- •Лекция 1 о патогенности микроорганизмов. Задачи и методы клинической микробиологии
- •3. Молекулярно-биологические методы
- •4. Неспецифические тесты
- •Лекция 2 Патогенные и условно-патогенные кокки
- •Развитие инфекционного процесса
- •Таксономия и систематика рода Staphylococcus
- •1881 – Открыт л. Пастером 1884 – к. Френкель и а. Вейксельбаум доказали его этиологическую роль в развитии пневмонии
- •Общая характеристика сем. Enterobacteriaceae
- •Деление e.Coli на группы по патогенности и проявлению клинических симптомов:
- •2. Характеристика сем. Vibrionaceae
- •Вибрионы нео1(наГи)
- •2.Подвижность (жгутик содержит адгезины) 3. Хемотаксис 4. Факторы адгезии и колонизации 5. Ферменты: муциназа, протеазы, нейраминидаза, лецитиназа 6. Эндотоксин 7. Бактериоцины
- •Характеристика патогенных вибрионов
- •Характеристика c. Diphtheriae
- •Основной фактор патогенности
- •Антигенные комплексы y. Pestis
- •Bacillus anthracis - сибирская язва
- •3 Морфологические формы: 1. Вегетативная бескапсульная 2. Вегетативная капсульная – полипептид 3. Споровая
- •Компоненты и принцип действия экзотоксина Bacillus anthracis
- •Лекция 8 Возбудители туберкулеза
- •К ультуральные свойства мбт
- •Возбудитель болезни Лайма b. Burgdorferi
- •Лекция 11 Условно-патогенные микроскопические грибы
- •Классификация микозов по н. Д. Шеклаковой (1976)
- •Лекция 13 Медицинская вирусология. Возбудители орви
- •2009Г. «Свиной грипп» h1n1sw (реасортант) 18 тыс. Подтвержденных случаев летальных исходов (воз) Возможный кандидат h5n1 (2007г)
- •Защитные механизмы при вирусной инвазии и репликации
- •Лекция 14 Возбудители вирусных гепатитов человека (вгч)
- •2 Группы вг гр. Вгч с парентеральным механизмом передачи инфекции - Blood born hepatitis virus гр. Вгч с энтеральным механизмом передачи инфекции - Food born hepatitis virus
- •Классификация вирусов гепатита
- •Пути передачи вирусов гепатита
- •Маркеры вгв на разных стадиях развития инфекции
- •Особенности репродукции вгс
- •Почкование вич - budding
- •Геном вич
- •Типы клеток, поражаемых вич
- •Азидотимидин, зальцитабин, эфавиренц тератогенны
- •16 Лекция Вирусы гепатита а и е
- •Жизненный цикл пикорна- и калицивирусов (вг а и е)
- •16 Лекция Прионы - особые инфекционные агенты pr-protein in-infection Полиморфное семейство инфекционных белков, имеющих общие структурные особенности
К ультуральные свойства мбт
Аэробы Опт. Тº - 37 ºС Медленнорастущие
Питательные среды для МБ Требуют сложных по составу сред: Левенштейна - Йенсена (яичный желток с картоф. мукой, глицерином и солями) Синтетическая среда Сотона (аспарагин, глицерин, цитрат железа, фосфат калия)
На ППС – через 4-6 недель морщинистые колонии с неровными краями На ЖПС – нежная пленка на поверхности, утолщаясь падает на дно
\\Рост M. tuberculosis на среде Левенштейна – Йенсена\\Рост M. tuberculosis (a) M. bovis (б) в глицериновом бульоне \\
Ускоренный метод Прайса Патогенные МБ располагаются в виде жгутов-нитей (от англ. сord-жгут, веревка) Наличие Cord-фактора – гликолипид (трегалоза-6,6-димиколят)
\\Cord+ культура M. tuberculosis \\
Устойчивость МБТ к факторам внешней среды Очень устойчивы: в пыли – до 3-х мес. в воде – до 5 мес. Почве – до 6 мес. Солнечный свет- гибель через 1 час Антисептики – медленно (фенол›24 час), многие не эффективны
Биохимические свойства Некоторые признаки вместе с культуральными особенностями используют для дифференцирования видов МБ 1. ниациновый тест + (накопление никотиновой кислоты) 2. редукция нитратов в нитриты
Факторы патогенности M. tuberculosis Специфичность действия патогенных факторов выражена в образовании гранулем и поражении тканей. - Не образуют экзотоксины - Поражение тканей - липиды: 1. Воск Д 2. Жирные кислоты: миколовая, миколиновая, фтиоидная, туберкулостеариновая 3. Корд-фактор (трегалоза-6,6-димиколат) 4. Сульфатиды 5. Фосфатиды
Антигенные свойства АГ-протеиновый комплекс ТУБЕРКУЛИН (кожно-аллергические реакции Пирке и Манту)
Реакция Пирке Служит для выявления первичного заражения детей. Туберкулин наносят на кожу и через каплю производят неглубокие кожные насечки
Кожно-аллергическая реакция Манту Для отбора подлежащих ревакцинации лиц. Туберкулин вводят внутрикожно. Внутрикожное введение туберкулина вызывает у инфицированных ( и у вакцинированных?) МБ лиц местную воспалительную реакцию в виде инфильтрата и покраснения
\\Реакция Манту\\
Диагностика туберкулеза 1.Микроскопия: - Люминесцентная (флюорохромом аурамином) - Световая (метод Прайса) - Окраска по Цилю-Нильсену 2.Культуральные методы: - выращивание 3 недели и более - чувствительность к ПТП 3. Кожно-аллергические пробы (Пирке и Манту) 4. Молекулярно-биологические исследования: б) ПЦР 5. неспецифические тесты: а) Газожидкостная хроматография (на миколовые кислоты)
\\Флакон для сбора материала\\
Чувствительность к АМП 1. Стрептомицин (блокирование синтеза белка на этапе элонгации) 2. Тубазид, фтивазид, изоницид, ГИНК (блокирование синтеза миколовых кислот) 3. ПАСК (нарушение синтеза фолиевой кислоты) Препараты второго ряда: 1. Циклосерин (ингибитор синтеза пептидогликана) 2. Рифампицин (блокирование транскрипции)
\\Противотуберкулезные препараты (таблица)\\Патогенез\\
Лекция 9 Патогенные спирохеты сем. Spirochaetaceae (Спирохеты spiro – завиток, chaetal – волос) сем. Leptospiraceae
План
Заболевания
Таксономия рода Treponema
Клинические проявления сифилиса
Тропические трепонематозы
Трепонемы сапрофиты
T. рallidum: тинкториальные морфологические, культуральные, АГ- свойства
Лабораторная диагностика сифилиса, чувствительность к АМП
Род Borrelia- боррелиозы
Возбудитель возвратного эпидемического тифа
Возбудители возвратного эндемического тифа
Патогенные спирохеты: сем. Spirochaetaceae род Treponema род Borrelia
сем. Leptospiraceae род Leptospira
Заболевания, вызываемые патогенными спирохетами и лептоспирами род Treponema – трепонематозы: 1. сифилис (люис) - повсеместно 2. явс (фрамбезия) - тропики 3. пинта – Центральная и Южная Америка 4. беджель – невенерический люис – пустыня род Borrelia – боррелиозы: 1. возвратный эпидемический тиф - повсеместно 2. возвратный эндемический клещевой тиф - локально 3. болезнь Лайма – повсеместно род Leptospira – лептоспироз (водная лихорадка )- повсеместно
Тропические трепонематозы: Явс (фрамбезия), Пинта, Беджель. Возбудители передаются не только половым путем. Контактный путь – распространители – больные с кожными высыпаниями
1 вид T.pallidum 1 п/вид T. pallidum subsp.pallidum – сифилис (люис) 2 п/вид T. pallidum subsp.pertenue – явс (фрамбезия) 3 п/вид T. pallidum subsp.endemicum (синоним T.bejel) – беджель (невенерический люис) 2 вид T.carateum - пинта 3 вид T.paraluiscuniculi – сифилисоподобное заболевание кроликов
T.pallidum - возбудитель сифилиса Сифилис - венерическое заболевание с поражением всех систем, тканей и органов
Клинические проявления сифилиса Продолжительность различных стадий сифилиса
1. Клинические проявления первичного сифилиса Инкубационный период- 21-24 дня Ulcus durum – твердый шанкр, изменение регионарных лимфатических узлов Длительность 6-8 нед. 1. серонегативный сифилис – 3-4 нед. 2. серопозитивный сифилис – 3-4 нед. Общее недомогание (особенность - боль в костях по ночам!!!)
2. Клинические проявления вторичного сифилиса Начало с 18-20 недели заболевания, длительность 6-8 нед. высыпания на коже и слизистых: розеолы и папулы Поражены все органы (нервная и костная система) Вторичный латентный сифилис (без лечения) Возможны рецидивы Высыпания при сифилисе Розеолы – первая сыпь. Пятна розового цвета, не возвышающиеся над кожей, не зудящие, не шелушащиеся, исчезающие или резко бледнеющие при надавливании. Пятна располагаются отдельно, не сливаясь.
Папулы – сыпь над уровнем кожи. Плотные на ощупь, покрыты блестящей как бы полированной кожей. Цвет вначале розовый переходит в медно-красный (мяса). Без зуда, безболезненные, отцветая, шелушатся по периферии в виде венчика – воротничек Биетта, рубцов не оставляют.
3. Клинические проявления третичного сифилиса Без лечения наступает через 5-6 лет и позже Повреждены все ткани и органы Поверхностно - бугорки (syphilis III tuberculosa) Глубокие узлы – гуммы (syphilis III gummosa) Высыпания сменяются латентным периодом - третичный латентный сифилис Иммунитет слабый
Сравнительный анализ возбудителей тропических трепонематозов и сифилиса Общие: 1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства, гомологичная ДНК и клинические проявления 2. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение 3. АГ идентичность 4. Иммунологическое родство Различия: 1. по эпидемическим показателям (пути передачи и ареал распространения). Основной путь передачи инфекции при тропических трепонематозах - контактный
Непатогенные трепонемы (сапрофиты или комменсалы) T. buccalis – нормальная микрофлора T. dentium –(редко гингивит и болезни периодонта) T. vincentii - (в ассоциации с Fusobacterium necrophorum - некротическая ангина Венсана-Плаута-Симоновского)
\\Спирохеты-cапрофиты (T.buccalis) в зубном налете\\
Сравнительный анализ непатогенных (сапрофитных) трепонем и возбудителей сифилиса Сапрофитные трепонемы по морфологическим и тинкториальным свойствам практически не отличаются от патогенных. Они немного шире, крупнее и короче: ширина- 0,2- 0,25мкм, длина – 3-15 мкм. 1 - 8 периплазматических жгутика Отличаются по культуральным свойствам: сапрофиты растут на искусственных питательных средах
Первооткрыватели T. pallidum 1905 Зоолог F.Schaudinn (Фриц Шаудин), Венеролог E. Hoffman (Эрих Хофман) 1907 Врач Parodi (Пароди) – воспроизвел сифилис на кроликах
Морфологические свойства T.pallidum - Гр- спиралевидные клетки - 8-12 завитков (одинаковой высоты и формы) - Длина - 5-20 мкм, ширина- 0,1-0,2 мкм - Периплазматический жгутик
\\Морфология T.pallidum\\Морфология T.pallidum\\Люминесцентная микроскопия\\Электронная микроскопия\\ Позитивно окрашенная клетка T.pallidum
Схема клеточной стенки T.pallidum В НР нет ЛПС и входит кардиолипин (13% всей липидной фракции)
Покоящиеся формы T.pallidum Цисты L-формы - способность к реверсии Размножение – бинарное поперечное деление
Культуральные свойства T.pallidum Строгий анаэроб Опт.Тº – 35-37 ºС Среда Nelson’а (вытяжка из почечной и мозговой ткани) Рост на искусственных средах приводит к потере вирулентности
Устойчивость T.pallidum к физико-химическим факторам Неустойчивы во внешней среде На предметах обихода остаются живыми до высыхания При 40-42ºС – кратковременное повышение активности, затем быстрая гибель или образование цист 0,3-0,5% раствор HCl, уксусная кислота, 50-55º спирт лишает подвижности KMnO4 - не действует (1:1000) Ртуть, мышьяк, висмут - гибель
Факторы патогенности эндотоксин – в кровяную систему и ЦНС
АГ структура T.pallidum Фракции: Протеиновая – появляется на 2-5-е сут после появления твердого шанкра Полисахаридная на 5-7-е сутки после ТШ 2 липидных – неиммуногенные
Лабораторная диагностика сифилиса Содержимое твердого шанкра, розеол, папул, пунктат регионарных лимфатических желез Микроскопия: Темное поле, Раздавленная капля, По Романовскому-Гимзе Серологические методы: Реакция Вассермана (RW) - РСК Отборочные микрореакции (МР) с плазмой:VDRL-Veneral Disease Research Laboratory -тест, RPR –Rapid Plasma Reagin – тест (РПР -тест) РИФ, РИТ, РПГА, ИФА
РСК протекает в 2 фазы: 1) Взаимодействие АТ, АГ и комплемента, в результате свободный комплемент связывается с образовавшимся комплексом АГ—АТ (специфич. фаза); 2)индикация реакции сенсибилизир. эритроцитами (неспецифич. фаза).
Реакция Вассермана (RW) относится к группе реакций связывания комплемента (А. Р. Wassermann, нем. бактериолог, 1866-1925) - иммунологическая реакция, применяемая в диагностике сифилиса)
Не-трепонемные тесты 1) РПР - Принцип основан на использовании угольных частиц, покрытых кардиолипиновым антигеном для определения антикардиолипиновых антител в сыворотке или плазме. Положительная реакция: темные крупные агрегаты кардиолипиновых частиц
2) Reagin – реагины. Смесь АТ - IgM и IgА. Это аутоАТ, вырабатывающиеся против липопротеина мембран клеток при их разрушении. В эукариотических клетках – кардиолипин обнаруживают в сыворотке больных сифилисом через 2-3 недели после заражения
РИФ - Определение антител в сыворотке больного с сорбированным антигеном трепонем РИТ – реакция иммобилизации трепонем и боррелий РПГА -реакция пассивной гемагглютинации. Используют птичьи эритроциты, покрытые антигеном T.pallidum для определения антител в сыворотке или плазме человека. Положительные образцы – пассивная гемагглютинация
Чувствительность к АМП Пенициллин- 40 тыс ед/мл- утрата подвижности через 1,5 час эритромицин
Род Borrelia- боррелиозы B. recurrentis – возвратный эпидемический тиф B. persica возвратный B. duttonii эндемический клещевой B. hispanica тиф B. caucasica B. armenica B. burgdorferi – болезнь Лайма
B. recurrentis Возбудитель возвратного эпидемического тифа Тинкториальные свойства B. recurrentis Открыты 1868 г., т.к. хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красителями
Морфологические свойства B. recurrentis - длина- 5-25 мкм, ширина 0,3-0,6 мкм, - 3-10 завитков, заостренные концы, - 7-30 фибрилл
Культуральные свойства B. recurrentis Микроаэрофилы, орtо – 37оС Рост на средах с асцитической жидкостью или сывороткой, кусочками тканей и органов, в желточном мешке куриного эмбриона В окружающей среде быстро погибают
Клинические проявления возвратного эпидемического тифа Возвратный эпидемический тиф – антропонозное трансмиссивное инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением ЦНС, печени, селезенки и других внутренних органов. Переносчик – платяная, реже головная вошь
Патогенез эпидемического возвратного тифа Втирание инфицированной вши в место укуса →эндотоксин в кровяную систему и ЦНС →Интоксикация → лихорадка, геморрагические образования, очаги некроза в печени и селезенке
Лабораторная диагностика при эпидемическом возвратном тифе Кровь во время приступа лихорадки Микроскопические методы: Мазок по Романовскому-Гимзы или фуксином, темнопольная микроскопия Серологические методы: РИФ,РИТ
Профилактика эпидемического возвратного тифа - Борьба с педикулезом
Чувствительность B. recurrentis к АМП Пенициллин, левомицетин, хлортетрациклин
Боррелии возвратного эндемического клещевого тифа Возвратный эндемический тиф – зоонозное трансмиссивное инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, поражением ЦНС, печени, селезенки и др. внутренних органов. Природный резервуар – грызуны Болеют люди и животные!!!
Патогенез Укус аргасового клеща рода Ornithodoros (продолжительность жизни клеща ~10 лет). На месте укуса образуется папула (отличие от эпидемического возвратного тифа). Эндотоксин – в кровяную систему и ЦНС →Интоксикация → лихорадка, геморрагические образования, очаги некроза в печени и селезенке
Периоды боррелиоза
Лабораторная диагностика при эндемическом возвратном тифе Кровь во время приступа лихорадки Микроскопические методы: Мазок по Романовскому-Гимзы или фуксином, темнопольная микроскопия Серологические методы: РИФ,РИТ Для дифференцирования от антропонозных боррелий: Биопробы!!!
Профилактика эндемического возвратного тифа - уничтожение грызунов и насекомых
Чувствительность боррелий возвратного тифа к АМП Тетрациклиновый ряд левомицетин ампициллин