5. Обнаружение рибофлавина (витамина в2).
Метод основан на восстановлении рибофлавина водородом, образующимся при взаимодействии металлического цинка с концентрированной соляной кислотой.
Ход работы: В пробирку наливают 10 капель 0,025% раствора рибофлавина и добавляют 5 капель концентрированной соляной кислоты и небольшое зернышко металлического цинка или порошка цинка. Начинается бурное выделение пузырьков водорода и жидкость изменяет окраску с желтого до розового и далее бесцветного раствора.
6. Качественная реакция на никотинамид (витамин рр).
Метод основан на образовании цветного тройного комплексного соединения тиоцианата-никотината меди.
Ход работы: 0,02 г никотинамида или кислоты никотиновой растворяют в 1 мл воды, прибавляют 2-3 капли 10% раствора сульфата меди, перемешивают и наблюдают сине-голубой осадок никотината меди. Затем прибавляют 2-3 капли 5% раствора роданида аммония (тиоцианата аммония), при этом образуется тройное комплексное соединение ярко-зеленого цвета.
7. Качественная реакция на пиридоксин (витамин в6).
Метод основан на образовании комплексной соли типа фенолята железа красного цвета при взаимодействии фенольного гидроксила пиридоксина с хлоридом железа (III).
Ход работы: К 5 каплям 1% раствора пиридоксина прибавляют 5 капель 1% раствора FeCl3, перемешивают, развивается красное окрашивание.
8. Качественная реакция на аскорбиновую кислоту (витамин с).
Метод основан на способности аскорбиновой кислоты легко окисляться и восстанавливать железосинеродистый калий.
Ход работы: К 5 каплям 1% раствора витамина С приливают 1 каплю 10% раствора гидроксида натрия и 1 каплю 5% раствора железосинеродистого калия, перемешивают, после чего добавляют 3 капли 10% раствора соляной кислоты и 1 каплю 1% раствора хлорида железа (III). Выпадает синий осадок берлинской лазури.
9. Качественная реакция на рутин (витамин р).
Метод основан на взаимодействии рутина с хлоридом железа (III) с образованием комплексного соединения зеленого цвета.
Ход работы: В пробирку бросают несколько чаинок, заливают 5 мл дистиллированной воды и кипятят в течение 3 минут. Дают остыть, сливают жидкость в другую пробирку и добавляют несколько кристалликов FeCl3. Перемешивают и смотрят за развивающимся зеленым окрашиванием.
Указания к составлению отчета: Занести в тетрадь все результаты проведенных реакций. Где возможно написать химизм реакций.
Лабораторная работа №5
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ
Цель работы – освоить метод количественного определения аскорбиновой кислоты в продуктах питания.
Определение содержания аскорбиновой кислоты в пищевых продуктах и лекарственных растениях необходимо для составления правильного рациона, удовлетворяющего потребность организма в этом витамине. Богаты витамином С плоды шиповника, черной смородины, цитрусовых. Аскорбиновая кислота участвует в окислительно-восстановительных процессах при синтезе стероидных гормонов, обмене ароматических аминокислот, образовании соединительной ткани.
Метод основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол. 2,6-дихлориндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой – красную, а при восстановлении обесцвечивается:
синий красный бесцветный
Количественное определение витамина С проводят, титруя исследуемый подкисленный соляной кислотой раствор щелочным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола. Пока в титруемом растворе содержится витамин С, приливаемый щелочной раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола будет обесцвечиваться за счет образования восстановленной формы. Как только все количество витамина С, имеющееся в исследуемом растворе, окислится, титруемый раствор приобретает розовую окраску за счет образования недиссоциированных молекул 2,6-дихлорфенолиндофенола в кислой среде.
аскорбиновая 2,6-дихлорфенол- дегидроаскорбиновая лейкоформа 2,6-дихлор-
кислота индофенол кислота фенолиндофенола
Исследуемый материал: картофель, капуста, хвоя.
Реактивы: 0,001 М раствор натриевой соли 2,6-дихлорфенолиндофенола; 2% раствор соляной кислоты.
Оборудование: весы с разновесом; ступка с пестиком; воронка; вата; мерная колба на 100 мл; коническая колбочка на 25 мл; пипетки на 5 и 10 мл; микробюретка.
Ход работы: На весах берут навеску картофеля 2 г., или капусты 2 г., или хвои 0,5 г. Исследуемый материал помещают в ступку и растирают, постепенно добавляя 5 мл раствора соляной кислоты. Вытяжку фильтруют через тонкий слой ваты в мерную колбу на 100 мл. Извлечение витамина С из той же навески повторяют еще два раза, каждый раз добавляя по 5 мл раствора соляной кислоты и фильтруя полученную вытяжку в ту же мерную колбу. Далее содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой. Для определения отбирают 10 мл вытяжки в коническую колбочку и титруют содержимое раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола, налитого в микробюретку, до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с.
Указания к составлению отчета: Расчет проводят по формуле:
Х = (0,088 ∙ V ∙ 100 ∙ 1000)/(10 ∙ а),
где Х – содержание аскорбиновой кислоты, мг/кг,
0,088 – титр аскорбиновой кислоты по 0,001 М раствору
2,6-дихлорфенолиндофенола, мг/мл,
100 – разведение (объем мерной колбы), мл,
1000 – коэффициент пересчета на 1 кг сырья, г,
10 – объем жидкости взятый для титрования, мл,
V – объем 2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедший на титрование, мл,
а – навеска исследуемого материала, г.