРЭ.

3. Причины изменения скорости оседания эритроцитов. Под осмотической резистентностыо эритроцитов (ОРЭ)

понимают устойчивость их к гипотоническим растворам хло­ристого натрия. Различают минимальную и максимальную осмотическую резистентность: в первом случае гемолизу под­вергаются только эритроциты, обладающие наименьшей ре­зистентностью, во втором случае все эритроциты теряют ге­моглобин, т. е. наступает полный гемолиз крови. ОРЭ зави­сит от белковолипидной оболочки эритроцитов, их возраста. Оболочка эритроцитов проницаема для воды и непроницаема для белков и коллоидов. Эритроциты, помещенные в изото­нический физиологический раствор хлористого натрия (0,85%), сохраняют свой состав.

73

В гипотоническом растворе эритроциты поглощают воду, увеличиваются в объеме и, на­конец, разрушаются, и гемоглобин выходит из эритроцитов в раствор. Концентрация хлористого натрия, в котором начи­нается гемолиз, служит мерой устойчивости осмотической резистентности эритроцитов. ОРЭ у животных поддерживается на определенном уровне (табл. 3).

Таблица 3 Осмотическая резистентность эритроцитов у здоровых животных

(р-р хлористого натрия , %)

Осмотическая Резистентность эритроцитов	Вид животного
	ло-шадь	крс	мрс	сви-нья	со-бака	кро-лик	курица
Максимальная	0,39	0,43	0,43	0,46	0,33	0,3	0,32
Минимальная	0,58	0,66	0,66	0,76	0,46	0,44	0,49

Гемолиз -— разрушение стромы эритроцитов с выделени­ем из них гемоглобина,

Опыт 1. Метод определения осмотической резистентности

эритроцитов

Принцип метода. Эритроциты в гипотонических раство­рах набухают, лопаются, гемоглобин выходит из них в окру­жающую жидкость (происходит гемолиз).

В 24 пробирки наливают 1% раствор в нисходящих дозах: в первую — 0,7, в последнюю — 0,24 мл (в каждой по­ следующей пробирке раствора меньше на 0,02 мл), и доли­вают дистиллированной водой до 1 мл. Получается ряд про­бирок с постепенно снижающейся концентрацией хлористого натрия.

Затем в каждую пробирку добавляют по одной капле кро­ви (можно дефибринированной), содержимое пробирок тща­тельно размешивают и оставляют их на 15-мин. на столе при комнатной температуре. После этого отмечают концентрацию поваренной соли в двух пробирках: в одной раствор пова­ренной соли начинает окрашиваться в желтый цвет (мини­мальная резистентность), в другой раствор окрашивается в интенсивно красный цвет (полный гемолиз — максимальная резистентность),

74

Опыт 2. Техника определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ) по методу Панченкова (табл. 4)

Форменные элементы крови находятся в ней в виде сус­пензии. Если кровь предохранить от свертывания, то в тече­ние определенного времени происходит оседание всех ее фор­менных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов). Разделение крови на плазму и форменные элементы колеб­лется в определенных пределах и зависит от белкового соста­ва крови, вязкости, содержания в крови холестерина, леци­тина.

Таблица 4 Показатели СОЭ у здоровых животных (мм/ч)

Время, мин.	Вид животного
	ло-шадь	крс	мрс	свинья	собака	кро-лик	курица
15	40	0,1	0,2	3	0,2	0,2	2
30	40	0,2	0,4	8	0,7	10	10
45	60	0,4	0,6	20	0,9	17	17
60	64	0,5	0,8	30	2,5	25	25

Принцип метода. Кровь, предохраненная от свертывания при стоянии, разделяется на два слоя: нижний слой, состо­ящий из осевших на дно эритроцитов, и верхний, состоящий из прозрачной плазмы.

В капилляр аппарата Панченкова набирают 5% р-р ли­моннокислого натрия до метки Р (раствор) и выдувают его на часовое стекло. Далее дважды набирают в тот же капил­ляр до метки К кровь и выдувают ее на часовое стекло с ли­моннокислым натрием и тщательно перемешивают. Отноше­ние лимоннокислого натрия и крови 1:4. Полученной цитрат-ной кровью наполняют капилляр до метки К и помещают в штатив аппарата Панченкова на час. Через некоторое время эритроциты начинают оседать на дно пипетки, а поверх них образуется слой плазмы, толщина которого измеряется мил­лиметровыми делениями на капилляре (мм/ч).

Оснащение: животные, дистиллированная вода, 1 % р-р -хлористого натрия, 5% раствор лимоннокислого натрия, ча­совые стекла, кровь, прибор Панченкова, пипетки с делени­ями до 0,01 и на 1 мл, штативы, пробирки.

75