- •Микробиологические основы
- •Введение
- •1. Противомикробные мероприятия
- •Физические методы:
- •2. Химические методы:
- •1.1. Стерилизация
- •1.1.1. Физические методы стерилизации.
- •1.1.2. Химический метод стерилизации.
- •Сравнительная характеристика некоторых методов низкотемпературной стерилизации
- •1.1.3. Контроль стерильности изделий медицинского назначения.
- •1.2. Дезинфекция
- •1.2.2. Контроль качества дезинфекции.
- •1.3. Антисептика
- •1.3.1. Химические антисептические средства.
- •1.3.2. Биологические антисептические средства.
- •1.4. Механизмы антимикробного действия дезинфектантов и антисептиков
- •1.5. Резистентность микроорганизмов к антисептикам и дезинфектантам
- •1.6. Контроль за распространением устойчивых к антибиотикам,антисептикам и дезинфектантам вариантов бактерий и грибов
- •1.7. Микробиологический контроль за присутствием микроорганизмов в глф антибиотиков, антисептиков и дезинфектантов
- •1.7.1. Методика контроля стерильности противомикробных препаратов.
- •2. Методические рекомендации к самостоятельному выполнению заданий по контролю качества противомикробных мероприятий
- •2.1. Стерилизация изделий из стекла и контроль ее качества
- •2.2. Стерилизация медицинского инструментария и контроль ее качества
- •2.3. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах капельных инфекций
- •2.4. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах кишечных инфекций
- •2.5. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Гигиеническая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.6. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Хирургическая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.7. Контроль стерильности готовых лекарственных форм антибиотиков и антисептиков
- •14 Дней 14 дней
- •2.8. Определение общего микробного числа в готовых лекарственных формах дезинфектантов
2. Методические рекомендации к самостоятельному выполнению заданий по контролю качества противомикробных мероприятий
2.1. Стерилизация изделий из стекла и контроль ее качества
Цель: Освоить методику контроля качества стерилизации.
Задания:
Подготовить к стерилизации и простерилизовать стеклянные пипетки,
Провести контроль качества стерилизации.
Материалы: суховоздушный стерилизатор, пипетки стеклянные, бумага плотная (крафт), бульон Хоттингера, тиогликолевая среда, бульон Сабуро, реактивы для окраски по Граму.
Методика стерилизации:
Провести предстерилизационную очистку и дезинфекцию пипеток: а) погрузить пипетки на 15 минут в 3% раствор перекиси водорода с 0,5% препарата типа «Лотос»; б) промыть пипетки струёй тёплой воды в течение 1 минуты; в) просушить;
Завернуть пипетки в плотную (крафт) бумагу;
Простерилизовать пипетки в суховоздушном стерилизаторе при режиме: температура 180оС, экспозиция 60 минут;
После охлаждения на свободном конце упаковки указать дату и способ стерилизации.
Методика контроля качества стерилизации (рис.4):
В асептических условиях над пламенем спиртовки втянуть стерильные среды Сабуро, Хоттингера, тиогликолевую среду до половины пипетки и выдуть её обратно в пробирку (на каждую среду отдельная пипетка);
Среды Хоттингера и тиогликолевую поместить в термостат при температуре 32оС, бульон Сабуро оставить при температуре 20-22 оС;
Наблюдать за помутнением среды в течение 8 дней;
В случае помутнения сделать препарат-мазок, окрасить его по Граму, микроскопировать для констатации наличия бактерий.
Сделать заключение: стерилизация считается качественной, если во всех средах при восьмидневной инкубации не появился рост бактерий.
Рекомендации по выполнению задания:
Подготовка и стерилизация проводится в первый день, на следующем занятии проводится контроль качества стерилизации.
Наблюдение за средами вести до появления помутнения. В случае помутнения одной из сред делают препарат-мазок и при обнаружении в нем бактерий дают заключение. При отсутствии помутнения в течение 8 дней наблюдение прекращают и дают заключение.
Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.
Пипетки втянуть и выдуть пипетками среды
Стерилизованные Бульон Тиогликолевая Бульон
пипетки Хоттингера среда Сабуро
инкубация инкубация
32оС– 8 сут. комн. t оС– 8 сут.
по Граму
Рис. 4. Методика контроля качества стерилизации предметов из стекла
2.2. Стерилизация медицинского инструментария и контроль ее качества
Цель: Освоить методику контроля качества стерилизации медицинского инструментария.
Задания:
Простерилизовать инъекционные иглы в паровом стерилизаторе (автоклаве);
Провести контроль качества стерилизации.
Материалы: паровой стерилизатор, нестерильные инъекционные иглы; нестерильные бактериологические пробирки, бульон Хоттингера, тиогликолевая среда, бульон Сабуро, реактивы для окраски по Граму.
Методика стерилизации:
Провести предстерилизационную очистку и дезинфекцию игл: а) промыть иглы в проточной воде 5 минут; б) замочить иглы в горячем 3% растворе перекиси водорода с 0,5% препарата типа «Лотос» на 15 минут; в) прополоскать иглы струёй тёплой воды в течение одной минуты;
Поместить иглы в контейнер (бактериологические пробирки);
Простерилизовать иглы в автоклаве: давление 2,0 атмосферы, экспозиция 20 минут.
После стерилизации и охлаждения отметить на контейнере дату и способ стерилизации.
Методика контроля качества стерилизации (рис. 5):
В асептических условиях над пламенем спиртовки погрузить по одной простерилизованной игле в среды Хоттингера, тиогликолевую и бульон Сабуро;
Среды Хоттингера и тиогликолевую поместить в термостат при температуре 32оС, бульон Сабуро оставить при температуре 20-22 оС;
Наблюдать за помутнением сред в течение 8 дней;
В случае помутнения сделать препарат-мазок из помутневшей среды и окрасить его по Граму, микроскопировать для констатации наличия бактерий;
Дать заключение: стерилизация считается качественной, если во всех средах на протяжении восьми дней не появился рост бактерий.
Рекомендации по выполнению задания:
Стерилизацию провести в первый день, погружение простерилизованных игл в питательные среды - на следующем занятии;
Наблюдение за средами вести до появления помутнения, но не больше 8 дней. В случае помутнения одной из сред делают препарат-мазок и при обнаружении в нем бактерий дают заключение. Дальнейшее наблюдение за средами прекращают.
Выполнение задания оформляется в виде протокола в альбоме.
Инъекционные иглы
Стерилизованные бульон тиогликолевая бульон
иглы Хоттингера среда Сабуро
инкубация инкубация
32оС– 8 сут. комн. t оС– 8 сут.
по Граму
Рис. 5. Методика контроля качества стерилизации инструментов