Составы питательных смесей для выращивания гриба

Aspergillus niger

№ п/п	Компоненты смеси	Полная смесь	Без азота	Без фосфора	Без калия
1	Сахароза	5,0	5,0	5,0	5,0
2	NH4NO3	0,3	-	0,3	0,3
3	KH2PO4	0,1	0,1	-	-
4	MgSO47H2O	0,1	0,1	0,1	0,1
5	FeSO47H2O	3 капли	3 капли	3 капли	3 капли
6	NaH2PO4	-	-	-	0,1
7	KHSO4	-	-	0,1	-
8	NaCl	-	0,2	-	-
9	Лимонная кислота	1,0	1,0	1,0	1,0

3. Через 6-8 дней опыт ликвидировать так как к этому времени гриб уже вполне разовьётся.

При ликвидации опыта прежде всего отмечать состояние культуры:

1. особенности мицелия - сплошная плёнка или островками, плотная или студенистая, складчатая или гладкая и т.п.

2. спороношение - обильное или слабое, зрелые (чёрные) или незрелые (белые) спорангии и т.п.

Далее определить сырой вес мицелия. В колбах, где мицелий образовал сплошную плёнку, сначала слить жидкость из колбы, а затем перенести мицелий на фильтровальную бумагу, просушить и взвесить. В вариантах опыта, где гриб плёнки не образовал, его надо сначала отфильтровать на воронке, а затем взвесить.

Результаты опыта записать в таблицу.

	№ п/п	Вариант опыта	Состояние культур		Сырой вес мицелия
			мицелий	Спорообразование	вес в г	в % к контролю
	1	Полная смесь
	2	Без азота
	3	Без фосфора
	4	Без калия

Реактивы и оборудование: 4 плоскодонные колбы ёмкостью 200-250 мл, мерный цилиндр на 100 мл, бумага для этикеток, нитки, культура гриба, спиртовка, спички, весы и разновесы, шпатели, стеклянные палочки, воронки большие, фильтры бумажные большие, микробиологическая петля, пипетка, термостат, воронки большие, фильтры большие, пинцет, ватные пробки, NH₄NO₃, NaH₂PO₄, KH₂PO₄, KHSO₄, MgSO₄, NaCl, FeSO₄ - 1%-ный раствор, сахароза, лимонная кислота.

Работа 7. СМЕЩЕНИЕ рН ПИТАТЕЛЬНОГО РАСТВОРА ПОД ВЛИЯНИЕМ ПОГЛОТИТЕЛЬНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ КОРНЕЙ

Ключевые слова: Зона корня, эффективно поглощающая воду и ионы. Ионы, выделяемые корнем в обмен на поглощаемые. Кажущееся свободное пространство клеточной стенки и его объём. Обменная адсорбция. Конкуренция между ионами за проникновение в корень. Свидетельства активной составляющей поглощения воды корнем. Адсорбция разных ионов коллоидами почвы. Причина подкисления почвенного раствора в ходе поглощения ионов корнем. Протонная АТФаза плазмалеммы. Физиологически кислые и щелочные удобрения. Известкование почв. Зависимость поглощения ионов корнем от интенсивности транспирации, света, дыхания, температуры, рН питательного раствора. Влияние подкисления почвенного раствора на поглощение фосфатов корнем. Влияние химического состава клеточного сока на его рН.

Поглощение ионов корневой системой растения представляет собой сложный процесс, складывающийся из двух фаз - быстрой (физико-химической) и медленной (метаболической). Быстрое первоначальное поглощение обусловлено обменной адсорбцией ионов в зоне клеточной стенки. Последующее медленное поглощение связано с функциональной активностью плазмалеммы. Важную роль в ионообменных процессах играет ион Н⁺, который быстро вытесняется из клеточной стенки катионами, поступающими из почвенного раствора на первом этапе поглощения, и активно выделяется плазмалеммой на втором этапе. Почва обладает высокой буферностью, поэтому под влиянием растений рН почвенных растворов меняется незначительно. Искусственные питательные растворы не обладают такой буферностью и поэтому их рН легко сдвигается в кислую сторону под влиянием деятельности корневых систем.

ХОД РАБОТЫ

1. Включить иономер, убедившись в том, что электроды помещены в стаканчик с дистиллированной водой, а из диапазонов измерений выбран диапазон «-1 – 19».

2. В маленький стаканчик налить 50 мл раствора Кнопа (в 1 литре содержится: Ca(NO₃)₂ -1 г, KH₂PO₄ - 0,25 г, MgSO₄7H₂O - 0,25 г, KCl - 0,125 г, FeCl₃ - 0,0125 г). и добавить к нему 10 капель 0,1н раствора NaOH.

3. Перемешать раствор Кнопа в стаканчике стеклянной палочкой, после чего полиэтиленовой пипеткой отобрать из стаканчика пробу объёмом 2 мл, которую перенести в чистую пустую пробирку.

4. К 2 мл пробы, отобранной в пробирку, добавить 1 каплю индикатора крезолового красного, аккуратно встряхнуть пробирку и определить значение рН. Значение рН оценивают, сравнивая окраску в пробе с окраской в пробирках индикаторной шкалы.

5. Отбирая пробы, добавлять, по каплям, к раствору Кнопа в стеклянном стаканчике 0,1н раствор NaOH чтобы значение рН достигло значения 7,8 - 8,0. Число добавляемых капель щелочи следует постепенно уменьшать, по мере того, как значение рН будет приближаться к требуемой области.

1. После достижения нужного значения рН раствора, взять 15-20 проростков злаков (ячмень, овёс и т.п.) с достаточно сформировавшейся корневой системой, аккуратно (не разрывая проростков) удалить зерновки препаровальной иглой, связать растения в пучок и погрузить их корни в стаканчик с раствором Кнопа.

Таблица

Изменение рН питательного раствора в результате поглотительной

деятельности корней

Значение рН в начале опыта	Длительность наблюдений, мин	Значение рН питательного р-ра	Какова тенденция изменения рН?
	10
	20
	30
	40
	50
	60

2. Дождаться стабильного значения показаний иономера и записать их исходное значение в графу таблицы «Значение рН в начале опыта». Вести наблюдения за изменениями кислотно-основных свойств раствора, каждые 10 минут фиксируя значения рН по показаниям иономера. Интервалы между измерениями использовать для выполнения второй части работы (см. ниже). Результаты измерений записывать в таблицу на странице 26.

3. Пользуясь миллиметровой бумагой, построить график зависимости изменения рН раствора от времени:

Место вклейки графика

5. Какие явления происходят в растворе?

Реактивы и оборудование: химический стаканчик на 50 мл, мерный цилиндр на 50 мл, иономер, магнитная мешалка с магнитным грузиком, глазные пипетки, проростки ячменя или овса, нитки, раствор Кнопа, раствор NaOH 0,1 н.