1. Закрепить теоретические знания по теме «Химия липидов».

2. Провести обнаружение липидов в сыворотке крови.

Исходный уровень знаний и умений.

Учащийся должен знать:

1. Строение, свойства самых биохимически важных представителей класса липидов, их биологическое и клиническое значение.

2. Свойства липидов, лежащих в основе биохимических методов определения.

Учащийся должен уметь:

1. Выполнять качественные реакции на обнаружение липидов в сыворотке крови.

2. Выполнять пробу на глицерин.

Структура занятия.

1. Теоретическая часть:

1. Повторение теоретического материала по теме «Химия липидов».

2. Вводное слово преподавателя.

Роль липидов в организме весьма разнообразна. Одни из них служат формой депонирования (ТАГ) и транспорта (свободные жирные кислоты и связанные жирные кислоты) веществ, при распаде которых высвобождается большое количество энергии, другие – представляют собой важнейшие структурные компоненты клеточных мембран (свободный холестерин, фосфолипиды). Липиды участвуют в процессах терморегуляции, предохранении жизненно важных органов (почек) от механических воздействий (травм), потери белка, в создании эластичности кожных покровов, защите их от избыточного удаления влаги.

Некоторые из липидов являются биологически активными веществами, обладающими свойствами модуляторов гормонального влияния (простагландины) и витаминов (полиненасыщенные жирные кислоты). Липиды способствуют всасыванию жирорастворимых витаминов А, D, Е, К, выступают в роли антиокислителей (витамины А, Е), обусловливают проницаемость клеточных мембран по отношению к ионам и органическим соединениям, служат предшественниками ряда стероидов (половые гормоны, Vit "D", желчные кислоты, гормоны коры надпочечников).

Группу «общих липидов» плазмы составляют нейтральные жиры (ТАГ), фосфолипиды; свободный, эфиросвязанный холестерин; гликолипиды, неэстерифицированные (свободные) жирные кислоты.

Все перечисленные липиды циркулируют в крови в составе липопротеинов. Среди множества существующих методов исследования липидов, есть методы, основанные на свойстве липидов сыворотки крови избирательно окрашиваться Суданом черным (или другим растворителем, проявляющим «сродство» к липидам). Эти способы просты в исполнении, они отличаются плохой воспроизводимостью.

Триацилглицерины в своем составе содержат глицерин, и его содержание проверяют акролеиновой пробой.

2. Указания к занятию:

1. Внимательно изучите инструкцию.

2. Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторных работ.

3. Соблюдать меры предосторожности в работе с центрифугой при приготовлении судана черного Б.

4. При работе с пипетками пользуйтесь резиновой грушей с переходником.

5. Используйте дезраствор для обеззараживания биологического материала.

3. Практическая часть.

1. Лабораторная работа № 1. Обнаружение липидов в сыворотке крови

Принцип метода: Липиды можно открыть реакцией со специальным красителем – Суданом. Образуется розовое окрашивание.

Реактивы: 1) сыворотка крови; 2) 96% этиловый спирт; 3) насыщенный раствор судана черного Б в этиловом спирте (1 г судана + 10 мл этилового спирта, полученный раствор переливают в центрифужную пробирку, центрифугируют 25-30 минут при 3000 об/мин, надосадочный раствор переливают в темную посуду и хранят при комнатной температуре); 4) разбавленный в 2 раза этиловый спирт.