Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
25 - Влияние pH-среды на активность ферментов.doc
Скачиваний:
5
Добавлен:
06.11.2018
Размер:
203.26 Кб
Скачать

2. Указания к занятию:

    1. Подготовить рабочее место.

    1. Соблюдать технику безопасности в работе.

    1. Приготовить необходимые реактивы, раствор слюны согласно предложенной методике.

    1. Использовать в работе резиновые груши с переходником.

    1. Использовать моющие средства для мытья использованной посуды.

3. Практическая часть.

    1. Лабораторная работа № 1. Выявление влияния рН среды на активность ферментов.

ОПЫТ 1: Влияние рН среды на активность ферментов.

ПРИНЦИП: Для амилазы слюны оптимальное значение рН среды – 6,8. В кислой и щелочной среде активность её снижается и расщепление крахмала происходит не полностью, до стадии декстринов, которые с раствором йода дают красно-фиолетовую или красно-бурую окраску.

Реактивы: 1% раствор крахмала; дистиллированная вода; 0,2% раствор НС1; слюна – раствор, разведенный в 10 раз; 1% раствор йода.

Ход определения.

В 8 пронумерованных пробирок наливают по 1 мл дистиллированной воды.

В 1-ю пробирку вносят 1 мл раствора соляной кислоты, перемешивают (рН 5,8).

Во 2-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 1-ой пробирки, перемешивают (рН 6,2).

Во 3-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 2-ой пробирки, перемешивают (рН 6,6).

Во 4-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 3-ой пробирки, перемешивают (рН 6,8).

Во 5-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 4-ой пробирки, перемешивают (рН 7,0).

Во 6-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 5-ой пробирки, перемешивают (рН 7,4).

Во 7-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 6-ой пробирки, перемешивают (рН 7,8).

Во 8-ю пробирку вносят 1 мл смеси из 7-ой пробирки, перемешивают.

После этого в каждую пробирку добавляют по 2 мл крахмала и по 1 мл раствора слюны. Пробирки встряхивают и помещают в термостат на 15 минут при 37°С. Затем через 5 минут из 4-ой пробирки берут каплю смеси и добавляют в заранее приготовленную пробирку с 2 мл воды и каплей 1% раствора йода. Эту реакцию повторяют до тех пор, пока в капельной пробе не будет получено желтое или красно-желтое окрашивание (т.е. произойдет полное расщепление крахмала). После этого во все опытные пробирки прибавляют по 1 капле 1% раствора йода. Содержимое пробирок перемешивают. Наблюдают различное окрашивание смесей в соответствии с глубиной ферментативного гидролиза крахмала. Устанавливают, при каком значении рН произошло наиболее полное расщепление крахмала (оптимум рН).

Приложение № 4.

Закрепление знаний, умений учащихся.

4.1.Самостоятельная работа – проведение опыта.

4.2. Учет результатов. Вывод.

Приложение № 5.

Контроль знаний, умений.