- •Микробиологические основы
- •Введение
- •1. Противомикробные мероприятия
- •Физические методы:
- •2. Химические методы:
- •1.1. Стерилизация
- •1.1.1. Физические методы стерилизации.
- •1.1.2. Химический метод стерилизации.
- •Сравнительная характеристика некоторых методов низкотемпературной стерилизации
- •1.1.3. Контроль стерильности изделий медицинского назначения.
- •1.2. Дезинфекция
- •1.2.2. Контроль качества дезинфекции.
- •1.3. Антисептика
- •1.3.1. Химические антисептические средства.
- •1.3.2. Биологические антисептические средства.
- •1.4. Механизмы антимикробного действия дезинфектантов и антисептиков
- •1.5. Резистентность микроорганизмов к антисептикам и дезинфектантам
- •1.6. Контроль за распространением устойчивых к антибиотикам,антисептикам и дезинфектантам вариантов бактерий и грибов
- •1.7. Микробиологический контроль за присутствием микроорганизмов в глф антибиотиков, антисептиков и дезинфектантов
- •1.7.1. Методика контроля стерильности противомикробных препаратов.
- •2. Методические рекомендации к самостоятельному выполнению заданий по контролю качества противомикробных мероприятий
- •2.1. Стерилизация изделий из стекла и контроль ее качества
- •2.2. Стерилизация медицинского инструментария и контроль ее качества
- •2.3. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах капельных инфекций
- •2.4. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах кишечных инфекций
- •2.5. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Гигиеническая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.6. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Хирургическая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.7. Контроль стерильности готовых лекарственных форм антибиотиков и антисептиков
- •14 Дней 14 дней
- •2.8. Определение общего микробного числа в готовых лекарственных формах дезинфектантов
1.4. Механизмы антимикробного действия дезинфектантов и антисептиков
Микробостатическое и микробоцидное действие антисептиков и дезинфектантов связано с их способностью:
вызывать деструкцию структур микробной клетки,
повышать проницаемость цитоплазматической мембраны,
окислять входящие в состав микробной клетки органические соединения,
вступать в метаболические реакции с ферментами и метаболитами.
Таблица 3
Некоторые механизмы антибактериального действия
антисептиков и дезинфектантов
Мишень |
Антисептик, дезинфектант |
Механизм действия |
Клеточная стенка |
Глютаровый альдегид |
Перекрестная сшивка белков |
ЭДТА, другие проникающие агенты |
Грамотрицательные бактерии: удаление Mg2+, высвобождение некоторых ЛПС |
|
ЦПМ |
ЧАС |
Генерализованное повреждение мембраны, включающее фосфолипидные бислои |
Хлоргексидин |
Низкие концентрации нарушают целостность мембран, высокие - вызывают коагуляцию цитоплазмы |
|
Диамины |
Индуцирование потери аминокислот |
|
Фенолы |
Утечка содержимого |
|
Макромолекулы |
Формальдегид |
Перекрестная сшивка белков, РНК, ДНК |
Глютаровый альдегид |
Перекрестная сшивка беков в клетке |
|
ДНК |
Акридины |
Вставка молекулы акридина между двумя слоями пар оснований в ДНК |
Галогены |
Ингибирование синтеза ДНК |
|
Перекись водорода, ионы серебра |
Разрывы цепи ДНК |
|
Тиоловые группы |
Соединения серебра |
Модификация связанных с мембранами ферментов |
Окислительно-восстановительные ферменты |
Галогены |
Окисление тиоловых групп до дисульфидов, сульфоксидов и дисульфоксидов |
Пероксигены |
Перекись водорода: образование свободных гидроксильных радикалов, которые окисляют тиоловые группы в белках и ферментах |
1.5. Резистентность микроорганизмов к антисептикам и дезинфектантам
Отдельные виды или формы микроорганизмов обладают природной устойчивостью к рабочим растворам антисептиков и дезинфектантов (рис.3), а в последние десятилетия наблюдается формирование и распространение форм микроорганизмов с приобретенной резистентностью к этим препаратам.
Прионы |
Cocidia (Cryptosporidium) |
Споры (Bacillus spp.) |
Микобактерии (M. tuberculosis, M. avium) |
Цисты |
Мелкие вирусы без оболочки (Poliovirus) |
Трофозоиты (Acanthamoeba) |
Грибы (Candida spp., Aspergillus spp.) |
Грамотрицательные неспорообразующие бактерии (Pseudomonas spp., Enterobacteriaceae) |
Крупные вирусы без оболочки (Enterovirus, Adenovirus) |
Грамположительные бактерии (Staphylococcus spp, Enterococcus spp.) |
Вирусы с суперкапсидом (HIV, HBV) |
Рис.3. Резистентность к антисептикам и дезинфектантам в порядке убывания
Таблица 4
Некоторые механизмы резистентности микроорганизмов
к антисептикам и дезинфектантам
Тип резистентности |
Микроорганизмы |
Примеры препаратов |
Механизм резистентности |
Непроницаемость клеточной стентнки, ЦПМ |
Грамотрицательные бактерии |
ЧАС, триклозан, диамины |
Модификация мембраны и гликокаликса – снижение проникновения препарата |
Микобактерии |
Хлоргексидин, ЧАС, Глютаровый альдегид |
Воски клеточной стенки препятствуют проникновению |
|
Споры бактерий |
Хлоргексидин, ЧАС, соединения фенола |
Оболочка споры препятствует проникновению |
|
Грамположительные бактерии |
Хлоргексидин |
Мукоэкзополисахарид снижает диффузию |
|
Инактивация (управляемая хромосомными генами) |
|
Хлоргексидин |
Разрыв молекулы хлоргескидина |
Физиологическая адаптация (фенотипическая) |
Бактерии, образующие биопленки |
|
Пониженный доступ препаратов к нижним слоям клеток в биопленке, снижение метаболизма клеток и др. |