- •Раздел 3. Частная вирусология
- •Тема 3.1. Микробиологическая диагностика стафило- и стрептокок-
- •Тема 3.2. Микробиологическая диагностика рожи свиней и листериоза. 149
- •Введение
- •Требования к уровню освоения дициплины
- •Раздел 1. Общая микробиология
- •Устройство бактериологической лаборатории
- •Устройство микроскопа
- •Правила работы с микроскопом
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.2. Основные формы бактерий. Бактериологические краски. Приго-
- •Формы бактерий
- •Бактериологические краски
- •Техника приготовлениябактериологических препаратов (мазков)
- •Методы фиксации мазков:
- •Простые методы окраски бактерий
- •Сложные методы окраски
- •Окраска по Граму
- •Окраска по Циль-Нильсену
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.3. Окраска спор, капсул бактерий, методы определения подвижно- сти бактерий.
- •Метод Пешкова:
- •Метод Виртца:
- •Ные капсулы.
- •Метод Михина:
- •Метод Ольта:
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.4. Изучение морфологии грибов и актиномицетов.
- •Классификация
- •Тофтора).
- •Культивирование грибов
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.5. Лабораторная аппаратура. Методы стерилизации.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.6.Приготовление питательных сред.
- •Классификация питательных сред
- •По назначению:
- •Специальные питательные среды
- •Методы создания анаэробных условий
- •Дифференциально-диагностические среды
- •Висмут-сульфит агар (среда Вильсон-Блера).
- •Среды накопления (обогащения)
- •Синтетические среды
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.7.Посев и культивирование микроорганизмов. Методы выделения чистых культур микробов.
- •Техника посева на поверхность плотной питательной среды в чашках Петри
- •Техника посева на скошенный агар
- •Техника посева на жидкую
- •Техника пересевов культур микробов
- •Ной среды на другую.
- •Методы механического разделения микробов
- •Методы использования биологических особенностей микроорганизмов
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.8.Изучение культуральных и биохимических (ферментативных)
- •Определение протеолитических ферментов
- •Определение сахаролитических свойств микробов
- •Определение окислительно-восстановительных ферментов
- •Определение редуцирующих свойств
- •Определение гемолитических свойств
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.9.Изучение действия антибиотиков,антисептиков и бактерио-
- •Метод диффузии антибиотиков в агар с применением дисков
- •Метод серийных разведений антибиотика
- •Контрольные вопросы:
- •Способы заражения лабораторных животных
- •Вскрытие трупов лабораторных животных
- •Определение токсигенности микробов
- •Определение токсичности микробов
- •Методы лабораторных исследований
- •Отбор патматериала
- •Принципы организации и оборудование бактериологических лабораторий
- •Правила взятия, консервирования и транспортировки патологического материала
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.11.Санитарно-бактериологическое исследование воды.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.12.Санитарно-бактериологическое исследование воздуха и почвы.
- •Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 1.13.Изучение микрофлоры кормов. Коллоквиум №1 «Общая микро-
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 2. Инфекция и иммунитет Тема 2.1.Серологические реакции. Реакция агглютинации (ра).
- •Метод ра.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2.2.Реакция преципитации (рп).
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2.3.Реакция связывания комплемента (рск).
- •Компоненты реакции:
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2.4.Реакция нейтрализации (рн), метод флуоресцирующих антител
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 2.5.Биопрепараты. Коллоквиум № 2 «Серологические реакции в мик- робиологии».
- •Лиофилизация микроорганизмов
- •Правила использования и хранения биопрепаратов, их транспортировка
- •Контрольные вопросы:
- •Раздел 3. Частнаямикробиология Тема 3.1.Микробиологическая диагностика стафило- и стрептококкозов
- •Стафилококки.
- •Специфическая терапия и профилактика.
- •Стрептококкоза молодняка.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.2.Микробиологическая диагностика рожи свиней и листериоза Цель занятия: ознакомить студентов с возбудителями рожи свиней и листе-
- •Содержание:
- •Слева: гладкие s-формы (колонии возбудителя на пита- тельной среде и мазок под микроскопом); Справа: шероховатые r-формы (колонии возбудителя на питательной среде и мазок под микроскопом).
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.3.Микробиологическая диагностика сибирской язвы.
- •Ная» дорожка.
- •Специфическая профилактика.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.4.Микробиологическая диагностика клостридиозов.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.5. Микробиологическая диагностика некробактериоза и копытной гнили овец.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.6. Коллоквиум № 3 «Грамположительные микроорганизмы». Цель занятия: выявить у студентов остаточные знания по пройденному ма-
- •Содержание:
- •Тема 3.7. Микробиологическая диагностика туберкулеза.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.8. Микробиологическая диагностика паратуберкулеза.
- •Тема 3.9. Микробиологическая диагностика эшерихиозов и сальмонелле-
- •Мпа; 2. Среда Эндо; 3. Среда Левина; 4. Среда Плоскирева.
- •Специфическая профилактика.
- •Специфическая профилактика.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.10. Микробиологическая диагностика бруцеллеза и туляремии.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.11.Микробиологическая диагностика пастереллеза и гемофилезов свиней.
- •Специфическая терапия.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.12. Микробиологическая диагностика сапа лошадей и мелиоидоза.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.13. Коллоквиум № 4 «Грамотрицательные микроорганизмы». Цель занятия: выявить у студентов остаточные знания по пройденному ма-
- •Содержание:
- •Тема 3.14. Микробиологическая диагностика лептоспироза и кампило-
- •Вакцины импортные для собак:
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.15. Патогенные микоплазмы.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.16. Хламидии, риккетсии.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.17. Лабораторная диагностика микозов.
- •Лабораторная диагностика, специфическая терапия и профилактика.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема 3.18. Лабораторная диагностика микотоксикозов.
- •Контрольные вопросы:
- •Форма промежуточного контроля знаний студентов
- •Список рекомендованной литературы
- •Дополнительная литература
- •Периодические издания
- •Перечень ресурсов информационно-телекоммуникационной сети «Интернет»
Вскрытие трупов лабораторных животных
Вскрытие трупов животных производят стерильными инструментами, в бок- се, с соблюдением правил асептики.
Труп животного фиксируют брюшком вверх на деревянной доске или на пла- стинке застывшего парафина
с помощью препаровальных игл. Кожно-шерстный покров обрабатывают антисептиком. Сначала исследуют кожу и подкожную клетчатку, затем проводят вскрытие, готовят
мазки и делают посевы из ор- ганов грудной полости и из
Рисунок 67 - Вскрытие трупа лабораторного жи- вотного.
брюшной полости. При вскрытии обращают внимание на патологоанатомические изменения (рисунок 67).
Посевы на МПБ и МПА из сердца или паренхиматозных органов делают по- сле их прижигания шпателем пастеровской пипеткой. Из крови и из органов де- лают мазки.
После окончания работы трупы сжигают или автоклавируют.При хранении до утилизации трупы засыпают хлорной известью или заливают дезрастворами.
Определение вирулентности микробов Вирулентность – это биологическое свойство микроба, характеризующее
степень патогенности. Это индивидуальный признак, который может усиливаться или ослабляться под влиянием различных факторов.
За единицу измерения вирулентности приняты:
минимальная летальная доза Dlm (dosisletaliminima) – наименьшее число па- тогенных микроорганизмов, способное вызвать гибель подопытного животного при заражении;
безусловная смертельная доза Dcm (dosiscetraletalis) – от которой гибнут 100
% зараженных животных;
LD50 – количество патогенных микробов, способное вызвать гибель 50 % за- раженных животных;
Чем меньше микробных клеток вызывает гибель лабораторных животных, тем вирулентнее культура микроба.
Определение токсигенности микробов
Токсигенность микроба обусловлена ядовитыми веществами (экзотоксинами), вырабатываемыми некоторыми микроорганизмами – возбудителями ботулизма, столбняка, энтеротоксемии и др. Экзотоксины легко диффундируют из клетки в окружающую среду, обладают резко выраженной токсигенностью, избирательно- стью действия с поражением отдельных органов и тканей.
Токсигенность определяют по тому же принципу, что и вирулентность. Еди- ницами измерения токсигенности, как и вирулентности, является минимальная смертельная доза (LDm) и средняя смертельная доза (LD 50). Бульонную культуру микроба выдерживают в термостате1-3 недели для накопления токсина, затем фильтруют через бактериальный фильтр. Фильтрат культуры разводят стерильным
физраствором в десятки, сотни, тысячи и миллионы раз.каждую дозу испытывают одновременно на нескольких животных. Подбирают животных наиболее чувстви- тельных к данному токсину.
Определение токсичности микробов
Токсичность микроба обусловлена эндотоксина, т.е. ядовитыми веществами, прочно связанными с микробной клеткой и получить их можно только при разру- шении микробной клетки. Например, токсичностью обладают сальмонеллы, ки- шечная палочка (патогенные серовары) и другие микробы.
При определении токсичность используют 1-2 суточную агаровую культуру.
Готовят смыв физраствором и по стандарту мутности доводят его до 10 млрд. микробных клеток в 1 мл. Для извлечения токсина микробные клетки разрушают трехкратным замораживанием и оттаиванием. Для обезвреживания неразрушен- ных клеток взвесь прогревают при 80 °С 20 минут, а затем вводят лабораторным животным внутрибрюшинно. Гибель животных наблюдают через 1-2 часа при су- дорогах.
Схема диагностики инфекционных болезней
Диагноз на инфекционные болезни ставят комплексно, учитывая эпизоотоло- гические данные, клинические признаки болезни, результаты аллергической диаг- ностики, патологоанатомические изменения в органах и результаты лабораторных исследований.