Клеточного сока методом плазмолиза

Ключевые слова: Свойства растворов (гипотонический, изотонический, гипертонический). Растворы электролитов и не электролитов. Изотонический коэффициент. Внешние структуры растительной клетки (клеточная стенка, плазмалемма). Протопласт — живое содержимое клетки. Диффузия и осмос. Осмотическое давление. Осмометр. Тургор. Тургорное давление. Плазмолиз и его формы. Последовательность фаз плазмолиза. Формула Вант-Гоффа. Абсолютная температура. Зависимость осмотического давления от температуры и концентрации растворенного вещества.

Метод основан на подборе раствора, имеющего осмотическое давление равное осмотическому давлению клеточного сока. Поскольку в гипертоническом растворе растительная клетка всегда обнаруживает признаки плазмолиза - отхождения протопласта от клеточной стенки, - необходимо приготовить шкалу растворов известной концентрации, погрузить в них срезы одной и той же ткани на определённое время, после чего рассмотреть состояние клеток под микроскопом в порядке убывания концентраций. Необходимо определить концентрацию, при которой плазмолиз уже не наблюдается.

ХОД РАБОТЫ

Пользуясь бюретками с водой и c раствором NaCl, отмерить в бюксы по 10 мл раствора хлорида натрия 10-ти различных концентраций, в соответствии с пропорциями, указанными в таблице:

№ проб	мл Н2O	мл 1 н NaCl	Концентрация раствора (н)	Какая форма плазмолиза преобладает?
1	9	1	0,1
2	8	2	0,2
3	7	3	0,3
4	6	4	0,4
5	5	5	0,5
6	4	6	0,6
7	3	7	0,7
8	2	8	0,8
9	1	9	0,9
10		10	1,0

Приготовить срезы эпидермиса лука и через равные интервалы времени (3 минуты) опускать их в растворы в порядке убывания концентраций, т.е. начиная с раствора №10 на 30 минут.

Через 30 минут после опускания первых срезов в бюкс №10 начать просмотр срезов в порядке их закладки в капле соответствующего раствора. Результатом наблюдения должно быть указание преобладающей формы плазмолиза в правом крайнем столбце таблицы. Наблюдателю следует определиться в том, какая из форм плазмолиза (уголковый, вогнутый, выпуклый) наблюдается более чем в 50% клеток. Если преобладают неплазмолизированные клетки - в таблице следует записывать: «плазмолиза нет».

Определить изотоническую концентрацию, как среднюю между той, которая вызывает уголковый плазмолиз, и ближайшей к ней, которая плазмолиза не вызывает.

Зная изотоническую концентрацию, вычислить осмотическое давление клеточного сока в атмосферах по формуле: Р=RTiC,

где Р - осмотическое давление в атмосферах, R - газовая постоянная, равная 0,0821 (латм)/(мольград), Т -абсолютная температура раствора, равная 273+температура в градусах Цельсия во время опыта, i -изотонический коэффициент (для не электролитов всегда равен 1, для электролитов всегда больше 1), C -концентрация (в молярном выражении) растворенного вещества.

Реактивы и оборудование: 10 бюксов с пробками, 2 бюретки, предметные и покровные стёкла, бритвенные лезвия, препаровальные иглы, дистиллированная вода, 1 н раствор NaCl, репчатый лук, микроскоп, полоски фильтровальной бумаги.

Работа 4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ ТРАНСПИРАЦИИ ВЕСОВЫМ МЕТОДОМ

Ключевые слова: Водный баланс и его составляющие. Транспирация — верхний концевой двигатель водного тока (источник энергии для его работы). Другие функции транспирации, типы транспирации (устьичная, кутикулярная, перидермальная). Методы оценки транспирации (прямые и косвенные). Показатели, характеризующие транспирацию (интенсивность, продуктивность, транспирационный коэффициент, относительная транспирация). Зависимость интенсивности транспирации от условий среды (скорость ветра, влажность, освещенность, концентрация СО₂). Уравнение Дальтона. Зависимость транспирации от размеров листа, его опушения, наличия других близко растущих растений. Гуттация и условия, в которых она наблюдается. Гидатоды — органы выделения жидкой воды, влияние недостатка влаги в листьях на способность поглощать воду.

Транспирацией называют физиологический процесс испарения воды растением. Наибольшее значение имеют устьичная и кутикулярная транспирация. Интенсивность транспирации является важнейшим физиологическим показателем состояния растения. Она измеряется количеством воды, испарённой с единицы площади листа за 1 час: Т_i=m_воды/S·t.

Существуют прямые и косвенные методы определения интенсивности транспирации. При прямом методе оценивается количество воды, испарённой растением. Для этого, например, пользуются поглотителями. При косвенном определении интенсивности транспирации учитывают не количество воды, а какой-либо иной параметр, например изменение веса растения. В данной работе используются косвенные методы определения интенсивности транспирации: в приборе Веска и на торсионных весах.