- •Ветеринарная вирусология, ее достижения и задачи.
- •Вирионы - наиболее известная форма существования вирусов.
- •Вирусы как инфекционные агенты. Принципиальные отличия вирусов от других инфекционных агентов.
- •Генетические признаки вирусов и их использование в характеристике штаммов. Мутации у вирусов и их механизмы.
- •Действие на вирионы вирусов различных температур, уфл, кислот, щелочей, спиртов, дезинфектантов, окислителей и восстановителей, жирорастворителей, антибиотиков.
- •Диагноз на основе анализа клинических симптомов, патологоанатомических изменений и эпизоотологических данных.
- •18. Инактивированные вакцины.
- •19. Живые вакцины.
- •Значение вирусов для решения общебиологических проблем.
- •Индикация вирусов в патологическом материале по обнаружению вирионов и вирусных телец-включений.
- •Индикация, выделение и идентификация вирусов.
- •Обнаружение ( индикация) вируса в материале;
- •Иммуноферментный анализ. Достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Использование в вирусологии лабораторных животных. Устройство вивариев, правила техники безопасности при работе с лабораторными животными.
- •Масса животных в разном возрасте
- •Температура тела, пульс и число дыханий у здоровых животных
- •Состав крови некоторых лабораторных животных (по в.Н.Никитину)
- •Использование в вирусологии культур клеток. Типы культур клеток. Получение клеточных культур.
- •Клеточный геном и реализация генетической информации в нормальной клетке.
- •Клеточный и гуморальный противовирусный иммунитет, их взаимодействие.
- •Принципы культивирования вирусов.
- •Методика титрования и расчёта титра вируса в оое и бое, в единицах 50%-го инфекционного действия.
- •Методы уничтожения, инактивации и консервации вирусов.
- •Механизм персистенции вирусов в клетках.
- •Неспецифические факторы противовирусной защиты организма.
- •Окончательный диагноз на основе обнаружения и идентификации вирусов в организме больных животных.
- •Обнаружение ( индикация) вируса в материале;
- •Особенности противовирусного иммунитета.
- •Открытие вирусов и история их изучения.
- •Патогенез вирусных болезней животных.
- •Персистенция вирусов. Роль факторов иммунитета на этапах патогенеза вирусной болезни.
- •Получение патологического материала, его транспортировка.
- •2.1 Получение и обработка патологического материала
- •2.2 Получение патологоанатомического материала
- •2.3 Получение проб для гистологического исследования.
- •2.4 Транспортировка и хранение проб.
- •Понятие о титре вируса. Единицы количества вируса: оое, бое, лд, ид, элд, эид, цпд, гае. Выражение в них титра вирусов.
- •Понятия о гене и геноме вирусов. Вирусная популяция, вирусный штамм, вирусный клон.
- •Правила работы с вируссодержащими материалами.
- •1.1 Техника безопасности и правила работы с вируссодержащим материалом
- •Получение и транспортировка патологического материала для вирусологических исследований.
- •Устройство вирусологической лаборатории.
- •Превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •Принципы диагностики вирусных болезней животных.
- •Природа вирусов, их место и роль в биосфере. Роль вирусов в эволюции жизни на Земле.
- •Вирусы играют эволюционную роль.
- •Пути проникновения вирусов в организм животного. Первичная локализация и циркуляция вируса.
- •Вторичная циркуляция вируса. Механизм повреждающего действия вирусов на клетки.
- •Полимеразная цепная реакция, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Реакция диффузной преципитации в агаровом геле. Достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Реконвалесценция, вирусоносительство и вирусовыделение.
- •Репродукция вирионов вирусов.
- •Реакция иммунной флуоресценции, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Реакция нейтрализации, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Реакция непрямой гемагглютинации, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Роль вирусов в инфекционной патологии животных, растений и человека.
- •Реакция связывания комплемента, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Реакция торможения гемагглютинации, достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
- •Использование в вирусологии реакции гемадсорбции.
- •Серологическая диагностика вирусных болезней по приросту титра антител в парных сыворотках крови.
- •Систематика вирусов. Принцип систематики, ее научная и практическая ценность.
- •Основные критерии таксономической классификации вирусов
- •Специфическая профилактика вирусных болезней животных.
- •Специфические факторы противовирусного иммунитета и их формирование.
- •Структура и химический состав вирионов вирусов.
- •Типы вирусных геномов. Структурные (вирионные) и неструктурные белки вирусов, их свойства и отличия от клеточных белков, их функции.
- •Вирусные геномы. Виды вирусных геномов.
- •Трансляция и образование структурных и неструктурных вирусных белков. Сборка вирионов и их выход из клеток.
- •Титрование вирусов.
- •Ферменты вирионов, липиды и углеводы в составе вирионов.
- •3.1. Белки вирусов
- •3.2. Липиды вирусов
- •3.3. Углеводы вирусов
- •Формы взаимодействия вирионов с клетками.
- •Формы и размеры вирионов. Типы симметрии вирионов и их обусловленность. Нуклеиновые кислоты вирусов, их функции и отличия от клеточных нуклеиновых кислот.
- •Экономический ущерб, наносимый животноводству вирусными болезнями животных.
- •Вирусы гриппа птиц и ньюкаслской болезни и их дифференциация в ртга.
- •Вирус африканской чумы однокопытных.
- •Вирус африканской чумы свиней.
- •Вирус болезни Ауески.
- •Вирус болезни Тешена.
- •Вирус инфекционного бронхита кур.
- •Вирус инфекционного бурсита кур.
- •Вирус контагиозного пустулезного дерматита овец и коз.
- •Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •1. Определение болезни
- •3. Возбудитель болезни
- •4. Эпизоотология
- •5. Патогенез
- •6.Течение и клиническое проявление
- •7. Патологоанатомические признаки
- •8. Диагностика и дифференциальная диагностика
- •9. Иммунитет, специфическая профилактика
- •10. Профилактика
- •11. Лечение
- •12. Меры борьбы
- •Вирусы гриппа.
- •1. Грипп птиц.
- •2. Грипп свиней.
- •3. Грипп лошадей.
- •Вирусы энцефаломиелитов лошадей.
- •Вирус миксоматоза кроликов.
- •Вирус геморрагической болезни кроликов.
- •Прионы и прионные инфекции животных.
- •6.1. Общая характеристика прионов и прионных инфекций
- •6.1. Основные различия нормальной и патогенной форм прионного белка
- •6.2. Прионные инфекции животных
- •6.3. Скрепи
- •6.4. Энцефалопатия норок
- •Медленные вирусные инфекции.
- •Вирус Алеутской болезни норок.
- •Вирус чумы плотоядных.
- •Вирус инфекционной анемии лошадей.
- •Вирус парагриппа-3.
- •Аденовирусы крупного рогатого скота.
- •Вирусы лейкозов.
- •Вирус болезни Марека.
- •Вирусы респираторно-репродуктивного синдрома свиней и парвовирусной инфекции свиней.
- •Парвовирусная инфекция свиней
- •Вирус бешенства.
- •Лабораторная диагностика бешенства.
- •Лабораторная диагностика лейкоза крс.
- •5.6. Число лейкоцитов и лимфоцитов у здорового, подозрительного по заболеванию и больного лейкозом крупного рогатого скота («лейкозный ключ»)
- •Лабораторная диагностика оспы.
- •Лабораторная диагностика ящура.
Иммуноферментный анализ. Достоинства и недостатки реакции и области возможного применения в вирусологии.
Иммуноферментный анализ представляет собой вид лабораторного исследования, в основу которого положена иммунологическая реакция по типу «антиген-антите-ло». На сегодняшний день известно несколько десятков модификаций данного метода исследования.
Своё название иммуноферментный анализ получил благодаря использованию ферментативной метки, которая вводится в один из компонентов иммунологической реакции. При взаимодействии специфического антитела с антигеном происходит активация фермента, и именно количество образованных продуктов цветной (ферментативной) реакции, определяемое по интенсивности их окрашивания, позволяет оценить количество антигенов или антител во взятом для исследования материале. Таким образом, иммуноферментный анализ позволяет провести качественную и количественную диагностику определённой инфекции.
В последнее время популярность иммуноферментного анализа существенно выросла, что объясняется высокой специфичностью и разнообразием используемых тест-систем. Для данного вида исследования в качестве материала используется плазма или сыворотка венозной крови, забор которой производится натощак.
Чаще всего иммуноферментный анализ применяется для выявления в крови антител, которые вырабатываются иммунной системой человека в ответ на попадание в организм антигенов возбудителей различных заболеваний. Однако при помощи данного метода исследования можно выявлять и антигены возбудителей всевозможных инфекции в данной биологической жидкости.
В современной медицине метод иммуноферментного анализа используется для диагностики различных заболеваний вирусной и бактериальной природы, для выявления аутоантител, определения уровня гормонов и для нахождения маркеров онкопатологии.
На сегодняшний день специфичность и чувствительность данного лабораторного метода оценивается как минимум в 90%. Специфичность некоторых современных тест-систем иммуноферментного анализа, в частности тест-систем рекомбинантного типа, стабильно приближается к 100%.
Следует отметить, что выявление методом иммуноферментного анализа антигена возбудителя того или иного заболевания, в отличие от вирусологических и бактериологических методов исследования, не зависит от его жизнеспособности. То есть антигены будут найдены при помощи тест-систем ИФА и в том случае, если возбудитель продолжает свою жизнедеятельность, и тогда, когда в результате лечения или за счёт внутренних резервов организма возбудитель был обезврежен.
Вместе с тем отрицательный результат при выявлении антител к антигенам возбудителя той или иной инфекции не может быть гарантией того, что человек здоров, так как иммунный ответ формируется в течение определённого времени, что и определяет рекомендации проводить иммуноферментный анализ в динамике, как минимум дважды через временной промежуток, составляющий две-три недели.
Нельзя забывать и о том, что возможны ситуации получения ложноотрицательных и ложнопо-ложительных результатов, поскольку выявление иммуноглобулинов свидетельствует о наличии антител к возбудителю заболевания, а не о присутствии в организме самого возбудителя.
Посредством специальных тест-систем иммуноферментного анализа можно выявлять как антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов, так и проводить количественный анализ иммуноглобулинов определённого класса.
Используя тест-системы, позволяющие выявлять иммуноглобулины, относящиеся к различным классам, можно с высокой вероятностью судить о стадии инфекционного процесса, поскольку иммуноглобулины вырабатываются организмом человека в строго предопределённой последовательности.
Иммуноглобулины, относящиеся к классу М, вырабатываются иммунной системой человека раньше всех при инфицировании, но их уровень быстро снижается при элиминации возбудителя. Совершенно иначе ведут себя иммуноглобулины, принадлежащие к классу G. Они вырабатываются значительно позже при инфицировании, но циркулируют в организме человека и после выздоровления.
Особое внимание уделяется в ходе иммуноферментного анализа иммуноглобулину класса А, а также его соотношению с иммуноглобулинами, принадлежащими к классам М и G. Предположить повторное заражение можно при высоких концентрациях иммуноглобулинов А и М, а о переходе острого процесса в хронический свидетельствуют повышенные титры иммуноглобулинов G и А. Таким образом, выявление иммуноглобулинов определённого класса позволяет оценить динамику инфекционного процесса.
Как и любой другой метод лабораторной диагностики, иммуноферментный анализ имеет свои достоинства и недостатки.
Среди неоспоримых преимуществ данного метода диагностики широкий спектр выявляемых с его помощью инфекций, быстрота проведения лабораторного исследования; относительная простота методики; возможность осуществления объективной оценки силы иммунного ответа организма на антигены возбудителя, установление фазы инфекционного процесса, отслеживание динамики иммунного ответа.
Серьёзным недостатком иммуноферментного анализа является определение иммунной реакции человеческого организма на возбудителя инфекционного заболевания, а не выявление собственно самого возбудителя, в результате чего ИФА отнесён к непрямым диагностическим методам.