2. Теоретические вопросы к занятию:

• Актуальность темы "Сальмонеллы - возбудители острых сальмонеллезных гастроэнтеритов".

• Систематическое положение возбудителей сальмонеллезов.

• Биологические свойства сальмонелл.

• Патогенез острых сальмонеллезных гастроэнтеритов и его особенности.

• Иммунитет при сальмонеллезной токсикоинфекции.

• Принципы и методы микробиологической диагностики острых сальмонеллезных гастроэнтеритов.

3. Практические задания, выполняемые на занятии:

• Провести микроскопическое исследование демонстрационных препаратов из разных видов возбудителей острых сальмонеллезных гастроэнтеритов, окрашенных по Граму. Сделать вывод о возможности их дифференциации по морфологическим и тинкториальным свойствам.

• Изучить культуральные и биохимические свойства возбудителей сальмонеллезов на средах Эндо, Плоскирева, Олькеницкого, висмут-сульфит агаре, желчном бульоне, МПА.

• Осуществить серологическую идентификацию чистой культуры сальмонелл, выделенной от больного с подозрением на гастроэнтерит, с помощью реакции агглютинации на стекле с О- и Н- сальмонеллезными диагностическими сыворотками. Определить вид возбудителя по классификации Кауфмана-Уайта.

• Создать схему микробиологической диагностики острых сальмонеллезных гастроэнтеритов.

• Изучить диагностические препараты, применяемые при сальмонеллезной токсикоинфекции.

4. Содержание темы:

На практическом занятии студенты изучают разные биологические свойства сальмонелл - возбудителей острых сальмонеллезных гастроэнтеритов. Для знакомства с морфологическими свойствами проводят сравнительное микроскопическое исследование демонстрационных препаратов из разных видов сальмонелл. Культуральные и биохимические свойства изучают на элективных и дифференциально-диагностических средах. Антигенные свойства определяют путем постановки реакции агглютинации с целью серологической идентификации чистой копрокультуры, выделенной от больного с подозрением на острый сальмонеллезный гастроэнтерит. На основании изучения патогенеза этого заболевания и свойств возбудителя создают схему микробиологической диагностики. Изучают иммуногенез сальмонеллезных гастроэнтеритов, знакомятся с диагностическими и лечебно-профилактическими препаратами, которые используются в медицинской практике при сальмонеллезах.

Выполненные задания студенты записывают в протокол и подписывают его у преподавателя.

Рекомендации по оформлению протокола.

Студенты вносят в протоколы:

• Рисунок 1. Изучение морфологических и тинкториальных свойств сальмонелл (S.typhimurium, S.enteritidis, S. choleraesuis) на демонстрационных препаратах, окрашенных по Граму. Записывают вывод о возможности дифференциации сальмонелл по морфологическим и тинкториальным свойствам.

• Таблица 1. Культуральные и ферментативные свойства сальмонелл.

Характеристика роста на				Олькеницкого			Ряд Гисса
МПА S форма колоний	Желчном бульоне помутнение	Эндо прозрачные колонии	Висмут-сульфит агаре черные колонии	Ферментация		Образо-вание H2S +	Ферментация
				Лактозы –	мочевины –		Глюкозы	Маннита	Лактозы	Сахарозы
							КГ	КГ	–	–

• Рисунок 2. Схема постановки реакции агглютинации для серологической идентификации сальмонелл.

Выделенная культура

4 6 9 i c g, m

Иммунные диагностические Иммунные диагностические

сальмонеллезные О-сыворотки сальмонеллезные Н-сыворотки

• Рисунок 3. Схема микробиологической диагностики острых сальмонеллезных гастроэнтеритов

Бактериологическая диагностика

Выделение гемокультуры Эндо

в первые часы заболевания

Висмут-сульфит агар

К ровь Желчный бульон

Олькеницького

МПА

Фекалии и др. Желчный

селенитовый бульон

Идентификация выделенной культуры

1. По культуральным признакам;

2. По морфологическим, тинкториальным свойствам;

3. Биохимическая идентификация;

4. Серологическая идентификация с помощью реакции агглютинации по классификации Кауфмана-Уайта:

А) С адсорбированной групоспецифичной О-сывороткой (В, С, Д, Е);

Б) С адсорбированной О-сывороткой серогрупп 4, 7, 9, 10;

В) С адсорбированными Н-сыворотками (i, r, c, g, m, e, h);

5. Фаготипирование

Биологическое исследование для определения источника заболевания.

per os Через 24-48 час. гибель от септицемии

Посевы из органов, крови на элективные и дифференциальные среды, затем иденти-фикация выделенных культур, как при бактериологической диагностике.

Остатки еды, Белые мыши

смывы с рук, и др.

Серологическая диагностика

Можно осуществлять с первых дней заболевания с повторным исследованием через 7-10 дней. Используют реакцию агглютинации или РНГА с сальмонеллезными поливалентными и группоспецифическими (А, В, С, Д, Е) диагностикумами. Диагностическое значение имеет увеличение титров антител в 2-4 раза.

• Студенты записывают препараты, которые используют при диагностике сальмонеллезных гастроэнтеритов.