- •Общие требования
- •Осмотические свойства растительной клетки
- •1.1. Явление экзоосмоса
- •1.2. Явление плазмолиза формы плазмолиза, деплазмолиз
- •1.3. Получение «клеточки траубе»
- •2.1. Избирательное накопление нейтрального красного (нейтральрота) в закончивших рост клетках листа элодеи
- •2.2. Проницаемость для мочевины разновозрастных клеток листа
- •Клеточного сока методом плазмолиза
- •4.1. Определение интенсивности транспирации в приборе веска
- •4.2. Определение интенсивности транспирации методом кратковременных взвешиваний на торсионных весах
- •Составы питательных смесей для выращивания гриба
- •7.2. Определение рН клеточного сока с помощью иономера
- •Работа 9 клеточные и ферментные яды
- •9.2. Определение активности каталазы в семенах злаков и листьях элодеи
- •Работа 10 выделение пигментов растений и их изучение
- •1. Пигменты клеточного сока - антоцианы. Хроматографическое разделение антоцианидинов
- •2. Получение спиртовой вытяжки смеси пигментов
- •3. Изучение химических свойств хлорофилла
- •Работа 11 изучение свойств пигментов хлоропластов
- •1. Получение вытяжки пигментов хлоропластов
- •2. Разделение пигментов хлоропластов методом хроматографии на бумаге
- •3. Разделение пигментов по методу крауса
- •4. Изучение спектральных свойств пигментов
- •5. Подготовка к выполнению работы 12
- •Работа 12 выделение тепла при дыхании
- •Влияние температуры на интенсивность дыхания прорастающих семян
- •Работа 13 определение температуры повреждения цитоплазмы по изменению её проницаемости
3. Разделение пигментов по методу крауса
Метод Крауса основан на разной растворимости различных пигментов хлоропласта в спирте и бензине.
ХОД РАБОТЫ
Налить в пробирку 2 мл полученной вытяжки листа, прилить к ней 3 мл бензина и 2-5 капель воды и хорошо встряхивать в течение 2-3 минут. Затем дать отстояться. Если компоненты смеси отмерены точно, то жидкость в пробирке разделится на 2 слоя: бензин, как более легкий будет наверху, а спирт - внизу. Спиртовой слой будет окрашен в желтый цвет от присутствия в нем ксантофиллов, а верхний, бензиновый, будет зеленым от хлорофилла. Второй желтый пигмент - каротин - тоже перейдет в этот верхний слой. Если разделение пигментов идет плохо, то нужно добавить еще 2-3 капли воды и хорошо взболтать. От избытка воды спиртовой слой может помутнеть, тогда надо добавить немного спирта., взболтать и дать отстояться.
Реактивы и оборудование: спиртовая вытяжка смеси пигментов зеленого листа, бензин, спирт, вода, пробирка, градуированная на 5-10 мл - 1, обычная пипетка, штатив с пробирками.
4. Изучение спектральных свойств пигментов
Рассмотреть полученную вытяжку зеленых пигментов в пробирке в проходящем и отраженном свете. В проходящем свете вытяжка имеет зеленый свет, а в отраженном - красный ( в последнем случае пробирку следует рассматривать с той же стороны, с какой падает свет). Красный свет вытяжки связан с тем, что поглощенная хлорофиллом световая энергия испускается пигментом с другой длиной волны. Это свойство указывает на способность хлорофилла к флуоресценции, что свидетельствует о значительной фотофизической активности хлорофилла.
Рассмотреть спектры поглощения зеленой вытяжки и желтых пигментов в спектроскопе.
Закрепить в лапке штатива спектроскоп на уровне глаз.
Установить перед спектроскопом лампу так, чтобы спектр был хорошо виден.
Поставить на пути лучей перед спектроскопом пробирку с зелеными пигментами.
Поставить на пути лучей пробирку с желтыми пигментами после разделения по методу Крауса.
Сравнить спектры поглощения желтых и зеленых пигментов и оформить результаты в виде схем, заштриховав полосы поглощения в соответствующих частях спектра:
|
|
|
Ф |
С |
Г |
З |
Ж |
О |
К |
|
|
|
|
Сплошной спектр источника света |
|||||||||||||
|
|
|
Ф |
С |
Г |
З |
Ж |
О |
К |
|
|
|
|
Спектр поглощения зеленых пигментов (хлорофиллов) |
|||||||||||||
|
|
|
Ф |
С |
Г |
З |
Ж |
О |
К |
|
|
|
|
Спектр поглощения желтых пигментов (каротиноидов)
Реактивы и оборудование: штатив, спектроскоп, настольная лампа, вытяжки зеленых и желтых пигментов, полученные по методу Крауса.