Специфическая профилактика вирусных гепатитов

Создание эффективных вакцин против гепатитов — важная задача. Активная иммунопрофилактика гепатитов, особенно В и С, позволит не только предотвратить случаи новых заболеваний гепатитами, но и снизить число гепатокарцином.

Вакцина против гепатита А представляет собой очищенную взвесь вирусов, выращенных в культуре перевиваемых клеток, инактивированных формальдегидом и адсорбированных на гидроокиси алюминия. Предназначена для профилактики гепатита А у лиц в возрасте от 18 лет и старше. Вакцинации подлежат лица, которые ранее не болели гепатитом А, но имеют повышенный риск заражения (медицинские работники, воспитатели детских учреждений, туристы, военнослужащие и пр.), а также люди с хроническими заболеваниями печени, у которых гепатит А протекает очень тяжело. Может применяться в регионах с высоким уровнем заболеваемости ГА для массовой иммунизации.

Вакцина индуцирует выработку антител у 95% серонегативных лиц на 2128 сутки после полного курса иммунизации. Поствакцинальный иммунитет длится от 4-х до 10-ти лет.

Для иммунопрофилактики гепатита В разработаны 2 типа вакцин: плазменная и рекомбинантная. Их основой служит поверхностный антиген вируса гепатита В (HBs-Ag). Источником HBs-антигена для плазменных вакцин является сыворотка или плазма лиц, у которых этот антиген циркулирует в крови. Антиген очищают, инактивируют, адсорбируют на гидроокиси алюминия. Плазменная вакцина обладает высокой иммуногенностью и эффективностью. Существенный ее недостаток — риск возможного инфицирования вследствие неполной инактивации вируса.

Современные вакцины против гепатита В — рекомбинантные. Их получают путем создания рекомбинантных микроорганизмов, в геном которых вводится ген, отвечающий за синтез HBs-Ag. Впоследствии полученный антиген адсорбируют на гидроокиси алюминия.

Рекомбинантные вакцины высокоиммуногенны и низкореактогенны, широко используются во всем мире. В соответствии со стратегией ВОЗ в странах с высоким распространением гепатита В должны быть вакцинированы все новорожденные дети, а в странах с низким уровнем инфицирования — преимущественно лица, принадлежащие к группам риска, и дети, родившиеся от матерей вирусоносителей.

В последние годы разработана комбинированная вакцина против гепатитов А и В, а также различные комбинации вакцин против гепатита В с другими широко используемыми детскими вакцинами.

Для пассивной иммунопрофилактики гепатитов А и В используется специфический иммуноглобулин.

Разработана экспериментальная рекомбинантная вакцина против гепатита С, содержащая оболочечные антигены Е₁ и Е₂. Вакцина не предотвращает развитие инфекции, но смягчает острое течение болезни и может предупредить последующее ее усиление.

Вакцина против гепатита D не разработана. Однако применение вакцин против гепатита В предупреждает и развитие гепатита D.

Лабораторная диагностика вич-инфекции

При диагностике ВИЧ-инфекции используется 4 группы методов:

1. Определение наличия вируса, его антигенов или копий РНК в материалах от больного или ВИЧ-инфицированного.

2. Серологическая диагностика, основанная на выявлении специфических антител к поверхностным (gp120 и gp41) и внутренним (p18 и p24) белкам ВИЧ.

3. Выявление патогномоничных (специфических) для ВИЧ-инфекции изменений в иммунной системе.

4. Лабораторная диагностика оппортунистических инфекций (СПИД-ассоциированных заболеваний).

1. Вирусологическая диагностика. Материал для выделения ВИЧ — Т-лимфоциты крови, лейкоциты костного мозга, лимфатические узлы, ткани мозга, слюна, сперма, спинномозговая жидкость, плазма крови. Полученным материалом заражают перевиваемую культуру Т-лимфоцитов (H9). Индикацию ВИЧ в культуре клеток проводят по ЦПД (образование симпластов), а также методами иммунофлюоресценции, электронной микроскопии, по выраженной активности обратной транскриптазы. Современные методы исследования позволяют обнаружить один инфицированный лимфоцит на 1000 клеток.

Выявление вирусных антигенов в инфицированных Т-лимфоцитах осуществляют с помощью моноклональных антител.

В последние годы решающее значение для определения прогноза и тяжести ВИЧ-инфекции имеет определение количества копий РНК ВИЧ в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) — так называемая вирусная нагрузка. Если у пациентов, не получающих терапии, вирусная нагрузка находится ниже предела определения (это менее 5000 копий РНК ВИЧ в 1 мл плазмы), это свидетельствует об отсутствии прогрессирования или о медленном прогрессировании заболевания. Степень заразности при этом минимальная. Высокая вирусная нагрузка (более 10⁵ копий РНК/мл) у пациентов с числом CD4-лимфоцитов менее 300 в 1 мкл всегда свидетельствует о прогрессировании болезни.

2. Серологическая диагностика. В настоящее время получила наибольшее распространение.

Материал для исследования — сыворотка крови.

В серологической диагностике ВИЧ-инфекции на первом этапе используют ИФА со стандартными иммуноферментными диагностическими системами. Метод скрининговый. Принцип метода основан на классическом варианте прямого ИФА. Иммуносорбентом для антигенов ВИЧ являются полистироловые планшеты. В лунки планшет вносят испытуемую сыворотку в разведении и проводят инкубацию. После связывания АГ с АТ планшеты трехкратно отмывают от несвязавшихся белков. После этого в лунки планшет вносят конъюгат — антитела к иммуноглобулинам человека, меченные ферментом. Образование специфического комплекса АГ+АТ выявляют внесением субстрата для фермента (раствор ортофенилендиамина и перекиси водорода). В результате воздействия фермента на субстрат меняется окраска среды пропорционально количеству выявленных в пробе антител. Результаты исследования учитывают на фотометре. Наличие вирусспецифических антител в сыворотке крови в дальнейшем необходимо подтвердить посредством исследования методом иммунного блоттинга.

Иммунный блоттинг — подтверждающий тест, позволяющий выявить и дифференцировать наличие антител к различным белкам ВИЧ. В его основе лежит разделение белков ВИЧ по молекулярной массе методом электрофореза в полиакриламидном геле. В последующем антигены ВИЧ переносят на мембрану из нитроцеллюлозы. Затем нитроцеллюлозные мембраны с антигенами ВИЧ обрабатывают испытуемой сывороткой. При этом вирусспецифические антитела образуют комплекс с конкретным АГ (gp120, gp41, p24, p18). Заключительный этап исследования — выявление комплексов антиген-антитело с различными белками ВИЧ. Для этого в систему добавляют конъюгат — антитела против белков человека, меченные ферментом или радиоизотопной меткой. При этом в местах образования иммунных комплексов фиксируется метка. Таким образом, в сыворотке пациента выявляют (либо не выявляют) вирусспецифические антитела ко всем или к нескольким антигенам ВИЧ.

3. Оценка иммунного статуса. Исследование направлено на выявление:

1. соотношения CD4/CD8 клеток (в норме =2 и >, при СПИДе — 0,5 и <);

2. содержания CD4 клеток (<200 клеток/мл.);

3. наличия лейкопении, тромбоцитопении, лимфопении;

4. повышения концентрации Ig A, Ig G и ЦИК в сыворотке крови;

5. снижения пролиферативного ответа лимфоцитов на Т-клеточные митогены;

6. отсутствия кожной реакции ГЗТ на несколько анамнестических антигенов (состояния анергии).

		Клетки ЦНС										ВИЧ							CD4+ Т-лимфоциты
		энцефалопатия, деменция											нарушение ГИО и КИО												нарушение функции ЕК и CD8+ клеток
																										онкогенез
					оппортунистические инфекции, инвазии, вызванные																					саркома Капоши, лимфома мозга
	вирусами								простейшими						бактериями							грибами								гельминтами
1.Герпес симплекс I и II типа 2.Герпес зостер 3.Цитомегаловирус 4.Вирус Эпштейна- Барр 6.Паповавирусы									1.Пневмоцисты 2.Токсоплазмы 3.Криптоспори- дии 4.Изоспоры						1.Микобактерии 2.Кампилобактерии 3.Сальмонеллы 4.Шигеллы 5.Легионеллы 6.Микоплазмы 7.Актиномицеты 8.Листерии										1.Кандиды 2.Криптококки 3.Аспергиллы 4.Мукоровая плесень 5.Гистоплазмы									Стронгилоидоз

Схема 6. Развитие опухолей, оппортунистических инфекций и инвазий при ВИЧ-инфекции