Приложение № 1. Материалы контроля исходного уровня знаний по теме: «Ферменты».

1. Устный индивидуальный опрос.

1. Условия проведения ферментативной реакции и определение активности фермента в лабораторной практике.

2. Классификация и номенклатура ферментов.

3. Биологическое значение ферментов. Локализация ферментов в клетке.

4. Клиническое значение ферментов.

5. Метаболическая терапия, использование в ней ферментов – заместительная терапия.

6. Энзимопатии. Метаболическая терапия, использование в ней ферментов – иммобилизованные ферменты.

Приложение № 2. Формирование новых понятий, умений и навыков.

2.1. Рассказ преподавателя.

Щелочная фосфатаза – металлопротеин, содержится в разных тканях. В состав активного центра фермента входит атом цинка. Считают, что он повышает активность фермента, обеспечивая конформационные изменения и гидролиз моноэфиров ортофосфорной кислоты. Активность фермента возрастает в присутствии ионов магния и хлора. Буферные системы, используемые при определении ЩФ, можно разделить на инертные (барбиталовый, бикарбонатный буфер), ингибирующие (содержащие глицин, пропиламин) и активирующие (включающие в свой состав аминометилпропанол, диэтаноламин, ТРИС-буфер).

Содержится ЩФ в костной ткани, паренхиме и стенках желчных протоков печени, клетках слизистой оболочки кишечника, эпителии канальцев почек, плаценте и других тканях и органах.

Активность ЩФ обнаружена в большинстве биологических жидкостей, включая мочу, экскременты, желчь, слюну, молоко и лимфу.

Щелочная фосфатаза имеет изоформы; каждый изоэнзим сосредоточен в определенном органе. В организме человека три гена кодируют биосинтез фермента: один – печеночный, костный и почечный изоферменты, другой – кишечный изофермент, третий – плацентарную ЩФ. Считают, что в жировой ткани есть изофермент ЩФ.

В норме у взрослых людей в плазме (сыворотке) крови обнаруживается лишь ЩФ печеночного происхождения. У детей в сыворотке крови содержится значительное количество костной ЩФ; в небольшом количестве она может встречаться у юношей до 25 лет. После окончания формирования скелета присутствие её в сыворотке крови свидетельствует о наличии в организме доброкачественных или злокачественных остеопатий.

В последнее время особое внимание онкологов привлекают изоферменты ЩФ, используемые как маркеры онкологических заболеваний: плацентарный, плацентарноподобный, образованные как в злокачественных опухолях, так и в сыворотке.

Внедрение в клиническую биохимию техники определения с использованием моноклональных антител дало возможность разработать метод, позволяющий специфически выявлять отдельные изоферменты ЩФ. Радиоиммунологические исследования с применением моноклональных антител позволяет надежно обнаруживать в крови маркеры новообразований. Несмотря на высокую специфичность, эти методы пока не находят должного широкого применения в диагностике заболеваний вследствие высокой стоимости оборудования и тест-систем.

2. Изучение инструкции к выполнению практической работы.