1) Получение медной соли глицина
В пробирке приготовьте Cu(OH)2 из 5 капель CuSO4 и 3 капель NaOH, затем добавьте 6 капель раствора глицина и нагрейте до кипения. Образуется комплексное соединение ярко-синего цвета, в этом комплексном соединении α-аминокислота – глицин является лигандом. Комплексообразующая способность α-аминокислот играет важную роль при выводе радиоактивных, токсичных веществ из организма человека.
2) Осаждение белка солями тяжелых металлов
В две пробирки налейте по 1-2 мл раствора яичного белка и медленно, при встряхивании, по каплям добавьте в одну пробирку сульфата меди, а в другую – раствор ацетата свинца. Отметьте образование труднорастворимых солеобразных соединений белка. Данный опыт иллюстрирует применение белка как противоядие при отравлении солями тяжелых металлов. Белки состоят из α-аминокислот, для них так же характерны реакции комплексообразования.
3) Денатурация белка
Денатурацией называется разрушение природной конформации макромолекулы белка под внешним воздействием.
В пробирку налейте 4 мл раствора яичного белка (альбумин) и нагрейте на горелке до кипения. Отметьте помутнение раствора. Охладите содержимое пробирки. Разбавьте водой в 2 раза.
4) Цветные реакции белков
Цветные реакции проводят с раствором яичного белка.
а) Биуретовая реакция – реакция на обнаружение пептидной связи
(-СО-NH-) в молекуле белка.
Поместите в пробирку 5 кап. 10% раствора белка, добавьте 5 кап. 10% раствора NaOH и 2 кап. раствора CuSO4. Появляется фиолетовое окрашивание, указывающее на наличие в белковой молекуле пептидных связей.
Белок + CuSO4 + NaOH ® ярко-фиолетовое окрашивание
б) Ксантопротеиновая реакция – реакция на присутствие ароматического кольца в a-аминокислотах).
Поместите в пробирку 5 кап. раствора белка, добавьте 3 капли концентрированной НNО3, осторожно нагрейте до кипения, появляется осадок желтого цвета, охладите и добавьте 10-15 кап. 20% раствора NaOH, осадок окрашивается в оранжевый цвет.
Белок + HNO3 ® желтый осадок + NaOH ® оранжевый осадок
Какие ароматические α-аминокислоты могут входить в состав этого белка?
Глава 3 количественный анализ Принципы количественного анализа
Количественный анализ осуществляют химическими и физико-химическими методами.
Химические методы основаны на проведении реакций между определяемым образцом и специально подобранным реагентом. По количеству затраченных реагентов или по количеству полученных продуктов реакции рассчитывают содержание анализируемого вещества. Различают гравиметрический (весовой) и титриметрический (объемный) методы анализа.
Гравиметрический анализ основан на количественном выделении компонента из анализируемой пробы и его точном взвешивании. Этот анализ дает точные результаты, но он трудоемок и вытесняется другими методами анализа.
Титриметрический анализ заключается в точном измерении объема раствора химического реагента, необходимого для завершения реакции с веществом, содержащимся в изучаемой пробе.
Физико-химические методы анализа основаны на изучении количественной зависимости между составом и физическими свойствами объекта. В этих методах применяют сложную и чувствительную аппаратуру, их достоинствами являются объективность, возможность автоматизации и высокая скорость получения результатов. К таким методам относится колориметрия (фотоколориметрия).