143.При проведении исследования определяют

1.Общее число микроорганизмов, образующих колонии на питательномагаре.

2.Содержание общих и термотолерантныхколиформных бактерий(ОКБ и ТКБ)

3.Содержание спор сульфитредуцирующихклостридий.

4.Содержание колифагов.

Пробу в объёме 500 мл отбирают в стерильную ёмкость,снабжённую пробкой с колпачком, после предварительной стерилизации крана обжиганием и последующего спучка воды не менее 10 минут при полностью открытом кране.При отборе пробы напор воды уменьшают.

1.Определение ОМЧ.Вносят по 1 мл воды в 2 стерильны чашки Петри,затем в каждую чашку вливают 8-12 мл питательного агара,смешивают содержимое чашек на горизонтальной поверхности.После застывания агара,чашки с посевами помещают в термостат вверх дном и инкубируют 24ч при 37.Подсчитывают все выросшие на чашке колонии.Количество колоний суммируют и делят на 2.Результат-КОЕ в 1 мл пробы воды.Если подсчёт на чашках невозможен, то в протоколе отмечают «сплошной рост».Норматив в 1 мл питьевой воды-не более 50 КОЕ.

2.Определение общих и термотолерантныхколиформных бактерий(ОКБ и ТКБ)

1)Методом мембранной фильтрации(основной метод).Метод основан на фильтрации установленного объёма воды через мембранныефильтры,выращивание посевов на питательной среде с лактозой и идентификацией крлоний.Изучают 3 пробы по 100 мл.Фильтры помещают на чашки со средой Эндо и ставят в термостат дном вверх и инкубируют 24 часа при37.Если на фильтре есть рост изолированных типичных лактозоположительных колоний(красных)с отпечатком на обратной стороне фильтра,подсчитывают число колоний каждого типа отдельно и подтверждают их принадлежность к ОКБ иТКБ.Для этого ставят оксидазный тест и определяют отношение к окраске по граму.После этого проводят вычисления по формуле.

2)Титрационнымметодом.Основан на накоплении бактерий после посева установленного объёма на жидкую средус пересевом на плотную средуслактозойПри качественном методе исследования засевают 3 по 100 мл,при количественном-3 по 100 мл,3 по 10 мл и 3 по 1 мл.Посевы инкубируют 48ч при 37..Приобнаружение помутнения в жидкой среде и обраования газа высеваем на среду Эндо,если они на ней ферментатируют лактозу до кислоты при 44 градусах и газа-есть ТКБ.Норматив-нет окб и ткб, в 100 мл воды.

3.Определение спор.Пробу воды 20 мл прогревают на водяной бане в пробирках 15 минут при 75 для уничтожения вегетативных форм.Из каждой пробы делают посев или фильтруют 20 мл.

-методом фильтрования в пробирках:перед посевом железо-сульфитный агаррасплавляют.Послефильтрации,фильтр помещают в пробирку с горячим агаром.Пробирку быстро охлаждают в холодной воде.Посевы культивируют 16-18 часовпри 44.

-методом фильтрования в чашках Петри:чашки Петри заливают тонким слоем ЖСА.Послефильтрации,фильтрна застывшую питательную среду и заливают ЖСА до верхнего края чашки.

-прямым посевом: в стерильные пробирки вносятпо 5 или 10 млисследуеиойпробы,заливают горячим ЖСА,пробирку быстро охлаждают.В количественном подсчитываем отдельные чёрнвеколонии,выражают в КОЕ в 20мл.Норматив-споры должны отсутствовать.

4)Определениеколифагов

-титрационныйметод:определение предварительным накоплением в среде обогащения на культуре и выявлениизон лизиса на питательном агаре.Приналичии лизиса-присутствие колифагов.