Метод серийных разведений антибиотика

Сущность данного метода заключается в выявлении роста исследуемой куль- туры в питательной среде, содержащей разные концентрации антибиотика. Метод серийных разведений позволяет определить минимальную концентрацию анти- биотика, ингибирующую рост изучаемого микроорганизма.

При выборе питательной среды учитывают, что она должна обеспечить опти- мальный рост исследуемой культуры микроба. Чаще всего применяют МПБ; буль- он Хоттингера, с содержанием 180-200 мг % аминного азота; 2 % МПА. Для ис- следования анаэробных бактерий используют среду Китта-Тароцци без кусочков печени с добавлением 0,5 % глюкозы. Для серийного разведения антибиотика в пробирки наливают по 2 мл среды для аэробов и по 9 мл среды для анаэробов.

Из каждого антибиотика готовят два раствора – основной, а из него уже рабо- чий. Используют агаровые 16-18 часовые культуры, которые смывают физиологи- ческим раствороми по стандарту мутности готовят одномиллиардную взвесь в 1 мл. В каждую пробирку с рабочими разведениями антибиотика высевают по 0,2 мл одномиллиардной взвеси микробов. Учет результатов проводят визуально, че- рез 16-18 часов инкубации при 37 °С. Отмечают пробирку, в которой отсутствует рост. Показатель концентрации антибиотика в ней складывают с количеством ан- тибиотика в последующей пробирке, ГД отмечен рост культуры, и выводят сред- нее арифметическое, которое является показателем бактериостатической концен- трации, характеризует чувствительность бактерии к антибиотику и называется ми- нимальной ингибирующей концентрацией (МИК).

Если рост отмечен во всех пробирках ряда, то это указывает на устойчивость испытуемого организма к максимально взятой дозе антибиотика. Отсутствие роста во всех пробирках свидетельствует о том, что чувствительность микроба выше ис- пользованной в опыте минимальной концентрации.

Контрольные вопросы:

1. Как определить чувствительность микробов к антибактериальным препаратам.

2. Дать понятие асептики и антисептики.

3. На какие группы делятся антисептики.

4. Чем обусловлено взаимодействие фага с бактериальной клеткой.

5. На какие группы разделяют фаги по степени их специфичности.

Тема 1.10.Правила заражения лабораторных животных. Определение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Взятие и пересылка иссле- дуемого материала для проведения бактериологического исследования.

Цель занятия:ознакомить студентов с методами исследования, связанные с заражением животных.

Содержание:

1. Правила заражения лабораторных животных.

2. Определение патогенности и вирулентности микроорганизмов.

3. Схема диагностики инфекционных болезней.

4. Методы лабораторных исследований.

5. Отбор патологического материала.

6. Правила взятия, консервирования и транспортировки патологического ма- териала.

Методы исследования, связанные с заражением животных, называются био- логическими или биопробой. Используемые для этих целей животные называются лабораторными или экспериментальными. Наиболее широко в микробиологиче- ских лабораториях используют кроликов, морских свинок, белых мышей, крыс, голубей, цыплят.

Экспериментальное заражение лабораторных животных проводится с целью определения патогенности, вирулентности и токсичности микробов; выделения чистой культуры из патматериала, а также для определения активности и безвред- ности приготовленных вакцин.