- •1.1.2.2. Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий
- •1.2. Выявление Legionella pneumophila в объектах окружающей среды
- •2.1. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха
- •1. Общее содержание микроорганизмов в 1 м3 воздуха
- •2. Содержание золотистого стафилококка (s.Aureus) в 1 м3 воздуха
- •3.1. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •II. Прямые санитарно-микробиологические показатели эпидемической опасности почвы — возбудители кишечных инфекций (патогенные энтеробактерии и энтеровирусы).
- •III. Для углубленной оценки санитарного состояния почвы и способности ее к самоочищению исследуют показатели биологической активности почвы.
- •3.1.2. Выявление косвенных показателей
- •3.1.2.1. Определение общих колиформных бактерий (бгкп)
- •3.1.2.2. Определение энтерококков.
- •4.1. Основные методы определения санитарно-показательных микробов в пищевых продуктах:
- •4.1.1. Определение мафам (мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы).
- •4.1.2. Определение бгкп (бактерии группы кишечной палочки).
- •4.1.3. Определение бактерий рода Salmonella.
- •4.1.4. Определение бактерий рода Proteus.
- •4.1.5. Определение коагулазоположительных стафилококков.
- •4.2. Микрофлора молока и молочных продуктов
- •4.3. Исследование кисломолочных продуктов
- •4.4. Микрофлора мяса и мясных продуктов
- •4.4.2. Исследование мяса по СанПин
- •4.4.4. Санитарно-микробиологическое исследование
- •4.5. Санитарно-бактериологическое исследование рыбы
- •4.6. Санитарно-микробиологическое исследование напитков
- •4.6.1. Санитарно-микробиологическое исследование воды для изготовления безалкогольных напитков.
- •4.6.1.1. Определение мафам и бгкп проводят по мук «Вода питьевая».
- •4.6.2. Санитарно -микробиологическое исследование кваса
- •4.6.3. Санитарно-микробиологическое исследование пива
- •4.7. Санитарно-микробиологическое исследование консервов
- •4.7.2. Определение промышленной стерильности консервов:
- •5. Санитарно-микробиологические исследования в лечебно-профилактических организациях (лпо)
- •5.1. Санитарно-микробиологические исследования в стационарах (отделениях) хирургического профиля
- •5.1.1. Плановые исследования:
- •5.2. Санитарно-микробиологические исследования в стационарах (отделениях) акушерского профиля и перинатальных центров
- •5.2.1. В плановом порядке проводят:
- •5.3. Санитарно-гигиенические требования к стоматологическим медицинским организациям
- •5.4. Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и эксплуатации фельдшерско-акушерских пунктов (фап), амбулаторий
- •5.5. Лабораторные исследования объектов окружающей среды в лпо
- •5.5.1. Определение микробиологической чистоты воздуха
- •Раздел 2.1. «Санитарно-микробиологическое исследование воздуха в лпо»
- •5.5.2. Контроль качества дезинфекции объектов больничной среды
- •5.5.3. Контроль качества стерилизации шовного, перевязочного материалов, хирургических инструментов и т.Д.
- •5.5.4. Бактериологический контроль эффективности обработки рук медицинского персонала
- •5.5.5. Микробиологический мониторинг на наличие легионелл в воде
- •Микробиологические показатели безопасности материалов и изделий медицинского назначения1)
4.1. Основные методы определения санитарно-показательных микробов в пищевых продуктах:
4.1.1. Определение мафам (мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы).
По 1 см3 (1 г) исследуемого продукта или по 1 см3 исследуемого продукта в различных разведениях помещают в стерильные чашки Петри и заливают 12-15 см3 расплавленного и остуженного до 45 о С мясо-пептонного агара (МПА). Посевы инкубируют 72 час при 30 оС, после чего просматривают посевы и подсчитывают число выросших колоний на поверхности в глубине агара. Результаты выражают в КОЕ в 1 см3 (1г) продукта.
4.1.2. Определение бгкп (бактерии группы кишечной палочки).
К БГКП относят условно-патогенные бактерии родов Echеrichia, Citrobacter, Enterobacter и Klebsiella. БГКП выявляют двумя методами:
а) Качественный метод. К определенной навеске 1 см3 исследуемого продукта или 1 г исследуемого продукта в различных разведениях засевают в среду Кесслера. Посевы инкубируют 24 час при 37 оС. На следующий день делают высев петлей в 10 см3 среды Кесслера с лактозой и поплавком. Посевы инкубируют 24 час при 37 о С. Далее изучают характер роста. При обнаружении мути и газа в поплавке выдают ответ о выделении БГКП. При отсутствии газа в поплавке проводят дополнительное исследование путем высева на среду Эндо или Мак-Конки. Чашки инкубируют 24 час при 37 оС. Отмечают (при наличии) лактозаположительные колонии, которые отсевают на скошенный МПА. Инкубируют 24 час при 37 оС. Затем готовят мазки и определяют оксидазную активность у культуры. При обнаружении в мазках неспорообразующих грамотрицательных, оксидаза-отрицательных палочек выдают ответ об обнаружении БГКП в определенном объеме. При отсутствии помутнения и газообразования в среде Кесслера, выдают отрицательный ответ.
б) Количественным метод. Навеску продукта или его разведения, объеме 0,1 или 0,2 см3 поверхностно высевают на дифференциально-диагностические среды (VRBL агар, среды Эндо, Мак-Конки). Посевы инкубируют 24 час при 37 оС. Затем подсчитывают количество характерных колоний и производят их высев на скошенный МПА. Посевы инкубируют 24 часа при 37 оС. Из выросших колоний готовят мазки и окрашивают по Граму. При подтверждении наличия БГКП выдают результат об их количестве.
4.1.3. Определение бактерий рода Salmonella.
Бактерии рода Salmonella должны отсутствовать в 25 г (см3). Пробы засевают на забуференную пептонную воду в соотношении 1:9. Инкубируют 24 часа при 37 оС. Затем делают высев по 1 см3 в 2 среды обогащения: RVS (Раппопорта-Вессилиадиса с соей) и Мюллера-Кауфмана тетратионатный (МКТ) бульон либо селенитовый бульон. Среду RVS инкубируют 24 часа при 41 оС, а селенитовый бульон или Мюллера-Кауфмана 24 часа 37 оС. Через 24 часа делают пересев на среды: XLD (ксилоза-лизин декстрозный агар) и Эндо или Левина, Плоскирева. Термостатируют 24 часа при 37 оС и учитывают характер роста (сальмонеллы образуют на средах Эндо, Левина, Плоскирева колонии S-формы бесцветные или розовые, а на XLD агаре — колонии с черным центром и прозрачной перифирической зоной красноватого цвета) и делают отсев на скошенный МПА и инкубируют 24 часа 37 оС. Через 24 часа ставят реакцию агглютинации (РА) на стекле с поливалентными сальмонеллезными сыворотками А, В, С, D и Е. В случае положительной реакции ставят РА с групповыми сыворотками. Одновременно с РА материал засевают на среду Олькеницкого и изучают другие биохимические свойства путем посева на среды Гисса и МПБ с индикаторными бумажками на индол и сероводород. После инкубации (24 часа при 37 оС) определяют биохимические свойства. Сальмонеллы подвижны, не расщепляют лактозу и сахарозу, расщепляют глюкозу, образуют сероводород, не образуют индол. У выделенной чистой культуры бактерий изучают другие биохимические свойства путем посева на среды Гисса и МПБ с индикаторными бумажками на индол и сероводород. Для определения вида (серовара) сальмонелл используют РА с моновалентными О- и Н- сальмонеллезными сыворотками.
Обнаружение микроорганизмов, образующих характерные колонии на средах XLD и Эндо, имеющих характерные морфологические, биохимические и антигенные свойства, указывает на присутствие в исследуемом пищевом продукте сальмонелл.