Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Основы биотехнологии методичка.doc
Скачиваний:
104
Добавлен:
13.03.2016
Размер:
292.86 Кб
Скачать

Работа 2. Определение интенсивности аэрации сульфитным методом

Развитие популяции микроорганизмов в аэробном ферментаторе не­возможно без массообмена между всеми тремя фазами, из которых состоит реакционная среда: твердой (микро­организмы), жидкой (питательная среда) и газообраз­ной (аэрирующий воздух). Подвод питательных веществ и кислорода к клетке и отвод от нее продуктов метабо­лизма осуществляются в ходе массообмена между этими тремя фазами. Причем подвод кислорода из-за его ма­лой растворимости и отвод некоторых растворимых га­зообразных метаболитов, например, диоксида углерода, приходится обеспечивать путем не­прерывного барботажа воздухом. Для интенсификации массообменных процессов, как правило, организуется перемешивание реакционной среды, которое нередко сопровождается интенсивным пенообразованием.

Объемный коэффициент массопередачи КобLa) является важнейшей характеристикой культиватора. Величина Коб прежде всего зависит от мощности электродвигате­ля, типа и частоты вращения мешалки, геометрических форм внутренних конструктивных элементов аппарата. Эти параметры можно изменять как при проектирова­нии, так и в ходе процесса. Однако величина Коб зависит и от физико-химических свойств культуральной жидкости — вязкости, поверхностного натяжения и др. Изме­нение этих свойств влияет на Коб вследствие изменения поверхностного коэффициента массоотдачи и площади поверхности абсорбции. Известно, например, что добав­ление к воде 0,1 % уксусной кислоты приводит к умень­шению диаметра барботирующих пузырьков воздуха от 2 до 0,1 мм. Некоторые вещества (спирты, соли) действуют в еще более малых концентрациях.

Физико-химические свойства культуральных жидко­стей в течение цикла культивирования не остаются по­стоянными. Это связано с тем, что происходит выделе­ние продуктов метаболизма, изменяются количество и состав взвешенной твердой фазы, добавляются пеногасители. Известны факты снижения или увеличения Коб в 2—3 раза при культивировании.

Имеющиеся зависимости для расчета Коб являются эмпирическими и содержат различные коэффициенты, определяемые экспериментально.

Методы определения Коб делятся на прямые и косвен­ные. Прямое определение коэффициента массообмена в реальных условиях культивирования на культуральной жидкости, содержащей суспендированные микроорга­низмы, является лучшим способом оценки культиватора. При необходимости сравнения массообменных возможностей аппаратов различных объемов и конструк­ций безотносительно какой-либо конкретной питатель­ной среды и вида микроорганизма удобнее пользоваться косвенными методами, основанными на применении мо­дельных сред.

Одним из методов оценки растворения (абсорбции) кислорода является сульфитный метод, с помощью которого определяется не сам объемный коэффициент абсорбции кислорода, а так называемое сульфитное число Qsоб×Ср, где Ср— равновесная концентрация кислорода в жидкости, находящейся в равновесии с газовой фазой.

Сульфитный метод. В основе этого метода ле­жит реакция окисления сульфита натрия в присутствии катализатора — ионов меди или кобальта:

Избыток остающегося сульфита определяется обрат­ным йодометрическим титрованием или колориметричес­ким путем. Концентрации сульфита применяются от 0,2 н. до 1 н. Скорость химической реакции окисления сульфита значительно выше скорости абсорбции, поэтому общая скорость про­цесса определяется скоростью абсорбции. Определяемый этим методом сульфитный коэффициент (сульфитное число) Qsхарактеризует скорость абсорбции кислорода в данном аппарате. Обычно (колеблется от 0,5 до 5 и редко достигает 10 ммоль О2/(л-мин).Qsопределяется физико-химическими свойствами раствора сульфита и гидродинамическими параметрами системы, поэтому данный коэффициент может быть использован лишь для относительного сравнения массообменных возможностей аппаратов. При переходе к аэрации культуральной жид­кости скорость абсорбции кислорода может быть сов­сем иной.

Поскольку реакция между растворенным кислородом и сульфитом протекает очень быстро и концентрация растворенного кислорода равна нулю, то: Qsоб×Ср

Обычно величина Коб, определенная сульфитным ме­тодом, выше найденной прямыми методами. Кроме то­го, механизм реакции окисления сульфита изучен недо­статочно. Известно лишь то, что эта реакция очень чув­ствительна к катализу и ингибированию. Даже весьма незначительные отличия в качестве сульфита или наличие следов поверхностно-активных веществ могут су­щественно изменить значение Коб. Все это существенно ограничивает возможности применения сульфитного метода для оценки массообменных характеристик куль­тиваторов.

Посуда, оборудование, реактивы

  1. Колбы конические на 500 мл — 2 шт.

  2. Колбы конические на 250 мл. — 2 шт.

  3. Колбы конические на 100 мл — 2 шт.

  4. Часовые стекла — 2 шт.

  5. Бюретка на 50 мл. — 1 шт.

  6. Пипетки Мора на 5 мл — 2 шт.

  7. Тиосульфат натрия 0,1н. раствор.

  8. Крахмал 1 % раствор.

  9. Йод 0,1 н. раствор.

  10. Сульфит натрия 0,8н. раствор с 0,001 М раствором сернокислой меди.