- •Общая биотехнология
- •Оглавление
- •Работа 1. Культивирование клеток микроорганизмов с использованием ферментационного комплекса Biostat a plus
- •Работа 2. Определение интенсивности аэрации сульфитным методом
- •Ход анализа Определение объема раствора йода, необходимого для работы
- •Определение сульфитного числа до и после аэрации
- •Расчет сульфитного числа
- •Зависимость скорости поступлений кислорода в раствор сульфита от интенсивности аэрации
- •Определение азота и белка в кормовых дрожжах
- •Работа 3. Определение содержания общего азота (сырого протеина)
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов
- •Работа 4. Определение массовой доли белка по Барнштейну
- •Проведение испытания
- •Работа 5. Определение липидов в кормовых дрожжах
- •Проведение испытания
- •Обработка полученных результатов
- •Техника безопасности при выполнении работы
- •Работа 6. Продукты метаболизма микроорганизмов. Спиртовое брожение
- •Динамика выделения со2в процессе брожения осуществляемого дрожжами
- •Работа 7. Дихроматно-йодометрический метод определения концентрации спирта
- •Проведение испытания
- •Основы микробиологического контроля биотехнологических производств
- •Работа 8. Определение общей бактериальной обсемененности.
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов.
- •Рекомендации по оформлению отчета
- •Правила техники безопасности
- •Список литературы
Определение азота и белка в кормовых дрожжах
Растущие потребности животноводства в сбалансированных по белку кормовых рационах не могут быть удовлетворены традиционными ресурсами, поэтому существенную значимость приобретает изыскание альтернативных источников, в частности получение биомассы микроорганизмов. Преимущества белка, полученного с помощью низших организмов, велики. Эту биомассу можно производить круглогодично на дешевом сырье, в ней содержится большое количество белка (40—85 %). (Для сравнения: содержание белка в продуктах животноводства (%): говядина — 16,5; свинина — 10,2; птица — 18,6; яйца — 12,9; молоко — 3,5.)
По содержанию большинства незаменимых аминокислот (лизин, треонин, триптофан и др.) белок многих дрожжей и бактерий соответствует эталону — белку женского молока, яиц, а количество серосодержащих аминокислот (метионина и цистина) в белке одноклеточных ниже. Состав биомассы микроорганизмов легко поддается технологическому и селекционному контролю, и можно подобрать или создать методами генетической инженерии микроорганизмы, имеющие избыток именно тех аминокислот, которые дефицитны в потребляемых растительных кормах, и таким образом сбалансировать их.
Использование микробного белка позволяет при одном и том же количестве кормового зерна получить в 1,5—2 раза больше продукции животноводства. Затраты на производство такого белка примерно такие же, как на производство растительного белка, в то время как по биологической ценности и составу кормовые препараты из одноклеточных более полноценны.
Азот входит в состав белков, нуклеопротеидов, фосфопротеидов и других соединений, играющих важную роль в жизни живых организмов и растений. По содержанию азота (протеина) в кормах оценивается их питательность. Под общим азотом понимают сумму белкового и небелкового азота.
Основным методом определения азота в органических соединениях является метод Кьельдаля. Этот метод отличается от других аналитических наибольшей точностью и зачастую применяется в качестве эталона при разработке новых методов определения азотсодержащих веществ. Недостаток метода — длительность выполнения анализа. В связи с этим разработано много других менее трудоемких методов, основанных на способности азота и самих белков давать окрашенные продукты реакции со многими соединениями. Однако по точности колориметрические методы уступают методу Кьельдаля.
Метод основан на определении количества общего азота, содержащегося в навеске продукта при озолении органических веществ концентрированной серной кислотой в присутствии катализаторов (сернокислой меди, перекиси водорода, металлического селена, окиси селена, молибдата натрия и др.).
При нагревании кислота разлагается на диоксид серы, воду и активный кислород, который окисляет углерод и водород органических соединений до СО2и воды, а содержащийся в органических соединениях азот отщепляется в виде аммиака.
R CHNH2COOH + H2SO4 → SO2+CO2+H2O+NH3
Газы и вода улетучиваются, а аммиак связывается серной кислотой и остается в растворе: 2NH3+H2SO4=(NH4)2SO4
Образовавшийся сернокислый аммоний при нагревании разлагается щелочью с выделением аммиака (NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+Na2SO4+ 2H2Oи определяется при отгонке в раствор кислоты (серной или борной) известной концентрации. Избыток последней оттитровывают 0,1 н. раствором щелочи по разности между взятым объемом кислоты и объемом щелочи, пошедшей на титрование, вычисляют количество кислоты, связавшее аммиак. 1мл точно 0,1 н. раствора серной кислоты связывает аммиак в количестве, соответствующем 1,4 мг или 0,0014 г азота.