Микрофлора рук и предметов окружающей среды

Осуществляется взятием смывов с рук обследуемых лиц, с посуды, поверхности столов, досок и т. д. При взятии смыва с рук пользуются стерильными ватными тампонами, которые перед употреблением смачивают в среде Кесслера. Смывы делают с обеих рук, тщательно протирая ладони, межпальцевые промежутки и подногтевые пространства сначала левой руки, а затем правой. Смывы с поверхности предметов делают с помощью трафаретов из проволоки, имеющих площадь 25 см². Тампоны помещают в пробирки со средой Кесслера и посевы выдерживают в термостате при температуре 43°С в течение суток. При наличии брожения в среде Кесслера делают высев на среду Эндо. Колонии, подозрительные на кишечную палочку, подвергают дальнейшей идентификации.

ДЕМОНСТРАЦИИ

1. Определение микробного числа воздуха по методу Коха и с помощью аппарата Кротова. Определение микробного числа водопроводной воды.

2. Определение числа общих колиформных бактерий методом мембранных фильтров.

3. Определение фекального загрязнения предметов обихода и рук персонала.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

1. Бригады студентов учитывают результаты изучения биохимических свойств, чувствительности к антибиотикам ранее выделенной культуры.

2. Бригады студентов учитывают посевы воздуха по методу Коха:

определяют микробное число воздуха, изучают культуральные, морфологические и тинкториальные свойства выросших колоний.

3. Каждый студент производит посев отпечатков пальцев на чашку с МПА.

4. Один студент в бригаде производит посев смыва с рук на среду Кода.

5. Две бригады студентов производят посев слизи из зева на сахарный бульон, ЖСА и кровяной агар.

6. Две бригады студентов засевают слизь из носа на солевой бульон, ЖСА и кровяной агар.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Что такое популяция, биотоп и микробиоценоз?

2. Что такое экосистема?

3. Что такое микробиоценоз?

4. Какие существуют экологические среды микробов и какие из них являются антропогенными?

5. Какова роль экологических сред в распространении инфекционных заболеваний?

6. По каким критериям производится оценка санитарно-бактериологического состояния экологических сред: почвы, воды, воздуха и др.?

7. Какие микроорганизмы относятся к санитарно-показательным для воды, воздуха, почвы?

8. На основании каких показателей оценивается санитарно-микробио-логическое состояние почвы?

9. На основании каких показателей оценивается санитарно-микробио-логическое состояние воздуха?

10. На основании каких показателей оценивается санитарно-микробио-логическое состояние воды?

11. На основании каких показателей оценивается санитарно-микробио-логическое состояние пищевых продуктов?

12. Что такое коли-титр и коли-индекс воды?

13. Что такое микробное число воды?

14. Какие методы применяются для определения фекального загрязнения воды?

15. Как определяется микробное число воды?

16. Чему равняются микробиологические и паразитологические показатели питьевой воды?

17. Как проводится определение фекального загрязнение персонала и предметов обихода?

ЗАНЯТИЕ №9

Тема:

• Медицинская экология микроорганизмов (продолжение): нормаль­ная микрофлора тела человека.

План занятия:

1. Качественный и количественный состав микрофлоры организма человека.

2. Методы определения состава микрофлоры тела человека. Дисбактериоз.

ВВОДНЫЕ ЗАМЕЧАНИЯ

Сочетание микробных ассоциаций, встречающихся в организме человека, составляет его микрофлору. Микробные биоценозы, сформировавшиеся в различных полостях тела человека в процессе эволюции и в результате селекции наиболее приспособленных к условиям существования характеризуются относительным постоянством. Но на качественный и количественный состав микроорганизмов влияют многие факторы: возраст, пол, особенности питания, микробы окружающей среды, и в особенности антибиотики и другие химио-терапевтические и иммунологические препараты, применяемые в лечебно-профилактических целях.

Формирование состава микрофлоры регулируется антагонистическими и синергетическими отношениями между отдельными ее представителями в составе биоценозов, а также контролируется физиологическими факторами микроорганизма.

Микрофлора тела человека представлена постоянно находящимися микроорганизмами в той или иной полости (автохтонная или индигенная микрофлора) и случайной или факультативной (аллохтонной) флорой. К первой группе - облигатной или резидентной - относятся микробы, максимально приспособленные к существованию в организме человека - это сапрофиты и условно-патогенные виды. Основу нормальной микрофлоры человека составляют облигатно-анаэробные бактерии. Факультативная и транзиторная микрофлора является временной и необязательной. В ее состав входят также сапрофитные и условно-патогенные микроорганизмы. Иногда в организме здоровых людей могут встречаться патогенные микробы и вирусы.

Естественной формой существования в природе любых микроорганизмов является иммобилизованное состояние, т.е.99,9% бактерий обитает в виде фиксированных к различным поверхностям микроколоний, заключенных в полисахаридный гликокаликс бактериального происхождения, который защищает микроорганизмы от других микробов, бактериофагов и прочих неблагоприятных факторов. Представители автохтонной микрофлоры в животном организме способны фиксироваться лишь к строго определенным рецепторам кожи и слизистых, образуя при этом биопленку, защищающую слизистые от колонизации другими микроорганизмами. Элементами, ответственными за специфическую адгезию, являются поверхностные структуры бактерий, содержащие пектины, которые комплементарны соответствующим рецепторам, расположенным на мембранах эпителиальных клеток.

Несмотря на определенную стабильность, состав автохтонной бактериальной популяции в биопленке может изменяться под влиянием разнообразных факторов (фармакологические препараты, промышленные яды, пестициды, радиация, стрессы, гормоны и т.п.). В тех случаях, когда воздействующие факторы по своей интенсивности превышают компенсаторные возможности микробной экосистемы, возникающие дисбиотические нарушения могут стать пусковым механизмом развития и поддержания различных патологических состояний. В настоящее время существенно расширился спектр клинических синдромов и патологических состояний, патогенез которых может быть связан с изменением состава и функций нормальной микрофлоры (диарея, запоры, колиты, гастриты, дуодениты, язвенная болезнь, коагулопатии, гипо-и гипертензия, острая мезентериальная ишемия, гипо- и гиперхолестеринемия, кариес, моче- и желчекаменная болезнь, злокачественные новообразования и др.).

Некоторые представители нормальной микрофлоры человека относятся к условно-патогенным (стафилококки, эшерихии, бактероиды и др.). А поэтому при определенных условиях (снижение колонизационной резистентности, смена среды обитания, ослабление защитных сил организма и др.) становятся причиной эндогенных инфекций различной локализации.

Микрофлора кожи. Кожа, особенно её открытые части, обсеменены различными микробами. Микрофлора кожи складывается не только из микробов, находящихся на поверхности, но и в глубине кожи (волосяные мешочки, протоки сальных и потовых желез). На грязной коже многие микробы способны не только сохранять жизнеспособность, но и размножаться. На поверхности чистой кожи микроорганизмы быстро гибнут.

Неповреждённые кожные покровы для большинства микроорганизмов, в том числе и патогенных, непроходимы. При нарушении же целостности кожных покровов, а также при снижении общей резистентности микроорганизма на коже могут возникать различные заболевания: гнойничковые элементы, инфицированные мацерации, вызванные бактериями, грибками, вирусами.

Микрофлору кожи составляют микроорганизмы как постоянно живущие на ней, так и разнообразная заносная микрофлора, попадающая из внешней среды (из воды, воздуха, почвы) при соприкосновении с загрязнёнными объектами внешней среды или полостями организма (рот, кишечник, полость носа и др.).

Преобладающим представителем кожной микрофлоры являются анаэробные пропионобактерии (преимущественно Р.ances). Здесь же в значительных количествах присутствуют стафилококки, дифтероиды, грибы рода Candida. Микрофлора коньюктивы, как правило, по составу схожа с микрофлорой кожи.

Микрофлора полости рта разнообразна и многочисленна, поскольку в ротовой полости создаются благоприятные условия для жизнедеятельности микроорганизмов. Это щелочная реакция слюны, пищевые остатки, «термостатная» температура и влажность. Особенно много их локализуется в зубном налёте, между зубами, в криптах и лакунах миндалин. В ротовой полости встречается более 300 видов микроорганизмов. Их можно разделить на постоянную (резидентную) и факультативную микрофлору. Более многочисленны анаэробы (бактероиды, пептококки, лептотрихии, фузобактерии, вейлонеллы).

Резидентную группу составляют стрептококки (Str.salivarius, Str. mutans Str. sanguis), непатогенные стафилококки, диплококки, коринебактерии, лактобациллы, вейлонеллы, трепонемы (Tr. Buccalis ), дрожжеподобные грибы (Candida albicans), актиномицеты, микоплазмы, простейшие.

Среди факультативных микроорганизмов встречаются энтеробактерии (роды Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus), синегнойная палочка, спорообразующие - бациллы, клостридии, а также пептострептококки и пептококки. Некоторое время в ротовой полости могут персистировать вибрионы, спирохеты, дифтерийная палочка, менингококки и др.

В поддержании количественного и качественного постоянства нормальной микрофлоры полости рта главную роль играет слюна, обладающая антибактериальной активностью за счёт содержания в ней ферментов (лизоцим, лактоферрин, пероксидаза, нуклеаза) и секреторных иммуноглобулинов. Индивидуальные колебания в составе микрофлоры полости рта зависят от возраста, гигиенических навыков, диеты, общей резистентности организма и резистентности слизистых оболочек, наличия дефектов зубов.

Нормальная микрофлора полости рта обеспечивает её защиту за счёт конкуренции, антагонизма по отношению к патогенным микроорганизмам, таким как дифтерийный возбудитель, патогенные стафилококки и

стрептококки, менингококки, условно-патогенные и патогенные грибы. В случае же нарушения микрофлоры, то есть возникновения дисбактериоза, патогенные и условно-патогенные микробы могут вызывать заболевания органов полости рта (кариес, парадонтоз, гингивит) или обеспечивать, так называемую «нисходящую инфекцию» из полости рта в глотку, гортань, желудок, трахею, бронхи, лёгкие.

Микрофлора желудка бедна, поскольку большинство попадающих сюда микроорганизмов погибают под действием соляной кислоты желудочного сока. Однако при нарушении общего и местного гомеостаза в желудке могут появляться условно-патогенные микроорганизмы, которые способствуют возникновению гастритов и язвенной болезни (Helicobacter).

В тонком кишечнике в норме микроорганизмы либо отсутствуют, либо их количество невелико. Из выявляемых бактерий чаще обнаруживаются энтерококки, лактобактерии. Иногда высеваются сарцины, грибы.

В толстом кишечнике регистрируется самая разнообразная по составу микрофлора. Биомасса микроорганизмов, заселяющих кишечник взрослого человека, составляет 2,5 - 3 кг и включает в себя до 450 видов. Нормальная микрофлора кишечника на 92 - 95% состоит из строго анаэробных видов, остальная часть-аэробы.

Микроорганизмы толстого кишечника

Анаэробные бактерии Грамотрицательные бактерии Вacteroides	Аэробные Грамотрицательные бактерии Е.соli
B.fragilis B.putidum и др. группа Veillonella Грамположительные бактерии	Enterobacter, Citrobacter, klebsiella, Proteus, providential, Pseudomonas Грамположительные бактерии
Лактобактерии: L. fermentum, L acidophilis, L platinum. Бифидобактерии B. bifidum B. longum B. infantis, B. adolescentis, B. fermentum	Bac.subtillis, Bac. brevis, молочнокислые бактерии, дифтероиды, энтерококки
Группа Спороносные бактерии Cl. perfringens, Cl. tetani Cl. botulinum Cl. sporogenes Группа шаровидных Peptostreptococcs Sp. Peptococcus. Sp	Стафилококки и микрококки, грибы рода Candida Плесневые грибы Группа актиномицетов A. israelii и др.

Кишечную микрофлору делят на облигатную и факультативную. К облигатным микробам относят буфидумбактерии, лактобактерии, бактероиды, кишечные палочки, энтерококки. К факультативным бактериям толстого кишечника относят сапрофитные, условно-патогенные, патогенные виды микробов.

Представители нормальной микрофлоры, обладая высоким сродством к рецепторам энтероцитов и адгезируя с ними, формируют на поверхности слизистых защитный биослой, обеспечивающий колонизационную ре-зистентность. Вместе с тем нормальная микрофлора способствует созреванию, особенного у детей раннего возраста, общего и местного иммунитета. Благодаря этому возрастает синтез иммуноглобулинов, комплемента, лизоцима.

В процессе жизнедеятельности нормальной кишечной флоры выделяются органические кислоты и антибиотические вещества (колицины, лактолин, низин, стрептоцин), что препятствует размножению болезнетворных и гнилостных бактерий, а вместе с тем способствует снижению синтеза аммиака, токсических аминов, фенола, сероводорода, крезола и других токсических продуктов.

Нормальная кишечная аутофлора принимает активное участие в процессах пищеварения, расщепляя поступившие из тонкого кишечника нерасщепленные белки, жиры и углеводы, а образующиеся при этом продукты, стимулируют перистальтику Кишечная аутофлора принимает участие в биохимических процессах жирового и пигментного обмена, в частности обмена холина, желчных и жирных кислот с образованием дезоксихолевой кислоты, копростерина, уробилина. Кишечная микрофлора благоприятно влияет на процессы всасывания и обмена веществ, утилизации кальция, железа, витамина Д. Она тормозит процессы декарбоксилирования пищевого гистидина, уменьшая тем самым синтез гистамина, а, следовательно, снижает аллергический потенциал энтерального питания для организма.

Благодаря нормальной кишечной аутофлоре происходит эндогенный синтез многих витаминов (В1, В2, В5, В6, В, РР, К, С, Н) и незаменимых аминокислот, а также улучшается всасывание витаминов Д и Е, поступивших в организм с пищей.

Микрофлора урогенитальной системы. Почки, мочеточники и моча в мочевом пузыре в норме стерильны. На наружных половых органах мужчин и женщин обнаруживаются микобактерии смегмы (Mycobacterium smegmalis), непатогенные, иногда патогенные стафилококки, диплококки, коринебактерии, микоплазмы, но пейзаж микроорганизмов однообразен, включает 2-3-4 вида. Уретра женщин обычно стерильна. Уретра мужчин имеет немногочисленную микрофлору: непатогенные кокки, сапрофиты, дрожжи. Микрофлора влагалища разнообразна, но непостоянна, зависит от многих причин, в том числе и от функции яичников, от возраста и общей резистентности организма, а также от уровня гликогена в клетках эпителия влагалища и рН влагалищного секрета. Сразу после рождения женщины происходит заселение влагалища лактобактериями, затем появляется кокковая флора. В зрелом возрасте кроме лактобактерий и непатогенных кокков появляются непатогенные стрептококки, клебсиеллы, бактероиды, анаэробы, микоплазмы, дрожжевые грибы, грибы рода Candida. Но основным и важнейшим представителем нормальной микрофлоры влагалища является Вас. vaginalis (палочка Дедерлейна -лактобактерии). В некоторых случаях в микрофлоре влагалища появляются и вызывают заболевания такие микробы, как патогенные или условно-патогенные стафилококки, стрептококки, синегнойные палочки, клебсиеллы, хламидии, а также микробные ассоциации. Хламидии, вызывающие распространённое в настоящее время заболевание хламидиоз, не являются представителем нормальной микрофлоры влагалища.

Поражения органов урогенитального аппарата, вызванные микоплазмами и хламидиями, сложны как в диагностике, так и в лечении. Трудности в диагностике вызваны особенностями строения и культивирования микроорганизмов.