- •1. Формы взаимодействия микро– и макроорганизма: мутуализм, комменсализм, паразитизм. Инфекция, её формы, механизмы передачи.
- •2. Понятие «инфекционный процесс», основные характеристики, условия возникновения.
- •3. Понятие «инфекционная болезнь». Условия и динамика развития, периоды.
- •4. Понятие «патогенность» и «вирулентность» микроорганизмов. Факторы патогенности микроорганизмов.
- •5) Способность синтезировать токсины.
- •5 Экзотоксины. Классификация, свойства, механизмы действия
- •6. Эндотоксины. Состав, свойства, механизм действия.
- •7. Понятие «иммунитет». Виды иммунитета. Иммунная система организма человека, структура.
- •8. Антигены гистосовместимости системы hla, их классификация.
- •10. Противовирусный иммунитет, его особенности и отличия от антибактериального иммунитета.
- •11. Неспецифические факторы защиты организма человека. Гуморальные факторы защиты (комплемент, лизоцим, бета-лизины, интерферон и др.).
- •12. Клеточные факторы защиты. Фагоцитоз, стадии, характеристика. Методы определения фагоцитарной активности, фагоцитарный показатель, индекс фагоцитоза.
- •13. Антигены, свойства. Процессинг антигенов макрофагами и в-лимфоцитами.
- •14. Антитела, их структура, свойства, функции. Нормальные показатели иммуноглобулинов сыворотки крови человека.
- •15.Моноклональные антитела. Гибридомы. Практическое использование.
- •16. Т- и в-лимфоциты, морфологическая и функциональная характеристика. Нормальные показатели периферической крови.
- •17. Макрофаги, их морфологическая и функциональная характеристика, роль в иммунном ответе.
- •18. Гиперчувствительность немедленного типа, природа, механизм проявления, методы диагностики.
- •19. Гиперчувствительность замедленного типа, природа, формы проявления, методы диагностики.
- •20. Иммунодефицитные состояния, классификация. Роль инфекции в развитии иммунодефицитов человека.
- •21. Оценки иммунного статуса организма человека (клинико-лабораторные методы).
- •22. Реакция агглютинации, непрямой гемагглютинации
- •23. Реакция преципитации. Её модификации.
- •24. Реакция связывания комплемента.
- •25. Реакция нейтрализации.
- •26. Иммуноферментный анализ.
- •27. Реакция торможения гемагглютинации.
- •28. Реакция фагоцитоза. Практическое использование реакции фагоцитоза при оценке иммунного статуса.
- •29. Молекулярно-генетические методы обнаружения возбудителей инфекции в организме (днк и рнк зондирование, полимеразная цепная реакция).
- •30. Биопрепараты для создания активного иммунитета. Вакцины, анатоксины. Принципы их получения.
- •31. Биопрепараты для создания пассивного иммунитета. Лечебные сыворотки и иммуноглобулины. Принципы их получения.
- •32. Диагностические биопрепараты. Диагностикумы для серологических реакций. Диагностические сыворотки. Принципы их получения.
- •9. Трансплантационный иммунитет. Методы типирования антигенов гистосовместимости при трансплантации тканей.
25. Реакция нейтрализации.
Идентифицировать вирус по характеру его действия на монослой культуры клеток, которые он разрушает или вызывает в них разного рода структурные изменения, очень трудно, и поэтому прибегают к постановке реакции нейтрализации (РН) вирусов заведомо известными вируснейтрализующими сыворотками. С этой целью полученный от больного вирус накапливают в культуре клеток и различные его разведения смешивают с неразведенной противовирусной сывороткой или, наоборот, постоянную дозу вируса добавляют к различным разведениям иммунной сыворотки. Смеси инкубируют в термостате. После этого смесями вируса и сыворотки заражают культуру клеток и о нейтрализующей силе ее антител судят по отсутствию цитопатического действия на клетки Смесью вирусов и сывороток можно заражать куриные эмбрионы или чувствительных животных. В таких случаях нейтрализующую активность антител определяют по предотвращению развития патологических изменений на хорионаллантоисной оболочке; нейтрализации вирусных гемагглютининов в жидкостях эмбриона, устранению летального действия вируса на животных
Подобным образом с помощью РН идентифицируются вирусы, выделенные из материала больных при заражении им куриных эмбрионов и животных. В таких случаях к вируснейтрализующим сывороткам прибавляют вируссодержащие жидкости эмбрионов и взвеси пораженных органов животных. После определенного времени инкубации смесями инфицируют культуры клеток, куриные эмбрионы и животных.
В серодиагностике вирусных инфекций РН определяют вирус–нейтрализующие антитела в сыворотке больных по известному вирусу. Ставят ее в динамике с парными сыворотками, одну из которых берут в разгаре заболевания, а вторую – спустя 2–3 недели, и по четырехкратному нарастанию титра антител в этой последней подтверждают диагноз.
26. Иммуноферментный анализ.
Метод был разработан в начале 70-х гг независимо друг от друга тремя группами учёных. Метод напоминает РИА, но в его основу положено маркирование Аг или Ат, вступающего в реакцию, ферментом. Взд метки с субстратом обычно сопровождается изменением окраски среды. В настоящее время созданы многочисленные модификации этого метода, но наибольшее распространение получил гетерогенный ИФА на твёрдой фазе (твердофазный). Различают:
ПРЯМОЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА. В этом случае:
сыворотку с Ат инкубируют с Аг, фиксированным на твёрдом субстрате (чаще всего это пластиковая микропланшетка).
Ат, не связавшие Аг, удаляют многократным промыванием.
Вносят меченную ферментом сыворотку к Ат, связавшим Аг.
Определяют ко-во фермента–маркёра, связавшегося с Ат.
КОНКУРЕНТНЫЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА.
Вносят сыворотку. Если в ней есть специфические Ат, то они связываются с Аг, фиксированном на твёрдом субстрате. Если специфических Ат нет, то Аг оказывается не связанным.
При добавлении специфических к фиксированному Аг Антител в первом случае им будет не с чем взаимодействовать (большинство Аг уже связаны) содержание маркёра низкое. Во втором случае специфические Ат будут связываться с Аг и при отмывании они не будут смыватьсявысокое содержание маркёра.
Аналогично м.б. фиксированы АНТИТЕЛА, и различные фирмы выпускают именно планшеты с уже фиксированными Ат.
По сравнению с классическими методами выявления Аг этот метод позволяет непосредственно регистрировать их взаимодействие с Ат, а не вторичные проявления (агглютинацию, преципитацию или гемолиз). Метод очень ЧУВСТВИТЕЛЕН (достаточно концентрации 1нг/мл).
Определяют: Хламидии, клостридии, ВИЧ и др.