2.3. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах капельных инфекций

Цель: освоить методику контроля качества дезинфекции в очагах капельных инфекций.

Задания:

1. Провести дезинфекцию поверхностей 0,5% раствором хлорамина;

2. Проконтролировать качество дезинфекции.

Материалы: 0,5% раствор хлорамина; трафарет 10×10 см, поверхность лабораторного стола, взвесь суточной 1 млрд. культуры S. aureus, ватные тампоны для контаминации, стерильные тампоны, смонтированные в пробирке с 1 мл 1% тиосульфата натрия, среды: 6,5% солевой бульон, чашки с ЖСА, скошенный МПА, плазма кроличья, реактивы для окраски по Граму.

Методика:

1. Ограничить площадь лабораторного стола или иной поверхности трафаретом 10х10 см;

2. Контаминировать её тампоном, смоченным взвесью стафилококка (дважды по 1 мин); дать высохнуть;

3. Тщательно в течение 10 минут протереть тампоном, смоченным раствором хлорамина (не ниже 20^оС), ограниченную трафаретом и контаминированную стафилококком поверхность.

Методика контроля качества дезинфекции:

1. Проводится не позднее 30-45 минут после дезинфекции;

2. Смыть стерильным ватным тампоном, смоченным в растворе тиосульфата натрия, продезинфицированную площадь (не выходя за границы трафарета);

3. Тампон опустить в пробирку с солевым бульоном;

4. Через 24 часа инкубации в термостате при 37^оС из бульона сделать высев на ЖСА;

5. После 48-часовой инкубации в при 37^оС подозрительные колонии высеять из ЖСА на скошенный МПА, поместить МПА в термостат на 24 часа при 37^оС;

6. Сделать мазки с окраской по Граму из культуры на МПА и поставить пробу на плазмокоагулазу;

7. Ответ об обнаружении золотистого стафилококка дают на основании характера роста на питательных средах, характерной морфологии и положительного теста на плазмокоагулазу;

8. Заключение: дезинфекция считается качественной, если в посевах смывов не выделен золотистый стафилококк.

Рекомендации по выполнению задания:

1. В первый день провести дезинфекцию, сделать смыв и посеять его в солевой бульон; на второй день из солевого бульона сделать высев на среду ЖСА; на четвёртый день отсеять подозрительные колонии на скошенный МПА; на пятый день определить морфологию, поставить тест на плазмокоагулазу и дать заключение.

2. Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.

Контаминация поверхности стола 10×10 см 1 млрд. взвесью стафилококка

Дезинфекция поверхности стола 0,5% раствором хлорамина

К онтроль качества дезинфекции (смыв с поверхности стола)

по Граму

плазма МПА ЖСА солевой бульон

37^оС – 24 ч. 37^оС – 48 ч. 37^оС – 24 ч.

Рис. 6. Общая схема исследования по контролю качества дезинфекции поверхностей в очаге капельных инфекций

2.4. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах кишечных инфекций

Цель: освоить методику контроля качества дезинфекции в очагах кишечных инфекций.

Задания:

1. Провести дезинфекцию посуды 0,5% раствором хлорамина;

2. Проконтролировать качество дезинфекции.

Материалы: 0,5% раствор хлорамина; взвесь суточной 1 млрд. агаровой культуры E. coli, ватные тампоны для контаминации чашек, стерильные тампоны, смонтированные в пробирках с 1 мл 1% тиосульфата натрия, среды: Кесслера, Эндо и ГПС; реактивы для окраски по Граму, кастрюля на 1-2 л., чашки Петри.

Методика:

1. Тампонами, увлажненными взвесью тест-микроба контаминировать внутреннюю поверхность чашки Петри.

2. Контаминированные E. coli и высушенные чашки Петри опускают в раствор хлорамина (температура не ниже 20^оС);

3. После 15-минутной экспозиции чашки вынимают из дезраствора.

4. Методика контроля дезинфекции (не позднее 30-45 минут после дезинфекции):

5. Всю внутреннюю поверхность чашки протереть тампоном, смоченным раствором тиосульфата натрия;

6. Тампон опустить в среду Кесслера, которую поставить в термостат при 37^оС на одни сутки;

7. Сделать высев со среды Кесслера на среду Эндо петлёй и выдержать среду в термостате при 37^оС - 48 часов;

8. Подозрительные колонии (красного и розового цвета гладкой формы), содержащие грамотрицательные палочки, пересеять на ГПС;

9. После суточной инкубации при 43^оС учесть образование кислоты и газа;

10. Ответ об обнаружении кишечной палочки дают на основании характера роста на средах Кесслера и Эндо, грамотрицательной окраски бактерий, ферментации глюкозы с образованием кислоты и газа;

11. Заключение: дезинфекция считается качественной, если из смывов продезинфицированного объекта не выделена кишечная палочка.

Рекомендации по выполнению задания:

1. Ход выполнения: в первый день провести дезинфекцию, сделать смыв с продезинфицированных чашек и посеять смыв на среду Кесслера; на второй день - из среды Кесслера сделать высев на среду Эндо; на четвертый день - отобрать подозрительные колонии, сделать мазок и в случае обнаружения грамотрицательных палочек остаток колонии пересеять на полужидкую ГПС; на пятый день - учесть ферментацию глюкозы и сделать заключение.

2. Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.

Контаминация чашки Петри 1 млрд. взвесью E. coli

Дезинфекция чашки Петри 0,5% раствором хлорамина

К онтроль качества дезинфекции (смыв поверхности чашки)

по Граму

ГПС Cреда Эндо Cреда Кесслера

43^оС – 24 ч. 37^оС – 24 ч. 37^оС – 24 ч.

Рис. 7. Общая схема исследования по контролю качества дезинфекции поверхностей в очаге кишечных инфекций