3 курс / Общая хирургия и оперативная хирургия / Obschaya_Khirurgia_Otvety_PedFak_2018

Терминальная анестезия слизистых оболочек, верхних отделов дыхательных путей, мочеиспускательного канала может быть осуществлена тремя способами: смазыванием, аспирацией или ингаляцией раствора анестетика. Метод используется для анестезии носовых ходов при эпдопозалыюй интубации, проведении желудочного зонда, бронхоскопии и бронхографии и т. д.

2. Местное обезболивание в детской хирургии, виды, показания к применению.

Местная анестезия подразделяется на: -терминальную -инфильтрационную -проводниковую

1.Терминальная анестезия достигается обработкой поверхности тканей или слизистых оболочек анестезирующим веществом (смазывание тампоном или аэрозольное

орошение) с последующей блокадой ноцицептивиых рецепторов. Этот метод анестезии довольно широко распространен в отоларингологии, офтальмологии, урологии, при эндоскопических исследованиях. Применяются высокие концентрации анестетиков: новокаин 5-10%, дикаин 1- 3%, совкаин 1%, лидокаин 1- 2%.

2.Инфильтративная анестезия по А. В. Вишневскому.

Инфильтрацию проводят, начиная с кожи в глубину послойно. При этом анестетиком пропитываются все ткани операционного поля. В зависимости от размеров операционного поля, инфильтрацию осуществляют в виде ромба или квадрата. Тугая инфильтрация мягких тканей раствором анестетика обеспечивает обезболивание и гидравлическую препаровку тканей, что позволяет тупо выделять мышцы, сосуды, избегать повреждений нервных стволов. В зависимости от вида оперативного вмешательства в дальнейшем ВОЗМОЖНО инфильтрировать париетальную брюшину, брыжейку кишечника, выполнить футлярную анестезию, ее комбинацию с инфильтрацией мышечного массива в зависимости от вида оперативного вмешательства.

Местную инфильтрационную анестезию наиболее часто применяют при аппендектомии, грыжесечении, резекции щитовидной железы, удалении небольших доброкачественных опухолей, травматологических операциях и др. В качестве анестетика используется новокаин

025- 0.5%.

3. Проводниковая (регионарная анестезия). В основе метода лежит блокада проведения болевого импульса по нервному стволу. Используется в основном при операциях на конечностях.

Взависимости от области анестезии различают проводниковую анестезию по ЛукашевичОберегу (на пальцах), межреберную блокаду, анестезию плечевого сплетения по Кулленкампфу, сакральную анестезию.

Вкачестве анестетиков используют новокаин 1- 2%, лидокаин 2- 5%, тримекаин 1- 2%. Разновидностями проводниковой анестезии являются спинномозговая и эпидуральная.

3.1. Спинномозговая (субарахноидальная) анестезия осуществляется путем введения анестетика в субарахноидальное пространство спино-мозгового канала. Спиномозговая пункция проводился специальными иглами между ОСТИСТЫМИ отростками L3L4 или L2L3 в положении Сольного сидя или лежа на боку с максимальным сгибанием позвоночника.

Данный вид анестезии выполняется при операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях. Используемые анестетики новокаин 5%-1.5-2 мл; совкаин 1%- 0.5-1 мл; лидокаин 2%- 2 мл.

3.2. Эпидуральная анестезия является вариантом проводниковой анестезии. Раствор местного анестетика вводят в эпидурапьное пространство. Обезболивающий эффект достигается блокадой передних и задних корешков спинного мозга на ограниченном пространстве. Пункцию с последующей катетеризацией эпидурапьного пространства выполняют на любом уровне позвоночного столба в зависимости от области оперативного вмешательства. Анестетик вводят медленно по 5 мл с интервалом в 5мин, через 2030 мин после введения анестетика наступает полная анестезия продолжительностью 2-5 часов. Этот вид обезболивания применяется при

операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях, у лиц пожилого и старческого возраста, у больных с заболеваниями легких, ССС, нарушении обменных процессов. В качестве анестетика используют лидокаин 2%- 8-10 мл; тримекаин 2% - 30-40 мл. Продленная эпидуральная анестезия (48-72 ч) с введением постоянного катетера в эпидуральное пространство применяется как метод обезболивания в послеоперационном периоде. Кроме перечисленных выше анестетиков в настоящее время широко используют наркотические анальгетикиморфин, фентанил, промедол.

4.В комплексной интенсивной терапии широко применяют лечебные блокады:

а)шейную вагосимпатическую блокаду для лечения плевропульмонального шока, болевого синдрома при травме трудной клетки, в качестве компонента комбинированной анестезии б)паранефральная блокадаприменяется для лечения рефлекторной анурии, пареза желудочнокишечного тракта, гемотрансфузионном шоке.

3.Инфильтрационная анестезия. Местная анестезия по А.В.Вишневскому.

Инфильтрацию проводят.начиная с кожи в глубину послойно. При этом анестетиком 'пропи¬тываются все ткани операционного поля. В зависимости от размеров опе¬рационного поля, инфильтрацию осуществляют в виде ромба или квадра¬та. Тугая инфильтрация мягких тканей раствором анестетика обеспечивает обезболивание и гидравлическую препаровку тканей, что позволяет тупо выделять мышцы, сосуды, избегать повреждений нервных стволов. В зависимости от вида оперативного вмешательства в дальнейшем ВОЗМОЖНО инфильтрировать париетальную брюшину, брыжейку кишечника, выполнить футлярную анестезию, ее комбинацию с инфильтрацией мышеч ного массива в зависимости от вида оперативного вмешательства.

Местную инфнльтрационную анестезию наиболее часто применяют при аппендектомии, грыжесечении, резекции щитовидной железы, удале¬нии небольших доброкачественных опухолей, травмитологических опера¬циях и др. В качестве анестетика используется новокаин

025- 0.5%.

4.Внутривенная и внутрикостная анестезии. Показания, техника выполнения.

Внутривенный наркоз, как и другие виды анестезии, редко применяют самостоятельно в виде мононаркоза. и непременным проявлением их действия служит выключение сознания, а подавление реакции на внешние раздражители, то есть развитие общей анестезии как таковой происходит вторично на фоне глубокой наркотической депрессии ЦНС.

Исключением является кетамин - мощное аналгетическое средство, действие которого проявляется при частично или полностью сохранённом сознании.

Барбитураты (гексобарбитал, тиопентал натрий) до сих пор являются основными препаратами для внутривенного наркоза. Их используют для вводного наркоза и кратковременного наркоза при небольших операциях. Через 1-2 мин после внутривенного введения препаратов снимается психическое возбуждение, наступает некоторое речевое возбуждение, но фаза двигательного возбуждения практически отсутствует. Спустя 1

мин наступают помутнение и потеря сознания, чуть позже развивается гипорефлексия. Оксибат натрия - наиболее «мягкий» анестетик. Применяют у тяжёлых больных, так как

обладает крайне малой токсичностью, а также оказывает умеренное антигипоксическое действие. Однако препарат не вызывает полной аналгезии и миорелаксации, что делает необходимым сочетать его с другими препаратами.

Кетамин. Нейрофизиологические механизмы действия препарата своеобразны и основаны на диссоциации связей между различными субстанциями мозга, что не позволяет его ставить в один ряд с другими средствами. Кетамин обладает большой терапевтической широтой действия и малой токсичностью, что делает его одним из самых популярных средств для внутривенной анестезии.

Аналгезия наступает через 1-2 мин после введения препарата. Иногда при этом не происходит потери сознания, что делает возможным словесный контакт, о котором больные потом не помнят

вследствие развивающейся ретроградной амнезии. Кетамин можно рассматривать как истинный анальгетик. После операции аналгезия сохраняется ещё достаточно долго. Характерной особенностью препарата является его галлюциногенность.

Пропофол - один из новых препаратов для внутривенного наркоза. Обладает коротким действием, является одним из препаратов выбора для вводного наркоза. Обычно требует дополнительной аналгезии.

Нейролептаналгезия Нейролептаналгезия - метод внутривенной анестезии, основанный на комбинированном

применении мощного нейролептика дроперидола и наркотического анальгетика фентанила. Преимуществами метода является своеобразное действие на организм больного, характеризующееся быстрым наступлением безразличия к окружающему, отсутствием двигательного беспокойства, снижением выраженности вегетативных и метаболических реакций на хирургическую агрессию. Нейролептаналгезию обычно применяют в качестве компонента комбинированного наркоза или в сочетании с местной анестезией. Наиболее часто нейролептаналгезию проводят на фоне ИВЛ смесью закиси азота и кислорода.

Внутрикостная анестезия — разновидность внутривенной местной анестезии. Анестезирующее вещество, введенное внутрикостно, попадает в венозную систему конечности, откуда диффундирует в ткани. Применяется внутрикостная анестезия при операциях на конечностях. Конечность изолируют от общего кровотока путем шшожения эластического бинта или манжеты тонометра. Анестезирующее вещество вводят на верхней конечности и мыщелки плеча, локтевой отросток, кости кисти, на нижней — в мыщелки бедра, лодыжки, пяточную кость. При операциях на верхней конечности жгут накладывают на плечо, при операции на стопе — на нижнюю треть голени, при операциях на голени—на нижнюю треть бедра и при операциях на бедре — на верхнюю треть бедра.

Над местом пункции кости кожу инфильтрируют 0,25% раствором новокаина, а затем этой же иглой анестезируют глубжележащие ткани и надкостницу. Иглу с мандреном для пункции кости проводят через кожу, клетчатку и вращательными движениями проникают через кортикальную пластинку в губчатое вещество кости. При операциях на стопе и голени используют 100—150 мл, на бедре — 150—200 мл, на верхней конечности — 100— 150 мл 0,25% раствора новокаина. После снятия жгута может отмечаться токсико-резорбтивное действие анестетика (слабость, головокружение, гипотензия, тошнота, рвота).

Для предупреждения токсического действия новокаина при быстром попадании его в общий кровоток после окончания операции больному перед снятием жгута вводят подкожно 2 мл раствора кофеина, затем медленно снимают жгут.

Потенцирование местной анестезии может быть достигнуто при сочетании анестезии с дачей лекарственных средств нейролептического действия (дропери-дол) и общих анальгетиков (фентанил). При сочетанном обезболивании, включающем местную анестезию и нейролептаналгезию, повышается эффект местной анестезии при одновременном благоприятном воздействии нейролептиков на психоэмоциональную сферу больного.

Эффективно сочетание местного обезболивания с общей аналгезией, достигаемой с помощью метоксифлурана, пентрана, без утраты сознания больного. В подобных сочетаниях взаимно усиливается обезболивающий эффект местных анестетиков и наркотического вещества.

5. Спинномозговая и перидуральная анестезия. Роль С.С.Юдина.

Спинномозговая (субарахноидальная) анестезия осуществляется путем введения анестетика в субарахноидальное пространство спино-мозгового канала. Спиномозговая пункция проводился специальными иглами между ОСТИСТЫМИ отростками L3L4 или L2L3 в положении Сольного сидя или лежа на боку с максимальным сгибанием позвоночника.

Данный вид анестезии выполняется при операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях. Используемые анестетики новокаин 5%-1.5-2 мл; совкаин 1%- 0.5-1 мл; лидокаин 2%- 2 мл.

3.2. Эпидуральная анестезия является вариантом проводниковой анестезии. Раствор местного анестетика вводят в эпидурапьное пространство. Обезболивающий эффект достигается блокадой

передних и задних корешков спинного мозга на ограниченном пространстве. Пункцию с последующей катетеризацией эпидурапьного пространства выполняют на любом уровне позвоночного столба в зависимости от области оперативного вмешательства. Анестетик вводят медленно по 5 мл с интервалом в 5мин, через 2030 мин после введения анестетика наступает полная анестезия продолжительностью 2-5 часов. Этот вид обезболивания применяется при операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях, у лиц пожилого и старческого возраста, у больных с заболеваниями легких, ССС, нарушении обменных процессов.

Вкачестве анестетика используют лидокаин 2%- 8-10 мл; тримекаин 2% - 30-40 мл. Продленная эпидуральная анестезия (48-72 ч) с введением постоянного катетера в эпидуральное пространство применяется как метод обезболивания в послеоперационном периоде. Кроме перечисленных выше анестетиков в настоящее время широко используют наркотические анальгетикиморфин, фентанил, промедол.

При операциях в клинических условиях спинальную (спинномозговую) анестезию первым использовал М. Бир в 1898 г. В России впервые ее применил Я. Б. Зельдович в 1899 г. Широкому внедрению этого вида анестезии во многом способствовали труды отечественных хирургов — Юдин начал применять спинномозговую анестезию,мало применяемой в то время из-за боязни многочисленных осложнений. Юдин проводил опыты на животных, пытаясь усовершенствовать этот метод обезболивания. Благодаря собственным исследованиям и наблюдениям Юдину удалось разработать варианты применения этого метода обезболивания при операциях практически на всех органах груди и живота. Итогом явилась монография «Спинномозговая анестезия», которую он посвятил своей матери.

6. Спинномозговая и перидуральная анестезия. Опасности и осложнения.

Спинномозговая (субарахноидальная) анестезия осуществляется путем введения анестетика в субарахноидальное пространство спино-мозгового канала. Спиномозговая пункция проводился специальными иглами между ОСТИСТЫМИ отростками L3L4 или L2L3 в положении Сольного сидя или лежа на боку с максимальным сгибанием позвоночника.

Данный вид анестезии выполняется при операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях. Используемые анестетики новокаин 5%-1.5-2 мл; совкаин 1%- 0.5-1 мл; лидокаин 2%- 2 мл.

3.2. Эпидуральная анестезия является вариантом проводниковой анестезии. Раствор местного анестетика вводят в эпидурапьное пространство. Обезболивающий эффект достигается блокадой передних и задних корешков спинного мозга на ограниченном пространстве. Пункцию с последующей катетеризацией эпидурапьного пространства выполняют на любом уровне позвоночного столба в зависимости от области оперативного вмешательства. Анестетик вводят медленно по 5 мл с интервалом в 5мин, через 2030 мин после введения анестетика наступает полная анестезия продолжительностью 2-5 часов. Этот вид обезболивания применяется при операциях на органах брюшной полости, малого таза, нижних конечностях, у лиц пожилого и старческого возраста, у больных с заболеваниями легких, ССС, нарушении обменных процессов.

Вкачестве анестетика используют лидокаин 2%- 8-10 мл; тримекаин 2% - 30-40 мл. Продленная эпидуральная анестезия (48-72 ч) с введением постоянного катетера в эпидуральное пространство применяется как метод обезболивания в послеоперационном периоде. Кроме перечисленных выше анестетиков в настоящее время широко используют наркотические анальгетикиморфин, фентанил, промедол.

Более распространённым осложнением спинномозговой анестезии бывает послеоперационная головная боль. Факторы, влияющие на частоту головной боли после пункции твёрдой мозговой оболочки, включают молодой возраст, женский пол, большой размер иглы, ориентацию среза иглы (частота повышается, когда волокна твёрдой мозговой оболочки перерезаются поперёк), беременность и большое количество пункций твёрдой мозговой оболочки.

Другой распространённый побочный эффект спинномозговой анестезии — возникновение боли в спине приблизительно у 25% пациентов.

после спинномозговой анестезии может развиться неврологический дефект.

7. Классификация способов местного обезболивания.

Общее обезболивание (наркоз):

- Простой (однокомпонентный) наркоз: Ингаляционный, Неингаляционный:

а) внутрикостный б) внутримышечный в) внутривенный г) ректальный д) электрона

-Комбинированный (многокомпонентный) наркоз Ингаляционный Неингаляционный Неингаляционный + ингаляционный Комбинированный с миорелаксантами, Сочетанная анестезия.

Местная анестезия: а) контактная б) инфильтрационная

в) центральная проводниковая (спинномозговая, эпидуральная, каудальная)

г) периферическая проводниковая (футлярная и блокада нервных стволов и сплетений) д) регионарная внутривенная е) регионарная внутрикостная

V. Трансфузиология. Переливание крови и кровезаменителей.

1. История переливания крови.

Для истории переливания крови характерна волнообразность развития с подъёмами и спадами.

Вней можно выделить три основных периода:

• эмпирический;

• анатомо-физиологический;

• научный. Эмпирический период

Эмпирический период в истории переливания крови был самым продолжительным, но бедным фактами применения крови с лечебной целью. Известно, что ещё во время древнеегипетских войн за войсками гнали стада баранов для использования их крови при лечении раненых воинов. В сочинениях древнегреческих поэтов есть сведения о применении крови для лечения больных. О полезности смешивать соки больных людей с кровью здоровых писал Гиппократ. Он рекомендовал пить кровь здоровых людей больным эпилепсией, душевнобольным. Римские патриции с целью омоложения пили свежую кровь погибших гладиаторов прямо на аренах. Первое упоминание о переливании крови встречается в трудах Либавия, опубликованных в 1615 г., где описана процедура переливания крови от человека человеку с помощью

соединения их сосудов серебряными трубочками, но нет данных, подтверждающих, что такое переливание крови было кому-нибудь сделано.

Анатомо-физиологический период

Начало анатомо-физиологического периода в истории переливания крови связывают с открытием Уильямом Гарвеем в 1628 г. законов кровообращения.

В1666 г. выдающийся английский анатом и физиолог Р. Лоуэр успешно перелил с помощью серебряных трубочек кровь от одной собаки другой, что послужило толчком к применению этой манипуляции у человека. Р. Лоуэру принадлежит приоритет первых опытов по внутривенному вливанию лечебных растворов. В вены собакам он вводил вино, пиво и молоко. Хорошие результаты от переливания крови и введения некоторых жидкостей позволили Лоуэру рекомендовать их применение у людей.

Первое переливание крови от животного человеку осуществил в 1667 г. во Франции Ж. Дени. Он перелил кровь ягненка душевнобольному юноше, погибающему от многократных

кровопусканий, юноша выздоровел. Переливание крови четвёртому больному закончилось его смертью. Ж. Дени был привлечён к суду, а переливание крови было запрещено. В 1675 г. Ватикан издал запретный эдикт, и исследования по трансфузиологии были прекращены почти на целое столетие.

Попытки выполнить переливание крови возобновились лишь в конце XVIII века. А в 1819 г. английский физиолог и акушер Дж. Блендель произвёл первое переливание крови от человека человеку и предложил аппарат для гемотрансфузии, которым он пользовался для лечения обескровленных рожениц. Всего он со своими учениками провёл 11 переливаний крови, причём кровь для переливания забирали у родственников пациентов. Уже в то время Блендель заметил, что в некоторых случаях при гемотрансфузии у больных возникают реакции, и пришёл к выводу, что при их развитии переливание следует сразу прекратить. Перед вливанием крови Блендель использовал подобие современной биологической пробы.

Пионерами русской медицинской науки в области трансфузиологии считают Матвея Пэкэна и С.Ф. Хотовицкого, в конце XVIII и начале XIX века детально описавших технику переливания крови и влияние перелитой крови на организм больного.

В 1830 г. московский химик Герман предложил внутривенно вливать подкисленную воду для лечения холеры. В Англии врач Латта в 1832 г. во время эпидемий холеры произвёл внутривенное вливание раствора поваренной соли. Эти события стали началом применения кровезамещающих растворов.

Научный период

Важнейшие события этого периода следующие:

•1901 г. - открытие венским бактериологом Карлом Ландштейнером трёх групп крови человека (А, В, С). Он разделил всех людей на три группы - по способности сыворотки и эритроцитов их крови вызывать явление изогемагглютинации (склеивания эритроцитов).

•1902 г. - сотрудники К. Ландштейнера А. Декастелло и А. Штурли нашли людей, эритроциты и сыворотки которых отличались от упомянутых трёх групп. Эту группу они рассматривали как отклонение от схемы Ландштейнера.

•1907 г. - чешский учёный Я. Янский доказал, что новая группа крови является самостоятельной и все люди по иммунологическим свойствам крови делятся не на три, а на четыре группы, и обозначил их римскими цифрами (I, II, III и IV).

•1910-1915 гг. - открытие способа стабилизации крови. В работах В.А. Юревича и Н.К. Розенгарта (1910) и др был разработан способ стабилизации крови лимоннокислым натрием, связывающим ионы кальция и таким образом препятствующим свёртыванию крови. Это было важнейшее событие в истории переливания крови, так как сделало возможными консервирование и хранение донорской крови.

•1919 г. - В.Н. Шамов, В.Н. Еланский и Р.Р. Негров получили первые стандартные сыворотки для определения группы крови и произвели первое переливание крови с учётом изогемагглютинирующих свойств донора и реципиента.

•1926 г. - в Москве был создан первый в мире Институт переливания крови (ныне Центральный институт гематологии и переливания крови).

•1940 г. - открытие К. Ландштейнером и А. Винером резус-фактора - второй по значимости антигенной системы, играющей важную роль в иммуногематологии.

Во второй половине XX века были разработаны способы консервирования крови, внедрены в практику препараты направленного действия, полученные методом фракционирования крови и плазмы.

2. Учение о группах крови.

Группа крови — сочетание нормальных иммунологических и генетических признаков крови, наследственно детерминированное биологическое свойство каждого индивидуума.

Это признак, который передается по наследству и не изменяется в течение жизни при естественных условиях. Группа крови является индивидуальным для каждого человека набором специфических веществ, называющихся групповыми антигенами. Группа крови не зависит от

расы, половой принадлежности, возраста. Формируется на 3 или 4 месяце внутриутробного развития. Считают, что группа крови у человека включает несколько десятков АГ в различных сочетаниях. Этих сочетаний м.б. неск млрд. Практически они одинаковы лишь у однояйцовых близнецов, имеющих один и тот же генотип. В практической медицине термин «группа крови», как правило, отражает сочетание эритроцитарных АГ системы АВ0, резус-фактора и соответствующих АТ в сыворотке крови.

Группы крови системы АВ0 были открыты в 1900 году К.Ландштейнером, который смешивая эритроциты одних лиц с сывороткой крови других лиц, обнаружил, что при одних сочетаниях кровь свертывается, образуя хлопья (реакция агглютинации), а при других нет. На основании этих исследований Ландштейнер разделил кровь всех людей на три группы: А, В и С. В 1907 году была обнаружена еще одна группа крови.

Было установлено, что реакция агглютинации происходит при склеивании антигенов одной группы крови (их назвали агглютиногенами), которые находятся в красных кровяных тельцах - эритроцитах с антителами другой группы (их назвали агглютининам), находящимися в плазме - жидкой части крови. Разделение крови по системе АВ0 на четыре группы основано на том, что кровь может содержать или не содержать антигены (агглютиногены) А и В, а также антитела (агглютинины) α (альфа или анти-А) и β (бета или анти-Б).

Первая группа крови - 0 (I)

I группа - не содержит агглютиногенов (антигенов), но содержит агглютинины (антитела) α и β. Она обозначается 0 (I). Так как эта группа не содержит инородных частиц (антигенов), то ее можно переливать всем людям. Человек с такой группой крови является универсальным донором.

Вторая группа крови А β (II)

II группа содержит агглютиноген (антиген) А и агглютинин β (антитела к агглютиногену В). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген В - это I и II группы.

Третья группа крови Вα (III)

III группа содержит агглютиноген (антиген) В и агглютинин α (антитела к агглютиногену А). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген А - это I и III группы.

Четвертая группа крови АВ0 (IV)

IV группа крови содержит агглютиногены (антигены) А и В, но содержит агглютининов (антител). Поэтому ее можно переливать только тем, у кого такая же, четвертая группа крови. Но, так как в крови таких людей нет антител, способных склеиться с вводимыми извне антителами, то им можно переливать кровь любой группы. Люди с четвертой группой крови являются универсальными реципиентами.

3.Методика определения групп крови.

•С помощью стандартных сывороток (где нет агглютинации, та и группа).

•С помощью целиклонов (где есть агглютинация та и группа)

•С помощью стандартных Эр

•Перекрестный метод

Группа крови определяется в хорошо освещенном помещении при температуре 15-25 °С. Более низкая или более высокая температура может исказить результаты исследования. На тарелке или пластинке пишут фамилию и инициалы больного, которому определяют группу крови. Затем по кругу или слева направо пишут обозначения групп крови: О(I), A(II), В(III). Под этими обозначениями наносят по капле соответствующих сывороток. Для сыворотки каждой группы пользуются отдельной пипеткой. К сывороткам добавляют кровь больного. Кровь для определения ее группы берут из пальца или мочки уха. Необходимо, чтобы количество стандартной сыворотки было примерно в 10 раз больше, чем количество добавляемой крови. Затем капли перемешивают отдельными стеклянными палочками и в течение 5 мин наблюдают появление реакции гемагглютинации, осторожно покачивая при этом тарелку или пластинку.

Агглютинация выражается в появлении мелких красных комочков, которые из мелких постепенно сливаются в более крупные. При этом сыворотка почти полностью обесцвечивается. Возможно образование ложной гемагглютинации простого склеивания эритроцитов. Поэтому через 3 мин к каплям, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле физиологического раствора. Если через 5 мин агглютинация сохранилась, значит она истинная . Трактовка результатов. При определении группы крови могут получиться 4 возможных реакции:

1)агглютинации не наступило ни с одной из стандартных сывороток; кровь 1-й группы -

О(I);

2)агглютинация наступила с сыворотками I(ab) и III(a) группы; кровь 2-й группы - А(II);

3)агглютинация наступила с сыворотками I(ab) и II(b) групп; кровь 3-й группы - В(III);

4)агглютинация со всеми тремя сыворотками; в этом случае обязательно дополнительное

исследование со стандартными сыворотками группы АВ(IV); лишь отсутствие агглютинации в этой капле позволяет считать, что это - 4-я группа крови — АВ(IV).

Определение групп крови моноклинальными антителами

Моноклинальные антитела (ABO-титрующие: цоликлоны анти-А и анти-В) получаются при помощи генной инженерии. Их готовят в промышленных масштабах из крови стерильных мышей, поэтому исключается заражение гепатитом или СПИДом. Цоликлон анти-А окрашивается в голубой цвет; анти-В - в розовый.

Цоликлоны наносятся на планшет одной большой каплей (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А, анти-В. Рядом наносится по одной маленькой (0,01 мл) капле исследуемой крови. После смешивания реагентов и крови реакцию агглютинации наблюдают в течение 2,5 минут.

Оценка результатов:

•кровь Oαβ(I) группы - агглютинации нет ни с цоликлоном анти-A, ни с анти-B (эритроциты не содержат антигенов A и В);

•кровь Aβ(II) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-A (эритроциты содержат только антиген A);

•кровь Bα(III) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-B (эритроциты содержат только антиген B);

•кровь ABO(IV) - агглютинация наблюдается с обеими цоликлонами (эритроциты содержат оба антигена). В этом случае производится контрольное исследование дабы исключить аутоагглютинацию. Одна капля (0,1 мл) изотонического раствора хлорида натрия смешивается с каплей (0,01 мл) исследуемой крови - реакция агглютинации должна отсутствовать.

4.Резус-фактор. Определение резус-фактора.

Антиген Rh — один из эритроцитарных антигенов системы резус, располагается на поверхности эритроцитов. В системе резус различают 5 основных антигенов. Основным (наиболее иммуногенным) является антиген Rh (D), который обычно подразумевают под названием резус-фактор. Эритроциты примерно 85% людей несут этот белок, поэтому их относят к резус-положительным (позитивным). У 15% людей его нет, они резус-отрицательны (негативны).

Способы определения резус-фактора Все методы определения резус-фактора делятся на способы, применяемые в клинике: в

условиях приемного покоя, в операционной, на отделении у постели больного и т. д., не требующие специального лабораторного оснащения, и лабораторные способы.

Способы определения резус-фактора в клинике. Используются два так называемых экспрессметода: экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева. Экспресс-метод на плоскости без подогрева.

Экспресс-метод определения Rh-фактора стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева.

Для исследования может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца (из вены) непосредственно перед исследованием, или консервированная кровь без предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после формирования сгустка и отстаивания сыворотки.

Методика проведения реакции Исследование проводят в центрифужных пробирках объемом не менее 10 мл. На дно пробирки

вносят одну каплю стандартного универсального реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ (IV), содержащую 33% раствор полиглюкина. Затем в нее добавляют одну каплю исследуемой крови (или эритроцитов). Круговым вращением пробирки содержимое размазывают но ее внутренней поверхности таким образом, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает ее крупнолепестковой. Агглютинация на стенках пробирки наступает, как правило, в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса «антиген - антитело» и четкой агглютинации наблюдать следует не менее 3 минут. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора и перемешивают путем одно-двукратного перевертывании пробирки (без взбалтывания!). Наличие агглютинации (крупные хлопья на фоне просветленной жидкости) указывает на резусположительную принадлежность исследуемой крови. Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная розовая жидкость) свидетельствует о резус-отрицательной принадлежности.

Лабораторные методы определения резус-фактора Для определения резус-принадлежности крови больного в условиях лаборатории применяют четыре основных метода.

Метод агглютинации в солевой среде Используют специальные сыворотки, содержащие полные антитела анти-резус. Эритроциты в

виде 2% взвеси в изотоническом растворе хлорида натрия соединяют в пробирках с антирезусной сывороткой. Пробирки помещают на 1 час в термостат при температуре 37°С, после чего осадок эритроцитов на дне пробирки рассматривают с помощью лупы и по его форме учитывают результат. При положительном результате (Rh+) осадок имеет характерный рисунок в виде нитей или зернистости. При отрицательном (Rh-) осадок размещается равномерным слоем и имеет вид правильно очерченного круга.

Метод конглютинации с желатином

Впробирку помещают равные объемы исследуемых эритроцитов, антирезусной сыворотки и 10% раствора желатина. Пробирки инкубируют при температуре 45-48є C, после чего добавляют десятикратный объем физиологического раствора. Пробирки 2-3 раза переворачивают и учитывают результат по наличию агглютинации, видимой невооруженным глазом.

Непрямой антиглобулиновый тест (реакция Кумбса)

Эта реакция является наиболее чувствительной для выявления неполных антител к ауто- и изоантигенам эритроцитов. К ней, как правило, прибегают при возникновении трудностей в определении резус-принадлежности крови, связанных с нечеткими результатами, полученными при других методах исследования. Реакция основана на использовании антиглобулиновой сыворотки (АГС). При обработке резус-положительных эритроцитов неполными антителами анти-Rh наступает их обволакивание (сенсибилизация) по отношению к АГС, которая и агглютинирует сенсибилизированные эритроциты, поскольку имеет антитела к глобулинам.

Впробирку вносят антирезусную сыворотку и отмытые физиологическим раствором эритроциты; помещают на 1 час в термостат при температуре 37°С, после чего эритроциты тщательно отмывают. Последующий этап реакции проводят на плоскости. Каплю взвеси эритроцитов смешивают с равным количеством антиглобулиновой сыворотки и учитывают результат. Наличие агглютинации является показателем того, что исследуемый образец крови

резусположительный. Если агглютинация отсутствует, испытуемая кровь - резусотрицательная.

Реакция с aнти-D-моноклональными антителами.

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D-моноклональных антител (МКА) и маленькую каплю (0,01мл) исследуемой крови. За реакцией наблюдают в течение 2,5 мин. При смешивании анти-D-МКА образцами резус-положительных эритроцитов отмечается быстрое наступающая лепестковая агглютинация. Если кровь резус-отрицательная - агглютинация отсутствует.

5. Иммунологические аспекты при переливании крови и ее компонентов.

Надо иметь в виду, что антигены крови - маркёры генотипа каждого индивидуума. Этот факт имеет значение для плодовитости брака, течения и исхода беременности и здоровья новорождённого. Половые клетки соответственно генотипу имеют антигены, аналогичные групповым антигенам крови, а супруги часто отличаются по группе крови. Несовместимость супругов по системе резус-фактора - одна из наиболее частых причин иммунологического конфликта при беременности, приводящего к гибели плода или гемолитической болезни новорождённого.

B настоящее время всё больше появляется данных о статистически значимых связях групп крови с инфекционной и неинфекционной патологией человека. Наличие некоторых эритроцитарных и лейкоцитарных антигенов создаёт условия для большей вероятности некоторых заболеваний.

Первостепенное значение группы крови имеют в трансфузиологической практике при переливании донорской крови, её компонентов и препаратов.

Значение групповой принадлежности при гемотрансфузии Группа крови каждого человека включает большое количество различных эритроцитарных,

лейкоцитарных, тромбоцитарных и плазменных антигенов, достаточно активных и способных стать причиной иммунологической несовместимости при гемотрансфузии. Главенствующую роль играют антигенные системы АВ0 и Rh-фактора.

Иммунологическая несовместимость возникает при появлении в результате гемотрансфузии в крови у реципиента одноимённых антигенов в эритроцитах и в достаточном количестве антител - в сыворотке крови (агглютиноген А - агглютинин а; агглютиноген В - агглютинин β; антиген D(Rh0) - антирезусные антитела). При этом возникает агглютинация эритроцитов с последующим гемолизом.

Правило Оттенберга Согласно которому подвергаются агглютинации только эритроциты переливаемой донорской

крови, так как агглютинины вливаемой крови разводятся в сосудистом русле пациента, их титр становится низким и они не в состоянии агглютинировать эритроциты реципиента. По правилу Оттенберга, можно переливать кровь, эритроциты которой не могут быть агглютинированы сывороткой реципиента.

Всоответствии с правилом Оттенберга возможно переливание не только одногруппной крови. Эритроциты группы 0(I) не содержат никаких агглютиногенов и не дают агглютинации ни с какими сыворотками. Следовательно, кровь этой группы можно переливать лицам всех остальных групп.

Всыворотке крови группы АВ(IV) нет никаких агглютининов, поэтому перелитые эритроциты других групп никогда не будут агглютинироваться и, соответственно, лицам с четвёртой группой крови можно переливать кровь от людей с любой группой крови. Правило Оттенберга применимо лишь при переливании до 0,5 л донорской крови (!).

При массивной кровопотере, когда необходимо перелить большее количество крови, агглютинины плазмы вливаемой крови не получают достаточной степени разведения плазмой реципиента и, следовательно, могут агглютинировать его эритроциты. По современным правилам во избежание этого осложнения всегда следует переливать только одногруппную кровь.