20 Лабораторная работа

Определение вязкости, скорости свертывания крови,

определение рН крови прибором рН-150М

К физиологическим показателем крови относятся вязкость, скорость свертывания и рН. Вязкость зависит от содержание форменных элементов и белка, скорость свертывания связана с большим комплексов факторов (внутренних, внешних), в том числе бывает врожденная несвертываемость. рН крови связана с массой буферных систем.

20.1 Цель работы: с помощью вискозиметра ВК-4 определить вязкость крови; установить влияние на вязкость крови различных факторов, действующих на организм, ознакомиться с методами определения свертывания цельной крови, установить различия в свертывании крови у разных животных, выяснить действие различных факторов на свертывание крови у одного и того же животного.

20.2 Приборы и оборудования: животное, иглы инъекционные, лимоннокислый натрий или раствор гепарина, термостат, холодильная камера, вискозиметр, адреналин 1:1000, инструменты для взятия крови, стерилизатор, предметные стекла, секундомер, капроновая нить на палочке, центрифужные пробирки, водяная баня, спирт этиловый, эфир, 5%-ный раствор йода, вата, марлевые салфетки, , ножницы, водяная баня, 5%-ный раствор натрия цитрата, штатив с пробирками, 2%-ный раствор кальция хлорида.

20.3 Ход работы.

Определение вязкости крови

1) Промывают капилляры вискозиметра концентрированным аммиаком, этиловым спиртом, затем просушивают. Открыв кран, в правый капилляр до метки "0" насасывают дистиллированную воду и закрывают кран. Аналогичным образом насасывают в другой капилляр до метки "0" кровь (без пузырьков). Ставят кран в положение, при котором оба капилляра сообщаются с резиновой трубкой. Энергично, но осторожно втягивают ртом воздух из обеих пипеток, создавая вакуум во всей системе. Следят за столбиком крови. Как только кровь дойдет до метки "1", прекращают всасывание. Цифра, до которой дойдет за этот период столбик воды, является относительным показателем вязкости крови.

2) Помещают животное в холодильную камеру при температуре воздуха 0…+5⁰ С, через 30 минут извлекают и определяют вязкость крови.

3) Помещают животное в термостатную камеру при температуре воздуха 38–40⁰ С, через 30 минут извлекают и определяют вязкость крови.

4) У собаки берут кровь, определяют вязкость. Затем животному вводят 1мл адреналина 1:1000. Через 3 минуты берут кровь (из вены противоположной конечности) и определяют вязкость.

Свертывание крови.

У животного берут кровь из сосудов ушной раковины и 2 капли ее помещают на предметное стекло. При комнатной температуре через каждую минуту стекло наклоняют и наблюдают за каплей, повторяя этот прием до тех пор, пока кровь не свернется в сгусток и не будет изменять своей формы. Время от нанесения капли крови на стекло до превращения ее в сгусток будет соответствовать скорости свертывания крови у опытного животного.

Условия, влияющие на скорость свертывания крови

Необходимы 4 чистые сухие пронумерованные пробирки, во вторую пробирку наливают 1 мл 5%-ного раствора натрия цитрата. Заранее готовят водяную баню и сосуд со льдом. После этого у животного берут кровь из яремной вены и наливают в каждую пробирку по 2 мл. Отмечают время заполнения пробирок кровью и тут же их помещают в следующие условия: первую и вторую пробирки оставляют в штативе при комнатной температуре, третью в банку со льдом, четвертую пробирку – в водяную баню при температуре 38 – 40⁰С. Периодически наблюдают за кровью в пробирках, наклоняя их в разные стороны, и отмечают время свертывания в каждой из них. После этого продолжают опыт с кровью в пробирке №2. Убедившись, что в ней кровь находится в жидком состоянии, разливают ее на две равные части. В первую половину крови вливают 0,5 мл 2%-ного раствора кальция хлорида и отмечают время его внесения. Содержимое пробирки хорошо смешивают и определяют, что в ней произошло с кровью, сравнивая ее со второй половиной крови.

Полученные результаты записать в тетрадь. Сделать выводы.

Контрольные вопросы

1. Что характеризует вязкость крови?

2. Как реагирует организм на повышение и понижение вязкости крови?

3. От чего зависит вязкость крови?

4. Физико-химические свойства крови?

5. Современные представления о механизме первичного (сосудистотромбоци тарного) и вторичного (ферментативного) гемостаза.

6.Время свертывания крови у разных видов животных.

7.Факторы, способствующие свертыванию крови в организме.

8.Факторы, препятствующие свертыванию крови в организме.

9.Регуляция свертывания крови.