- •2. Анатомия, физиология и патология половой системы производителей
- •3. Методы получения спермы от производителей
- •4. Сперма с/х животных. Видовые особенности
- •5. Химический состав и физические свойства спермы. Строение спермиев
- •6. Энергетика спермиев. Гликолиз, дыхание, распад атф
- •7. Макроскопическая (санитарная) оценка спермы
- •8. Оценка густоты и активности спермы
- •9. Определение резистентности
- •10. Определение процента живых и мертвых спермиев и их патологических форм
- •11. Способы определения концентрации спермы
- •12. Биологические свойства спермы
- •13. Способы определения изотоничности растворов
- •14. Агглютинация спермиев
- •15. Определение дегидрогеназной активности спермиев
- •16. Состав и виды искусственных сред для разбавления спермы
- •17. Требования к качеству спермы, допускаемой к разбавлению и осеменению самок
- •18. Техника приготовления разбавителей, роль входящих в них компонентов. Методика и степень разбавления спермы
- •19. Разбавители спермы быка
- •20. 21. 22. Разбавители спермы жеребца, хряка, барана
- •23. Биоконтроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости
- •24. Оценка спермы по микробной загрязнённости
- •25. Длительное хранение спермы при температуре -196 ºС в жидком азоте. Теоретические и практические основы замораживания спермы.
- •26. Режимы охлаждения и техника замораживания спермы быка, барана, хряка и жеребца
- •27. Оборудование для замораживания, хранения и транспортировки спермы
- •28. Техника безопасности при работе с сосудами Дьюара
- •29. Порядок оттаивания спермы
- •30. Трансплантация эмбрионов. Значение и основные этапы
- •31. Подбор доноров и реципиентов
- •32. Синхронизация половых циклов
- •33. Суперовуляция
- •34. Извлечение эмбрионов и их культивирование
- •35. Оценка качества эмбрионов
- •36. Пересадка эмбрионов
- •37. Замораживание эмбрионов
- •38. Способы определения оптимального времени для ио самок
- •39. Визо-цервикальное осеменение коров и тёлок
- •40. Мано-цервикальный способ осеменения коров
- •41. Цервикальное осеменение коров и тёлок с ректальной фиксацией шейки матки
- •42. Дозы спермы для осеменения самок разных видов животных
- •43. Организация осеменения овец. Циклический метод
- •44 Организация осеменения кобыл
- •45. Организация осеменения свиней
- •46. 48. Права и обязанности технологов по ио животных. Работа с календарём беременности и по ио животных. Организация работы племпредптиятия
- •47. Стимуляция половой функции у коров, овец, свиней и кобыл
- •49. Анатомия и физиология молочной железы
- •50. Классификация и патогенез мастита
- •51. Дифференциация клинических форм мастита
- •52. Диагностика раздражения вымени и субклинического мастита
- •53. 54. Профилактика мастита. Лечение мастита.
- •60. Акушерско-гинекологическая диспансеризация
- •55-59. Бесплодие и яловость
24. Оценка спермы по микробной загрязнённости
Наряду с общеизвестными способами оценки спермы: определением густоты, активности, концентрации сперматозоидов, определением соотношения живых и мертвых форм спермиев, обязательным является и ветеринарно-санитарнная оценка спермы. Несоблюдение этого условия может привести к распространению (через сперму) многих инфекционных болезней (бруцеллез, туберкулез, лептоспироз, трихомоноз, кампилобактериоз, ящур и др.), а также инфицированию половых органов самок условно-патогенной микрофлорой (стафилококки, стрептококки, синегнойная и кишечная палочки и др.).
Методика определения коли-титра (на среде Булиржа).
Сперму разводят многократно последовательно стерильным физ-раствором – 1:1, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000, 1:100000, 1:1000000 – и из каждого разведения делают высев на среду Булиржа.
Посевы выдерживают в термостате при температуре 37-37,5°С и через сутки проверяют рост. При наличии в сперме бактерий из группы коли изменяется цвет среды, а в газовых трубочках появляется газ. О показателе коли-титра судят (до 1:1000000) по степени разведения исследуемого материала и роста микробов в среде.
При хорошем ветеринарно-санитарном состоянии и соблюдении санитарно-гигиенических правил при получении спермы от производителей коли-титр не превышает 1:1 - 1:10.
Определение микробной и грибковой загрязненности спермы .
Для определения количества микробов в сперме делают посев на МПБ и МПА, а затем подсчитывают количество микробов и определяют их вид. В зависимости от содержания микробов различают сперму:
незначительно загрязненную при содержании в 1 мл спермы до 0,1 тыс. микробов;
слабозагрязненную – до 2 тыс. микробов в 1 мл;
среднезагрязненную – до 5 тыс. микробов в 1 мл;
сильнозагрязненную – более 5 тыс. микробов в 1 мл.
Допускают сперму с содержанием микробов не более 5 тыс. микробов в 1 мл.
Исследование на наличие синегнойной палочки и анаэробной микрофлоры.
Для выделения синегнойной палочки сперму высевают на МПБ с добавлением 1-2% сахара (глюкозы или лактозы) и помещают в термостата при температуре 37°С на 6-7 сут. Посев проверяют каждые 1-2 дня. При росте синегнойной палочки выделяемый ею пигмент пиоцианин постепенно окрашивает среду в зеленовато-голубоватый цвет
Для обнаружения анаэробов проводят посев спермы в две пробирки со средой Кита-Тороцци. Одну из пробирок прогревают на водяной бане при 80°С в течение 20 мин для уничтожения сопутствующей микрофлоры. Затем обе пробирки помещают в термостат при 37°С на 10 сут. Учитывают интенсивность роста микробов, характер осадка, а так же степень газообразования. Через каждые 3-4 дня независимо от наличия или отсутствия признаков роста микробов делают мазки, окрашивают по грамму и микроскопируют.
Исследование спермы на наличие грибов.
Посев спермы проводят на среду Литмана, ЛенНИВИ, Сабура и Чапека. Среды культивируют при температуре 22-37°С. Выделенные грибы проверяют на патогенность. Быка нельзя использовать, если в сперме и смыве из препуция постоянно выделяют патогенные грибы из родов аспергиллюс, кандида, лихтгеймия.