Uchebnik

Добавляют 1% раствор желатины, появляется муть или осадок,

растворяющиеся в избытке желатина (дубильные вещества смешанного типа).

Добавляют 1% раствор хинина хлорида (антипирина), появляется аморфный осадок (дубильные вещества смешанного типа)

Добавляют 4-5 капель 1% раствора квасцов железоаммониевых, появляется черно-синее окрашивание или осадок (гидролизуемые дубильные вещества), черно-зеленое окрашивание или осадок (конденсированные ДВ).

* Эта реакция более специфична для дубильных веществ по сравнению с FeCl3, хотя в обеих реакциях участвуют фенольные фрагменты молекул ДВ.

Добавляют 5 мл смеси из 2 мл кислоты хлороводородной разбавленной 1:1 и 3 мл 40% раствора формальдегида, кипятят с обратным холодильником 30

минут, выпадает осадок (конденсированные дубильные вещества). Осадок отфильтровывают, к фильтрату добавляют 10 капель 1% раствора квасцов железоаммониевых и около 0.2 г кристаллического свинца ацетата, перемешивают, появляется синее или фиолетовое окрашивание (гидролизуемые дубильные вещества).

Добавляют сухой или в растворе нитрозометилуретан, нагревают 5-10 минут на водяной бане, появляется осадок (дубильные вещества пирокатехиновой природы); осадок отфильтровывают, к фильтрату добавляют несколько капель 1% раствора квасцов железоаммониевых и кристаллик натрия ацетата, появляется фиолетовое окрашивание (дубильные вещества пирогалловой группы).

Добавляют 2 мл 10% кислоты уксусной и 1 мл 10% раствора средней соли свинца ацетата, появляется осадок (гидролизуемые дубильные вещества).

Осадок отфильтровывают, добавляют 5 капель 1% раствора квасцов железоаммониевых и 0.1 г свинца ацетата основного, появляется черно-зеленое окрашивание (конденсированные дубильные вещества).

Добавляют несколько кристаллов натрия нитрата и 2 капли 0.1н раствора кислоты хлороводородной, появляется коричневое окрашивание

(гидролизуемые дубильные вещества).

Добавляют 1-3 мл 5% раствора натрия нитрита в 2 % кислоте уксусной, появляется коричневое окрашивание (эллаготанины).

Поскольку, с одной стороны, фенольные гликозиды, указанные выше, и дубильные вещества являются сложными эфирами, а с другой – полифенолами, они дают все реакции названных групп соединений, т.е. наряду с продуктами кислотного, щелочного или ферментативного гидролиза, они образуют метиловые эфиры, ацетаты, комплексы с солями металлов, окрашенные соединения или хелаты с FeCl3, вступают в реакции диазотирования и сочетания.

На этих реакциях основаны и методы химической идентификации их структур. Например, из глюкогаллина или дубильной кислоты (tannic acid) получают глюкозу и галловую кислоту, из китайского танина - глюкозу, галловую, ди-, триили тетрагалловую кислоты. При полном ферментативном

101

гидролизе танназой получают галловую кислоту и глюкозу, при частичном кислотном гидролизе – м-дигалловую кислоту.

Кислотный гидролиз, как правило, проводят 0.2н, 2 или 5% HCl или Н2SO4 при нагревании, при этом, первой разрушается сложноэфирная, а затем другие связи сахарного фрагмента. Например, 1-галлоилглюкоза гидролизуется при кипячении с 1% Н2SO4 в течение 15 мин, для гидролиза дубильного вещества корейского клена требуется 20 часов нагревания с 5% Н2SO4, а для китайского танина 72 часовое нагревание.

Скорость расщепления гексаоксидифеноилглюкоз зависит от места присоединения кислоты к углеводному фрагменту, например, при гидролизе 5% HCl на кипящей водяной бане через 40 минут проходит расщепление 4,6-, а через 2 часа – 3,6-гексаоксидифеноилглюкоз.

Ферментативный гидролиз танназой проводят в воде при 370С в течение часа.

Дубильные вещества гидролизуемого типа успешно разделялись и анализировались методом ВЭЖХ группой японских ученых под руководством Т.Окуда. Ими проведено исследование растительных дубильных экстрактов с использованием различных вариантов состава подвижной и неподвижной фаз. Наиболее удачные результаты получены при работе с колонкой Merck LiChrosorb RP18 с использованием в качестве подвижной фазы смеси: 0.01М метафосфорная кислота - 0.01М дигидрофосфат калия - ацетонитрил (42.5:42.5:15). Подобные результаты на колонке с Девелосилом 60-5 наблюдались при использовании смеси гексан - метиловый спирт – тетрагидрофуран - муравьиная кислота (60:45:15:1) в качестве подвижной фазы и УФ-детектора (280 нм). При обращено-фазном распределении на колонке YMC-pack SIL-60 наиболее четкое разделение достигнуто с использованием подвижной фазы: н-гексан - метиловый спирт – тетрагидрофуран - муравьиная кислота (60:45:15:1), содержащей щавелевую кислоту (500 мг/1.2 л) или н- гексан – этилацетат (2:1) и УФ-детектор (280 нм).

Описано использование колонок с LiChrosorb RP-селект В и с Лихросфером RP18 с УФ-детектором (254 нм) при расходе подвижной фазы 1.2 мл/мин: 0,01М фосфорная кислота – 0.01М дигидрофосфат калия – ацетонитрил

(41:41:18), (4:4:2), (47.5:47.5:5), (44:44:12). При этом отмечено, что дегидро-

гексаоксидифеновая группа в молекуле дегидроэллаготанинов, которая образует в водном растворе равновесную смесь изомерных гидратированных гемиацеталей, дает аддукты в спиртовых растворах. При обращенно-фазной ВЭЖХ эта смесь аддуктов показывала несколько пиков, соответствующих изомерным компонентам. Существование этой аномалии в ВЭЖХ можно устранить, если дегидроэллаготанины вводить в растворителях, отличных от спиртов. Галлотанины, которые имеют свободные аномерные оксигруппы, также показывают мультиплетные сигналы, хотя смесь аномеров сахара обычно дает синглетный пик в ВЭЖХ. Аномеры, в зависимости от числа свободных аномерных гидроксигрупп в молекуле галлотанинов, показывают два или более пиков. Простым методом анализа для таких танинов – является

102

предложено использовать колонку с С18-функциональным сорбентом (5 мкм) и подвижной фазой: вода – ацетонитрил – изопропиловый спирт (85:14:1), содержащей 0.05 моль/л триэтаноламина, при расходе подвижной фазы 1 мл/мин и УФ-детектировании (254 нм).

Дубильные вещества конденсированного типа описаны в главе

«Флавоноиды».

Сердечными гликозидами называется группа природных биологически активных веществ, оказывающих избирательное кардиотоническое действие на сердечную мышцу (дигитоксин, дигоксин, целанид, корельборин, олеандрин, конваллотоксин, цимарин, строфантидины, эризимины и др.). Агликоном этих соединений является циклопентанпергидрофенантрен. Кроме обычных сахаров

– глюкозы, фруктозы, рамнозы - в сердечных гликозидах встречаются специфические дезоксисахара: дигитоксоза и цимароза. Все природные сердечные гликозиды делят на 2 группы: с пятичленным кольцом – карденолиды, с шестичленным – буфадиенолиды:

Сердечные гликозиды также можно классифицировать и по количеству сахарных остатков в углеводной части молекулы (монозиды, биозиды, триозиды и т.д.).

Большинство сердечных гликозидов мало растворимы в этиловом эфире, хлороформе, петролейном эфире и воде, хорошо растворимы в метиловом и этиловом спирте. Увеличение растворимости сердечных гликозидов напрямую связано с длиной углеводной цепи: чем длиннее углеводная цепочка, тем лучше сердечные гликозиды растворяются в воде и в водно-спиртовых смесях, тогда как агликоны сердечных гликозидов лучше растворимы в спиртах.

103

Тритерпеновые, стероидные гликозиды - соединения циклические и с открытой С-цепью.

Гликозиды терпеноидов называют терпеновыми сапонинами, гликозиды стероидов – стероидными сапонинами:

Как правило, тритерпеновые гликозиды нерастворимы в хлороформе, ацетоне, петролейном эфире, растворимы в этиловом и метиловом спиртах. Растворимость сапонинов в воде определяется, в первую очередь, количеством моносахаридных фрагментов и увеличивается с возрастанием числа последних. Гликозиды с 1-4 моносахаридными остатками обычно плохо растворимы в воде. Прибавление этилового эфира или ацетона к спиртовым растворам сапонинов вызывает их осаждение, что используется в качестве метода очистки.

Сапонины, методы выделения, хроматографический анализ

Сапонины делят на 2 группы – нейтральные (стероидный тип) легко растворимы в воде и кислые (тритерпеновые) трудно растворимые в воде, легко

– в растворах щелочей.

Тонизирующее средство - женьшень - Panax ginseng C.A. Mey. - содержит сумму сапонинов, называемых панаксозидами или гинзенозидами 2 типов:

В составе 2-х углеводных цепей, одна из которых находится у С3, может быть от 3 до 6-ти молекул глюкозы, рамнозы, арабинозы и ксилозы.

Панаксозиды относят к гликозидам стероидной структуры, несущим при С17 спирокетальную группировку из семи углеродных атомов, и одновременно к тритерпенам по общему количеству углеродных атомов (30), по количеству и расположению СН3-групп.

104

Для выделения сапонинов суммарный экстракт получают после предварительной обработки сырья петролейным эфиром или четыреххлористым углеродом для разрушения комплексов сапонинов со стеринами.

Методы выделения суммы сапонинов из экстракта зависят от их строения. Гликозиды с небольшим числом моносахаридных остатков (3-4) обычно плохо растворимы в воде и выпадают в осадок при разбавлении спиртовых растворов водой. Полярные сапонины плохо растворимы в метиловом и этиловом спиртах и выпадают в осадок при охлаждении или продолжительном стоянии спиртовых растворов, либо при добавлении спирта к водным и водноспиртовым растворам. Кислые сапонины растворимы в водных растворах щелочей и выпадают в осадок при подкислении. Из спиртовых растворов тритерпеновые сапонины осаждают этиловым эфиром, ацетоном, этилацетатом, а некоторые – бутиловым и изоамиловым спиртами. Из водных растворов сопутствующие малополярные примеси извлекают этиловым эфиром, хлороформом, четыреххлористым углеродом, а тритерпеновые гликозиды - бутиловым или изоамиловым спиртом.

Полученные сапониновые фракции очищают повторным переосаждением, что, однако, не приводит к полной очистке от полярных сопутствующих веществ: неорганических примесей, моно- и олигосахаридов, гликозидов других классов, органических кислот и др. Ряд методов основан на способности сапонинов образовывать нерастворимые в воде или водном спирте соли с гидроксидом бария или ацетатом свинца и комплексы с холестерином, танинами, белками. Соли затем разлагают угольной или серной кислотами; холестериновые комплексы - извлечением холестерина бензолом, толуолом, этиловым эфиром или пиридином; таниновые - кипячением с водной суспензией оксида цинка; белковые - извлечением гликозидов подходящими органическими растворителями. Эта группа методов дает более чистую сумму сапонинов, но не является общей методикой и не гарантирует количественного выделения и отсутствия значительного содержания балластных веществ. Сапонины, образующие коллоидные растворы, очищают от примесей, дающих истинные растворы (моносахариды, минеральные вещества), с помощью диализа и электролиза. Хорошие результаты очистки сапониновых фракций от растительных пигментов и восстанавливающих сахаров получены при гельфильтрации на сефадексах V-25,V-50 и A-25.

Интересна схема выделения сапонинов из соевой муки:

Al2O3

105

Важную роль в химии растительных гликозидов играют хроматографические методы. Гликозиды, содержащие свободные карбоксильные группы, могут быть отделены от сопутствующих веществ, в том числе и от минеральных примесей, с помощью ионообменной хроматографии, а очистку проводят на оксиде алюминия, силикагеле, активированном угле, антрагликозидов – на карбонате магния основном.

Вотличие от других классов природных соединений (аминокислот, углеводов и т.п.), для гликозидов нет универсальных систем элюирования. Для нейтральных гликозидов наиболее подходящими подвижными фазами являются: н-бутанол – этиловый спирт – вода; н-бутанол – уксусная кислота - вода (в различных соотношениях, верхний слой); хлороформ – метиловый спирт – вода (65:35:10) и (14:6:1); хлороформ – метиловый спирт от (4:1) до (19:1); этилацетат – метиловый спирт – вода (81:11:8); хлороформ – этиловый спирт (20:1); хлороформ – ацетон (9:1); толуол – этилацетат (1:1) или н-гексан – этилацетат (1:1). Для обработки хроматограмм можно использовать те же реактивы, что и при проведении цветных реакций на соответствующие агликоны.

Производные олеаноловой кислоты из аралии маньчжурской (аралозиды) и

сахарной свеклы предложено определять методом ВЭТСХ на пластинах «Силуфол», «Армсорб» и «Сорбфил» при температуре 20-250С.

Вкачестве проявителей используют 25% спиртовый раствор кислоты фосфорновольфрамовой (малиновые пятна на белом фоне) и 10% спиртовый раствор кислоты фосфорномолибденовой (темно-синие пятна на желтом фоне).

Сканирование зон проводят денситометром «Shimadzu CS-9000» при длине волны 675 нм. Хроматографирование осуществляют в системах:

I – хлороформ – метанол – вода (30:17:3); II – н-бутанол – этанол – аммиак (7:2:5); III – БУВ 4:1:5 (верхний слой).

Хроматограммы, полученные при сканировании, позволяют определять также соотношение индивидуальных гликозидов в анализируемых образцах.

Качественный анализ сердечных гликозидов возможен с применением метода хроматографии на бумаге, пропитанной формамидом, либо в тонком слое сорбента (тальк, силикагель, кизельгур). В этом случае применение систем бензол – хлороформ (от 9:1 до 3:7), толуол – н-бутанол (от 9:1 до 1:1), этилацетат – бензол – вода (84:16:50), хлороформ – бензол – н-бутанол (78:12:5) или просто хлороформа в качестве подвижной фазы позволяет достичь четкого разделения отдельных групп гликозидов.

Для обнаружения гликозидов на хроматограммах применяют реактивы, вызывающие флуоресценцию или окрашивание. Наиболее широко применяют смесь кислоты трихлоруксусной 25% и 3% раствора хлорамина в этиловом спирте (15:1). В УФ свете производные дигитоксигенина, например, дают четкую золотисто-желтую флуоресценцию; гитоксигенина – голубую; дигоксигенина – стальную.

Стероидные гликозиды корней и корневищ иглицы понтийской и колхидской (4-4.5%) делили распределительной хроматографией на силикагеле

106

с последующим рехроматографированием разнополярными растворителями. Контроль элюатов осуществляли реактивами Санье и Эрлиха.

Для О-гликозидов флавонов используют системы:

этилацетат – метилэтилкетон – муравьиная кислота 5:3:1

метанол – уксусная кислота – вода 18:1:1

н-бутанол – этанол – вода 20:5:11

бутанол-2 – этилацетат – ДМФА 10:6:3

Для С-гликозидов флавонов:

этилацетат – уксусная кислота – вода 10:2:1

этилацетат – метанол 8:2

Основным и надежным методом качественного и количественного анализа

иустановления подлинности гликозидов является метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, хотя к настоящему времени еще не описано ни одной универсальной ВЭЖХ системы для анализа гликозидов. По мнению ряда

авторов, оптимальной может быть признана: Novapak RP18 с подвижной фазой СН3СN-Н2О при градиентном элюировании от 5:95 до 70:30 за 30 мин и использовании УФ детектора (254 нм).

На той же колонке предложено анализировать тритерпеновые гликозиды, используя в качестве подвижных фаз: 0.1М раствор аммония формиата в спирте метиловом 40% с увеличением концентрации формиата в спирте от 0.1 до 1.0М

и4мМ раствор тетра-N-бутиламмония гидросульфата в спирте метиловом 20%,

УФ детектор при 270 нм. Для карденолидов предложены: Lichrosper 100-RP18, подвижная фаза - ацетонитрил - вода (от 3:7 до 6:4 за 30 мин), УФ детектор (230 нм). Элюентом для буфадиенолидов служил водный метанол от 10 до 60% за 40 мин, детектирование проводилось при 280 нм.

Сердечные гликозиды предложено также разделять на колонках с

Lichrospher 100-RP18, и Nucleosil 120-7-С6Н5 и 100-3RP18, используя градиент-

ное элюирование водно-метанольными смесями от 5 до 95% с добавлением 0.1% кислоты трифторуксусной или без таковой, проводя анализ при 220 нм.

Основная трудность при выделении сердечных гликозидов заключается в том, что это крайне лабильные соединения, поэтому малейшее нарушение в температурном режиме приводит к их разрушению.

Экстракцию сердечных гликозидов из растительного сырья, чаще всего, проводят метиловым или этиловым спиртами (70-80%). Полученное извлечение

подвергают очистке от сопутствующих веществ. Для этого, упаренное под вакуумом (500С) спиртовое извлечение подвергают многократной обработке органическими растворителями, чаще всего четыреххлористым углеродом, до полного удаления сопутствующих веществ или применяют сорбционные методы очистки, используя оксид алюминия, нанесенный на стеклянные фильтры.

Разделение суммы сердечных гликозидов проводят на хроматографических колонках, заполненных оксидом алюминия или силикагелем. Для разделения, например, гликозидов наперстянки элюирование проводили

смесью хлороформа с изопропиловым спиртом (3:1). Полученные элюаты выпаривают под вакуумом досуха при 500С, затем проводят перекристаллизацию до получения индивидуально чистых веществ.

107

Вопросы для самоконтроля студентов

1.Классифицируйте гликозиды, укажите источники их нахождения в природе.

2.Сопоставьте основные структурные особенности гликозидов и их конформационные особенности.

3.Опишите строение и свойства фенольных гликозидов.

4.Составьте схему выделения фенольных гликозидов из различных источников.

5.Опишите строение и свойства флороглюцидов.

6.Составьте комплексную схему выделения и хроматографического разделения флороглюцидов.

7.Выявите зависимость дубящих свойств гидролизуемых танинов от особенностей их строения.

8.Составьте схему выделения и хроматографического разделения сапонинов.

9.Сопоставьте взаимосвязь строения и свойств стероидных и сердечных гликозидов.

10.Назовите основные промышленно-важные фенольные гликозиды, флороглюциды, сапонины и гидролизуемые дубильные вещества.

Для идентификации химической природы любых гликозидов 2-3 г

измельченного растительного сырья заливают 30 мл спирта метилового или этилового 70% и настаивают в течение суток, фильтруют, спирт отгоняют под вакуумом. Остаток обрабатывают в делительной воронке углеродом четыреххлористым (хлороформом, хлороформ-спирт изопропиловый 3:1), фильтруют через слой натрия сульфата.

Строго специфических реакций на наличие гликозидов нет, однако комплекс реакций на углеводную часть и основной скелет после гидролиза позволяет провести их идентификацию следующими реакциями:

Реакция Келлер-Килиани. Готовят два раствора: I-ледяная уксусная кислота, содержащая 0.05% железа окисного хлорида или сульфата. IIкислота серная концентрированная, содержащая 0.05% железа окисного хлорида или сульфата. Добавляют сначала 2-3 капли раствора I, а затем по стенкам пробирки 2-3 капли раствора ІІ, на границе раздела появляется бурое окрашивание, затем верхний слой меняет окраску на васильково – синюю

(дезоксисахара, сердечные и фенольные гликозиды).

Реакция Либермана-Бурхарда. Добавляют смесь уксусного ангидрида

вкислоте серной концентрированной (50:1). Через некоторое время развивается окраска от розовой до зеленой и синей (стероидное ядро); красно-бурое окрашивание от добавления смеси указанных реагентов в соотношении 2:1 (тритерпены), зелено-синее кольцо, затем коричнево-красное окрашивание от добавления смеси указанных реагентов 1:1 (фитостерины); устойчивое темно-

зеленое окрашивание (все стерины, имеющие двойную связь в положении 5),

малиновое (ТСХ силикагель) (аралозиды).

108

ТС хроматограмму обрабатывают 25% раствором кислоты трихлор-

уксусной в спирте 96% с добавлением 0.2% хлорамина и нагревают при 1001050С в течение 5 мин. Образуются пятна серо-синего цвета (ланатозиды).

К пробе в хлороформе добавляют 10 капель ангидрида уксусного, 3 капли кислоты серной концентрированной, появляются сменяющие друг друга окраски от бурой до зеленой (фитостерины).

Реакция Розенхейма. К пробе в хлороформе добавляют 90% раствор кислоты трихлоруксусной, появляются сменяющие друг друга окраски от розовой до лиловой и интенсивно синей (стероидное ядро) (выпадает осадок –

белковые комплексы).

Реакция Легаля. Готовят два раствора: I - 1-5% раствор натрия нитропруссида, II - 10% раствор натрия гидроксида. К спиртовому раствору пробы добавляют 1-2 капли раствора I, затем по стенке, не перемешивая, добавляют 1- 2 капли раствора II. На границе растворов появляется постепенно исчезающее красное окрашивание (пятичленное лактонное кольцо; гликозиды ландыша и наперстянки).

Реакция Раймонда. К спиртовому раствору пробы добавляют 1 мл 1% спиртового раствора м-динитробензола и 2 капли раствора натрия гидроксида, появляется постепенно исчезающее красно-фиолетовое окрашивание

(дигитоксин, гликозиды, чувствительность 4-5 мкг).

Добавляют 1 мл 0.05% раствора железа окисного хлорида в кислоте уксусной ледяной, затем по стенке пробирки, не перемешивая, добавляют 1-2 мл кислоты серной концентрированной. На границе раздела появляются бурое окрашивание, а верхний слой постепенно окрашивается в сине-зеленый или синий цвет (сердечные гликозиды, фенольные).

Добавляют 2-3 капли кислоты серной концентрированной, появляется зеленое окрашивание (строфантиновые гликозиды).

Готовят раствор п-диметиламинобензальдегида (1 г п-диметиламино- бензальдегида смачивают 4 каплями воды, затем добавляют 3 мл кислоты серной концентрированной). Добавляют 1 каплю указанного раствора,

появляется яркое окрашивание (гликозиды, терпены различного типа,

фуростаноловые гликозиды), [желтое окрашивание, переходящее в малиновокрасное от добавления 2-3 капель воды (ментол)]*.

Реакция Кедде. Добавляют 1% спиртовый раствор м-динитробензойной кислоты в щелочной среде, появляется различное яркое окрашивание

(гликозиды, терпены различного типа).

Рекция Бальета. Добавляют 1% раствор пикриновой кислоты в щелочной среде, появляется различное по цвету яркое окрашивание (с пятичленным гетерокольцом лактона – красное окрашивание).

Реакция Таттье. Добавляют 2-3 мл щелочного раствора 2,4-динитро- дифенилсульфона, появляется яркое окрашивание (дигитоксин, карденолиды).

Добавляют 2-3 капли насыщенного раствора сурьмы (III) хлорида в спирте метиловом, появляется розово-фиолетовое окрашивание (гликозиды ландыша).

109

Добавляют 1-2 капли 1% раствора ванилина в кислоте серной концентрированной, появляется розово-фиолетовое или пурпурно-красное

окрашивание (терпены с С3-ОН, С3-О-сахар). Оптимальным является 65% раствор кислоты серной (Желтое окрашивание, переходящее в малиновокрасное от добавления 1 мл воды (ментол)*. Тимол эту реакцию не дает!)*

Гидроксамовая проба. Добавляют 1% спиртовый раствор гидроксиламина солянокислого и раствора калия едкого до рН=8, затем несколько капель кислоты хлороводородной, 1-2 капли 1% спиртового раствора железа окисного хлорида, появляется фиолетовое окрашивание (терпены, сложные эфиры,

платифилин):

Добавляют 1 мл 1% раствора железа окисного хлорида и 1 мл 1% калия ферроцианида, появляется темно-зеленое окрашивание, переходящее в темнобурое при добавлении 1-2 мл кислоты азотной концентрированной

(флороглюциды).

Добавляют 2-3 капли реактива Паули по Кутачеку, появляется вишнево – красное окрашивание, переходящее при стоянии в оранжевое

(флороглюциды).

Добавляют 1 мл 10% раствора натрия нитрата и 1 каплю кислоты серной концентрированной, появляется кроваво-красное окрашивание (терпены,

сапонины).

Добавляют 1 мл 3% раствора железа окисного хлорида появляется от серого до фиолетового окрашивание (полифенольные гликозиды; оттенок указывает на расположение фенольных ОН-групп).

Добавляют 1 мл 5% раствора натрия гидроксида, появляется желто-

оранжевое окрашивание (ксантоновые гликозиды), розовое (антрагликозиды).

Добавляют 1 мл 3% спиртового раствора магния ацетата, появляется различное окрашивание, в зависимости от взаимного расположения углевода и фенольного ОН (особенно чувствительна на антрагликозиды).

Реакция на пенообразование. В одну пробирку наливают 5 мл 0.1н

раствора кислоты хлороводородной, в другую – 5 мл 0.1н раствора натрия гидроксида. В обе пробирки добавляют по 2-3 капли исследуемого препарата и интенсивно встряхивают. Если в обеих пробирках образуется пена, равная по объему и стойкости (тритерпеновые сапонины), если в пробирке со щелочью образуется пены больше по объему и стойкости (стероидные сапонины).

Добавляют несколько капель 1 % раствора свинца ацетата, бария гидроксида, магния гидроксида, или солей меди, появляется осадок. Тритерпеновые сапонины осаждаются раствором среднего свинца ацетата, а стероидные – основным свинца ацетатом.*

Реакция Лафона. Добавляют 1 мл кислоты серной концентрированной, 1 мл спирта этилового и 1 каплю 10% раствора железа сернокислого, нагревают, появляется сине-зеленое окрашивание (сапонины).

110