28 Лабораторная работа

Наблюдение за простейшими в содержимом рубца. Контрольная по физиологии пищеварения обмена веществ и энергии

В рубце жвачных животных имеется симбионтная микрофлора, которая представлена 100 видами бактерий и одноклеточных простейших. Наиболее многочисленными являются группы целлюлозолитических и протеолитических бактерий. Простейшие представлены классом ресничных инфузорий, который включает в себя около 100 видов. В 1 г содержимого рубца находится до 1 млн. инфузорий, размеры их колеблются от 20 до 200 мкм. Инфузории играют важную роль в рубцовом пищеварении. Они подвергают корм механической обработке, используют для своего питания труднопереваримую клетчатку, создают своеобразную микроциркуляцию среды. Инфузории разрыхляют, измельчают корм, переваривают белки, крахмал, сахара и частично клетчатку, накапливают в своем теле полисахариды. Инфузории способны синтезировать витамины группы В. Значение микроорганизмов не ограничивается расщеплением корма в преджелудках, в процессе жизнедеятельности они синтезируют белки своего тела. За счет микроорганизмов жвачные животные получают около 100 г полноценного белка в сутки.

28.1 Цель работы: ознакомиться с разновидностями рубцовых инфузорий, их размерами и характером движения. Произвести подсчет количества инфузорий в рубцовой жидкости.

28.2 Приборы, оборудование: свежее содержимое рубца, смеситель для лейкоцитов, камера Горяева, микроскоп, предметные, покровные и часовые стекла, пипетки, метиленовая синь (1:1000).

28.3 Ход работы.

У животного с фистулой рубца получают рубцовое содержимое. Часть полученного содержимого отфильтровывают через четыре слоя марли и фиксируют 3% раствором уксусной кислоты (1:1), подкрашенной метиленовой синью часть переливают в термос и доставляют в лабораторию.

Находящееся в термосе рубцовое содержимое профильтровывают через четыре слоя марли в стаканчик, находящийся в сосуде с водой температуры 39-40⁰ С. Наносят на часовое стеклышко несколько капель фильтрата и добавляют 1 каплю раствора метиленовой сини (1:1000). Пипеткой наносят каплю окрашенного фильтрата на покровное стекло, быстро переворачивают его и наложить на часовое стекло. Края покровного стекла окаймить вазелином. В полученном препарате "висячей капли" наблюдают за движением инфузорий сначала при малом, затем при большом увеличении микроскопа.

В смеситель для лейкоцитов набирают из пробирки жидкое содержимое рубца до метки 1,0, а до метки 11 насасывают физиологический раствор, подкрашенный метиленовой синью. Заполняют камеру Горяева и подсчитывают инфузории в 100 больших квадратах сетки. Количество инфузорий (х) в 1 мл содержимого вычисляют по формуле

х= n * 250 * 2 * 1000, или n * 5000

100

где n – число инфузорий в 100 больших квадратах сетки, оно составляет в среднем 90-180,

2– разведение формальдегидом.

Контрольные вопросы

1. Какова роль микрофлоры в преджелудочном пищеварении жвачных?

2. Каковы оптимальные условия для развития микрофлоры в рубце?