Малярия

Малярия — длительно протекающая инфекционная болезнь с периодическими приступами лихорадки, увеличением печени, селезенки и прогрессирующей анемией.

Ежегодно малярией в мире инфицируется 300 млн человек, из которых 120 млн нуждаются в медицинской помощи, а 1,1 млн умирают.

Возбудитель — малярийный плазмодий, относится к типу простейших, классу споровиков, семейству плазмодид, роду плазмодиев.

С клинической точки зрения малярию подразделяют на две основные формы. Более опасна тропическая или злокачествен­ная (трехдневная), вызываемая Plasmodium falciparum. Более доброкачественная малярия, вызываемая Plasmodium vivax (доб­рокачественная трехдневная), Plasmodium ovale (подобная

3. Дневной) и Plasmodium malaria (четырехдневная), может реци­дивировать, а тропическая малярия обычно не возобновляется после лечения (за исключением лекарственно-устойчивых форм).

Заражение человека происходит при укусе комара, в момент ко­торого в кровь попадает одна из промежуточных стадий развития плазмодий — спорозоиты. С током крови они попадают в гепато- циты и тканевые макрофаги, где происходит бесполое развитие паразита с образованием мерозоитов (экзоэритроцитарная шизо­гония). При трехдневной малярии она продолжается около 8 сут, при тропической — 6 сут, при четырехдневной — 15 сут. После за­вершения цикла тканевого развития мерозоиты выходят в кровь и попадают в эритроциты, начинается эритроцитарный цикл разви­тия возбудителя — эритроцитарная шизогония. Он завершается разрывом эритроцитов, в результате чего высвобождаются под­вижные паразиты, которые из плазмы крови внедряются в другие эритроциты. Такой цикл может повторяться несколько раз. Про­должительность одного эритроцитарного цикла при трехдневной и тропической малярии около 2 сут, а при четырехдневной — 3 сут. После 3—4 эритроцитарных циклов в крови человека появляются женские и мужские половые клетки (гаметоциты), дальнейшее развитие которых возможно только в желудке комара, куда они по­падают с кровью больного и где происходят их оплодотворение и образование из гаметоцитов гамет (половой цикл). Конечной фор­мой полового цикла являются спорозоиты, которые проникают в гемолимфу комара, а затем в его слюнные железы. С этого момен­та комар становится заразным для человека.

Неспецифические методы профилактики остаются основны­ми в борьбе с малярией. Они предполагают уничтожение кома­ров и лечение больных и паразитоносителей. Важнейшее место занимает химиопрофилактика.

Для специфической профилактики разрабатываются вакци­ны, содержащие антигены разных форм малярийного плазмодия.

Известны следующие антигены, имеющие отношение к конструированию вакцины: большой поверхностный белок спо- розоита, вокругспорозоитный белок (CSP) и его главный повто­ряющийся эпитоп Aasn-Aala-Aasn-Рго (NANP).

NANP был первичным кандидатом для создания вакцины. Структуры возбудителя, узнаваемые защитными антителами (например NANP) или Т-лимфоцитами, можно назвать «протек- топами» («protectopes»).

NANP имеется во всех последовательностях P. falciparum, поэ­тому он в виде синтетического пептида или рекомбинантного протеина был использован для создания вакцины.

На первичном этапе были созданы синтетический пептид, состоявший из NANP, конъюгированного со столбнячным анатоксином (ТТ), и рекомбинантная вакцина, содержащая эпито­пы NANP, NVDP и первые 32 аминокислоты, кодируемые геном резистентности к тетрациклину.

Холерный токсин был использован в качестве вектора. Изуча­ли рекомбинантный белок, состоящий из 32 аминокислот, коди­руемых тетрациклин-устоичивым геном, и 81 аминокислоту из неструктурного белка вируса гриппа A (R32NS1 81). В 1991 г. бы­ла проанализирована эффективность синтетического белка, со­держащего протеин 5.1, белок Plasmodium falciparum, связанный с NANP, Иммунный ответ был примерно такой же, как при ис­пользовании тетрациклин-устойчивого гена R32 tet, то есть мало­эффективным. Это же касается и использования синтетического белка, содержащего протеин 5.1, связанный с NAN Р.

При применении рекомбинантного белка NANP, связанного с вектором, в качестве которого выступала 42-аминокислотная последовательность из pre-S региона HBsAg и 226-аминокислот- ная последовательность HBsAg (R16HBsAg), число серопозитив­ных лиц было больше, но бустер-эффект оказался низок.

Рекомбинантная вакцина, представленная почти полным CS- протеином, продуцированным в клетках насекомых с использо­ванием вектора-бакуловируса, оказалась полностью неиммуно- генной.

Проводятся исследования вакцины, содержащей 2 рекомби­нантных белка — полный белок CSP и 85% поверхностного анти- гена- мерозоита-2.

В Латинской Америке и Танзании проводятся полевые испыта­ния синтетической вакцины, содержащей мерозоитные белки 83, 55, и 35 кД и последовательность NANP, носящую название SPfi66.

Кроме повторяющихся последовательностей CSP, привлекает внимание и другая область CSP — регион II, Этот регион консер­вативен у различных видов Plasmodium. In vitro антитела против региона II подавляют инвазию спорозоитов P. berghe't в клетки ге- патоцеллюлярной карциномы.

Другой кандидат — спорозоитный поверхностный протеин