- •2. Анатомия, физиология и патология половой системы производителей
- •3. Методы получения спермы от производителей
- •4. Сперма с/х животных. Видовые особенности
- •5. Химический состав и физические свойства спермы. Строение спермиев
- •6. Энергетика спермиев. Гликолиз, дыхание, распад атф
- •7. Макроскопическая (санитарная) оценка спермы
- •8. Оценка густоты и активности спермы
- •9. Определение резистентности
- •10. Определение процента живых и мертвых спермиев и их патологических форм
- •11. Способы определения концентрации спермы
- •12. Биологические свойства спермы
- •13. Способы определения изотоничности растворов
- •14. Агглютинация спермиев
- •15. Определение дегидрогеназной активности спермиев
- •16. Состав и виды искусственных сред для разбавления спермы
- •17. Требования к качеству спермы, допускаемой к разбавлению и осеменению самок
- •18. Техника приготовления разбавителей, роль входящих в них компонентов. Методика и степень разбавления спермы
- •19. Разбавители спермы быка
- •20. 21. 22. Разбавители спермы жеребца, хряка, барана
- •23. Биоконтроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости
- •24. Оценка спермы по микробной загрязнённости
- •25. Длительное хранение спермы при температуре -196 ºС в жидком азоте. Теоретические и практические основы замораживания спермы.
- •26. Режимы охлаждения и техника замораживания спермы быка, барана, хряка и жеребца
- •27. Оборудование для замораживания, хранения и транспортировки спермы
- •28. Техника безопасности при работе с сосудами Дьюара
- •29. Порядок оттаивания спермы
- •30. Трансплантация эмбрионов. Значение и основные этапы
- •31. Подбор доноров и реципиентов
- •32. Синхронизация половых циклов
- •33. Суперовуляция
- •34. Извлечение эмбрионов и их культивирование
- •35. Оценка качества эмбрионов
- •36. Пересадка эмбрионов
- •37. Замораживание эмбрионов
- •38. Способы определения оптимального времени для ио самок
- •39. Визо-цервикальное осеменение коров и тёлок
- •40. Мано-цервикальный способ осеменения коров
- •41. Цервикальное осеменение коров и тёлок с ректальной фиксацией шейки матки
- •42. Дозы спермы для осеменения самок разных видов животных
- •43. Организация осеменения овец. Циклический метод
- •44 Организация осеменения кобыл
- •45. Организация осеменения свиней
- •46. 48. Права и обязанности технологов по ио животных. Работа с календарём беременности и по ио животных. Организация работы племпредптиятия
- •47. Стимуляция половой функции у коров, овец, свиней и кобыл
- •49. Анатомия и физиология молочной железы
- •50. Классификация и патогенез мастита
- •51. Дифференциация клинических форм мастита
- •52. Диагностика раздражения вымени и субклинического мастита
- •53. 54. Профилактика мастита. Лечение мастита.
- •60. Акушерско-гинекологическая диспансеризация
- •55-59. Бесплодие и яловость
19. Разбавители спермы быка
Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы быка при температуре 2-5 ºС в течение 72 часов: ГЦЖ (вода дистиллированная 100, глюкоза 3, цитрат натрия 1,4, желток куриного яйца 20, спермосан-3 75-90 тыс. ед.).
Синтетическая среда для разбавления и замораживания спермы быка в форме гранул: лактоза, желток куриных яиц, глицерин, спермосан-3, вода дистиллированная
Синтетическая среда лактозо-фруктозо-раффинозо-магниево-глицерино-желточная (ЛФРМГЖ) для разбавления и замораживания спермы быка в полипропиленовых соломинках: Лактоза, Фруктоза, Раффиноза пятиводная, Магний сернокислый, Глицерин, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.
Синтетические среды N 1 и 2 для замораживания спермы быка в облицованные гранулы
СРЕДА N 1
11% раствор лактозы или сахарозы, Желток куриных яиц, Глицерин.
СРЕДА N 2
Лактоза или сахароза, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Глицерин, Вода дистиллированная.
20. 21. 22. Разбавители спермы жеребца, хряка, барана
Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы барана в течение 24 ч при температуре 2 - 5 °C.
СРЕДА ГЛЮКОЗО-ЦИТРАТНО-ЖЕЛТОЧНАЯ
Глюкоза медицинская безводная, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Спермосан-3, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.
Синтетические среды для разбавления и хранения спермы хряка в течение 3 суток при температуре 16 - 20 °C.
СРЕДА ГЛЮКОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНО-СУЛЬФАТНАЯ (ГХЦС) (ГОСТ 17637-72)
Глюкоза медицинская безводная, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Аммоний сернокислый очищенный, Спермосан-3, Вода дистиллированная.
СРЕДА ГЛЮКОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНАЯ (ГХЦ)
Глюкоза медицинская безводная, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Спермосан-3, Вода дистиллированная,
ГЛЮКОЗО-СОЛЕВОЙ РАСТВОР Применяется с целью увеличения объема спермы без ее хранения.
Глюкоза медицинская безводная, Натрий хлористый, Вода дистиллированная.
Синтетическая среда для разбавления и хранения спермы жеребца в течение 48 ч при температуре 2 - 5 °C.
СРЕДА ЛАКТОЗО-ХЕЛАТО-ЦИТРАТНО-ЖЕЛТОЧНАЯ (ЛХЦЖ)
Лактоза, Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый трехзамещенный пятиводный, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Спермосан-3, Желток куриных яиц, Вода дистиллированная.
Синтетическая среда лактозо-хелато-цитратно-желточная (ЛХЦЖ) для замораживания спермы жеребца.
Лактоза, Натрий двууглекислый, Натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятиводный, Двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б, хелатон-3), Желток куриных яиц, Глицерин, Спермосан-3, Вода дистиллированная.
23. Биоконтроль разбавителей. Определение абсолютного показателя переживаемости
Биологический контроль сред. Качество синтетической среды определяют биологическим путем - по длительности выжива-емости спермиев при различных разбавлениях спермы, сохраняемой при температуре 2 - 5 °C. Необходимо проводить био-контроль каждой вновь поступившей серии антибиотиков, сульфаниламидов, глюкозы, цитрата и других компонентов, вхо-дящих в состав синтетической среды. Биоконтроль позволяет установить оптимальные и токсичные степени разбавления спермы. Оптимальную степень разбавления спермы определяют по наибольшему показателю абсолютной выживаемости спермиев.
Определение абсолютного показателя переживаемости и биоконтроль искусственных сред
Абсолютный показатель переживаемости – показатель качества спермы, который указывает на срок сохранения активности половых клеток в более или менее благоприятных условиях. Это бывает обусловлено рядом факторов:
Запасом энергетического материала.
Скоростью обезвреживания продуктов метаболизма.
Качеством липопротеиновой оболочки.
Существует прямая зависимость между величиной показателя переживаемости и оплодотворяющей способностью.
Обозначается буквой S, выражается в условных единицах.
Методика определения показателя переживаемости (Соколовская, ???)
Берут 11 сухих стерильных пробирок ёмкостью 2 мл.
Готовят искусственную среду.
В 1 пробирку набирают 0,5 мл оцениваемой спермы – контроль.
Во 2-11 пробирки вносят 0,5 мл разбавителя.
Во 2 пробирку вносят 0,5 мл испытуемой спермы, тщательно перемешивают, набирают 0,5 мл и переносят в пробирку №3, из 3 в 4… из 11 0,5 мл выливают.
Получают разбавления от 0 до 1024 раз.
S = ∑at, где а – средняя активность за промежуток времени, t – промежуток времени между исследованиями.
t = (Tn+1 – Tn-1)/2.
Полученные показатели заносятся в таблицу:
А – активность сперматозоидов в момент исследования
Нормативы: для жвачных 1400, для хряка 900, для жеребца 400.
Стандартом для искусственных сред, которые применяются в биотехнике разбавления, являются оптимум разбавления – 8-16 раз, максимум разбавления 256 раз.