4. Неспецифические тесты

Обнаружение в исследуемом материале продуктов метаболизма бактерий (обнаружение токсинов при ботулизме)

Неспецифические тесты, по характеру отклонения которых можно судить о наличии патологических изменений, специфических для инфекционного процесса определенной этиологии (нарастание активности трансаминазы)

Лекция 2 Патогенные и условно-патогенные кокки

Грамположительные кокки Стафилококки Стрептококки Пневмококки

План Стафилококки 1.Заболевания 2. Причины развития стафилококковой инфекции 3. Естественная среда обитания 4.Таксономическое положение 5. Морфологические свойства клеток и колоний 6. Культуральные и биохимические свойства 7. АГ-е свойства 8. Факторы патогенности: ферменты и токсины 9. Лабораторная диагностика 10. Чувствительность к антимикробным препаратам

Стафилококки Род Staphylococcus

Причина оппортунистических заболеваний От лат. Opportunus- незащищенный, открытый для нападения 120 нозологических форм заболеваний вызывают стафилококки: Пневмония, Сепсис , Токсический шок, Эндокардит (летальный исход в 75% от стафилококков) , Менингит, Целлюлит, Конъюнктивит, Офтальмит, Карбункулы, Фурункулы, В 40% случаев хирургических осложнений

И тем не менее относят к условно-патогенным микроорганизмам Очень широко распространены в природе Постоянно находятся на коже и слизистых оболочках человека и животных

Развитие инфекционного процесса

При поражении кожи и слизистых оболочек проникают в подлежащие слои и при ослабленном иммунитете могут вызвать воспалительную реакцию.

Зависит от: 1.места проникновения 2. количества попавших бактерий 3. иммунореактивности организма

Наиболее подвержены стафилококковой инфекции: Новорожденные (недоношенные) Их матери Пожилые люди Пациенты при кортикостероидной терапии Пациенты при нерациональной антимикробной терапии На фоне ДИСБАКТЕРИОЗА!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ДИСБАКТЕРИОЗ. Нерациональная антимикробная терапия приводит к развитию дисбактериоза, поскольку при этом уменьшается антагонистическое действие нормальной микрофлоры

Естественная среда обитания стафилококков Слизистая оболочка носа, носоглотки На коже, особенно на выходе апикальных желез → Воздух, пыль, предметы обихода, одежда На халатах мед. персонала стафилококки обнаруживают в 16-64% случаев

Таксономия и систематика рода Staphylococcus

9-е издание определителя Берги 1994 г. Группа факультативно-анаэробных грамположительных кокков Каталазоположительные !!!

Около 30 видов: S.aureus - типовой вид S.epidermidis S.saprophyticus S.sciuri S.caseolyticus

Морфологические свойства стафилококков Клетки сферической формы Диаметр 0.5-1.5 мкм Хаотические скопления Грам+ Микрокапсула ПС Жгутиков нет Спор не образует Пили на ППС

\\Морфологические и тинкториальные свойства стафилококков – окр по грамму и фуксином\\Характерное для стафилококков –гроздъевидное расположение клеток\\Ультратонкий срез клеток S.aureus \\

Морфология колоний S.aureus Крупные колонии – 5 мм в диаметре от белого до золотисто-желтого цвета

\\Ультратонкий срез 1-суточного бактериального газона S. aureus \\

Культуральные и биохимические свойства S.aureus 1. факультативные анаэробы (O/F-тест = +/+) 2. Каталаза + 3. Оптимальная t° роста – 35-40°С 4. рН – 7,0 - 7,5 5. рост на среде с 6,5-10% NaCl 6. рост на среде с 40% желчи

Антигенные свойства S.aureus АГ свойствами обладают: микрокапсула, пептидогликан, тейхоевые кислоты, белок А и др. белки. Главный поверхностный АГ - Тейхоевая кислота!!!!!!!!! (многоатомные спирты, сахара, аминокислоты, фосфаты)

Белок А S.aureus Составляет 6% от массы клеточной стенки. На 325 молекул ПГ – 1 молекула белка А Активность неблагоприятна для макроорганизма : Неспецифическое взаимодействие с IgG (Fc-фрагментом) Повреждение тромбоцитов Связывание белков системы комплемента Препятствует фагоцитозу

Факторы патогенности стафилококков Экзоферменты: 1. Коагулаза - свертывание плазмы крови 2. ДНК-аза - только у S.aureus 3. Протеинкиназа -желточный фактор- на жирные кислоты 4. Фосфатаза – разрушает мембраны 5. Гиалуронидаза - гидролизует гиалуроновую кислоту 6. Стафилокиназа - фибринолизин -лизирует сгустки фибрина

Токсины: 1. Гемолизин – 4 типа: α,β,γ,δ (дельта) - лизирует эритроциты кролика и барана, но не человека 2. Лейкоцидин - киллерное действие на нейтрофилы и макрофаги 3. Эксфолиативный токсин - синдром обожженной кожи 4. Пирогенный экзотоксин - токсический шок 5. Энтеротоксин - пищевые отравления

Выводы по патогенности S.aureus: обладают большим потенциалом патогенности, но не все признаки 100% присутствуют, все постоянно меняется

Лабораторная диагностика Выделение чистой культуры Идентификация строится: 1. окраска по Граму 2. выявление гроздъевидного расположения клеток 3. каталаза+ (тест с Н2О2) 4. Коагулаза+ 5. O/F тест 6. Фаготипирование

Чувствительность к антимикробным препаратам

Метициллинчувствительные чувствительны к: метициллину оксациллину клоксациллину диклоксациллину Иногда сочетают с рифампицином или гентамицином

Метициллинустойчивые чувствительны к: ванкомицину вместе с рифампицином или с гентамицином

Патогенные cтрептококки

План Стрептококки 1. Заболевания 2. Новые инвазивные формы стрептококковой инфекции 3. Таксономия и систематика 4. Классификация 5. Морфологические свойства 6. Культуральные и биохимические свойства 7. Факторы патогенности 8. Антигенные свойства. Классификация. 9. Лабораторная диагностика 10. Чувствительность к антимикробным препаратам

\\Род Streptococcus (цепочки из клеток)\\

Заболевания: Ангина, Рожистое воспаление, Скарлатина, Эндокардит, Ревматизм, Гломерулонефрит, Родовой сепсис, Фарингит, Тонзиллит

\\Стрептококковая ангина. Лопнувшие нагноившиеся фолликулы и фибринозные налеты образовали плотную пленку. \\ Стрептококковая ангина Фолликулы и фибринозные налеты образовали плотную пленку \\

Новые инвазивные формы стрептококковой инфекции Некротический миозит Некротический фасцит Некротический шок Септический шок

\\Стрептококковая ангина. Некротические изменения в тканях и биопленки. \\

Таксономия и систематика рода Streptococcus S. pyogenes S. agalactiae S. pneumonia S. faecalis (Enterococcus faecalis) S. lactis (Lactococcus lactis)

Классификация стрептококков по способности к гемолизу 1. β – гемолитические 2. α – гемолитические 3. γ - негемолитические

\\Кровяной агар для определения гемолитической активности стрептококков\\

Классификация стрептококков по степени резистентности к физико-химическим факторам 1. рост при температуре 45°С и 10°С 2. способность роста на среде с 40% желчи 3. способность роста на среде с 6,5% NaCl

Классификация стрептококков по совокупности признаков: Гноеродно-гемолитические Стоматические (ротовой полости) Энтерококки (Enterococcus faecalis) Молочнокислые (Lactococcus lactis) Анаэробные кокки

\\Морфологические и тинкториальные свойстваStreptococcus sp. \\

Морфологические свойства Streptococcus sp. Гр+клетки сферической формы Диаметр 0,5-1,0 мкм (редко с заостренными концами 1,5– 0,5 мкм) Диплококки!!!!!!! Жгутиков не имеют Пили – образуют в колониях Спор не образуют Капсула (в организме больного) Образуют цепочки!!!!!!!

\\Цепочки Streptococcus sp. \\Позитивно окрашенные клетки стрептококков\\

Морфология колоний стрептококков Очень мелкие колонии – 0,5-1мм в диаметре Полупрозрачные беловато-сероватые "росинки"

Культуральные и биохимические свойства Streptococcus sp. 1. Хорошо растут на средах с добавлением крови (МПА + 5-7%) 2. факультативные анаэробы(O/F-тест - +/+) 3. Каталаза (–) (главный дифференцирующий тест от стафилококков) 4. Оптимальная t° роста – 37°С, рН – 7,6 -7,8 5. хорошо выносят высыхание в белковом окружении (кровь, гной) 6. В ЖПС – пристеночно-придонный рост (т.к. образуют цепочки)

Факторы патогенности Streptococcus sp. Ферменты: Протеиназа ДНК-аза (стрептодорназа) Фибринолизин(стрептокиназа) Гиалуронидаза Токсины: Гемолизин Эритрогенный токсин Липотейхоивая кислота

Антигенные свойства По АГ различиям ПС и Б клеточной стенки делят на 21 серогруппу (от А до V):

Стрептококки серогруппы А (S. pyogenes ) Стрептококки серогруппы В (S. agalactiae) Стрептококки серогруппы С и G (S. equi, S. zooepidermicus) Стрептококки серогруппы D (В основном – энтерококки) Стрептококки, не содержащие групповой АГ (S.mutans, S. pneumoniae)

Особые АГ свойства стрептококков M-Белок - основной поверхностный антиген стрептококков группы A

\\Белок М в капсулоподобном слое стрептококков\\

Стрептококки серогруппы А S. pyogenes гноеродно-гемолитические, этиологическая причина возникновения ангины, эндокардита, ревматизма, гломерулонефрита, рожистого воспаления, родового сепсиса, фарингита и скарлатины.

Скарлатина от итал. skarlato – красный, багровый Инфекционное токсико-септическое заболевание, сопровождающееся лихорадочным состоянием и ангиной (часто некротической), увеличением лимфоузлов, ярко-красной мелкоточечной сыпью, мощной интоксикацией организма.

Основной путь передачи S. pyogenes - воздушно-капельный, через слизистую оболочку носоглотки. Инкубационный период от 1-12 дней. Развиваются в миндалинах, выделяют токсины, которые попадая в кровь, вызывают общую интоксикацию организма с последующей аллергизацией и осложнениями в виде артритов и нефрита. Первоначальный диагноз ставят по клиническим данным.

АМ препараты при скарлатине: пенициллин, ванкомицин, эритромицин.

Стрептококки серогруппы В S. agalactiae Обнаруживают на слизистых оболочках глотки, прямой кишки, гениталий. У 25% здоровых женщин – бессимптомные носители, но в дальнейшем это может привести к септическому аборту, родовому сепсису, сепсису новорожденных и менингиту новорожденных.

Стрептококки серогрупп С и G S. equi, S. zooepidermicus Комменсалы мочевыводящих путей и урогенитального тракта, но при определенных обстоятельствах могут вызывать заболевания.

Стрептококки серогруппы D В основном – энтерококки Обитатели кишечника здорового человека, но при определенных условиях могут стать причиной развития послеоперационных осложнений, пиелонефрита, бактериального эндокардита, язв при пролежнях и абсцессов различной локализации.

Стрептококки, не содержащие групповой АГ S. mutans – обитатель полости рта, частая причина кариеса, абсцессов, болезней пародонта. S. pneumoniae - пиогенные стрептококки, причина пневмонии, отличаются от остальных стрептококков особыми свойствами.

Лабораторная диагностика при стрептококковых инфекциях По двум направлениям: - Выделение чистой культуры с последующей идентификацией - Определение напряженности иммунитета. При острых инфекциях достаточно выделения возбудителя. При хронических – определение АТ в сыворотке крови.

Выделение чистой культуры стрептококков с последующей идентификацией (4 сут.) 1 сут. – посев материала и бактериоскопия 2 сут.– изучение характера колоний (выявляют мелкие 0,5-1мм, серые, полупрозрачные) и отсев на получение чистой культуры 3 сут.– получена чистая культура на ППС, ставят тесты: каталаза (-) - главный тест, исследование характера роста в ЖПС – придонно-пристеночный рост (т.к. образует цепочки). Посев на чувствительность к АМ препаратам 4 сут.– окончательная идентификация

Чувствительность стрептококков к АМП 1-й ряд – пенициллин, цефалоспорин 2-й ряд – ванкомицин, эритромицин

Пневмококки Streptococcus pneumoniae