IV. Методические указания студентам по подготовке к занятию

1. Указания по подготовительной части самостоятельной работы

При подготовке используется рекомендованная литература, конспект прослушанных лекций «Введение в учение о тканях. Эпителии. Железы» (в 2-х частях, для стоматологов – одна лекция на ту же тему), образцы рисунков и набор основных гистологических препаратов («Кожа пальца человека», «Роговица», «Мочевой пузырь»).

2. Указания по реализации целевых установок подготовки к занятию

Изучить топографию, происхождение, строение, функцию, регенерацию многослойного плоского неороговевающего эпителия, ороговевающего и переходного, основные гистологические препараты в микроскопе при малом и большом увеличении. Используя иллюстративный материал (атласа, таблиц, образцов рисунков) закрепить полученные знания зарисовкой в альбом изучаемых структур. В переднем эпителии роговицы (рис. 1) обозначить базальный, шиповатый и поверхностный слои многослойного плоского неороговевающего эпителия, в эпидермисе кожи пальца (рис. 2) – базальный, шиповатый, зернистый, блестящий и роговой слои, в переходном эпителии мочевого пузыря (рис. 3) – базальные, промежуточные и покровные клетки, на схеме переходного эпителия (рис. 4) – состояние при нерастянутой и растянутой стенке.

3. Задачи на предстоящее занятие

На занятии надо быть готовым написать программированный контроль по теме «Введение в учение о тканях. Эпителии. Железы», ответить с места или у доски, используя таблицы, на вопросы по изученному материалу, дополнить ответ других студентов, принять участие в дискуссии при устном разборе материала, задать вопросы преподавателю, если требуется разъяснить не до конца понятый материал. На 2-м часе занятия выслушать описание основных гистологических препаратов, осуществить их микроскопирование и выполнить необходимые рисунки в альбоме, для чего иметь набор цветных карандашей.

4. Вопросы и задачи для самоконтроля знаний

Какое происхождение имеют многослойные эпителии?

Какие слои выделяют в многослойном плоском неороговевающем эпителии и каково строение составляющих их клеток?

За счёт какого слоя осуществляется регенерация многослойных эпителиев и каково время их обновления?

Какие слои выделяют в многослойном плоском ороговевающем эпителии и каково их строение?

Какие слои выделяют в переходном эпителии мочевого пузыря и каково строение составляющих их клеток при изменении степени натяжения стенки органа?

V. Учебные материалы

1. Обучающие ситуационные задачи и варианты их решения

Сделаны посевы следующих клеток: в первом флаконе – базального слоя, во втором флаконе – зернистого слоя многослойного плоского ороговевающего эпителия. В каком флаконе будет продолжаться размножение клеток и почему?

Ответ: в первом флаконе, потому что базальные кератиноциты составляют камбий эпидермиса.

Н³-тимидином помечены хромосомы в клетках эктодермы. В каких многослойных эпителиях будет обнаружена метка и где такие эпителии встречаются в организме?

Ответ: многослойные эпителии, относящиеся к кожному типу и имеющие эктодермальное происхождение, выстилают слизистую оболочку мочевого пузыря (переходный эпителий), роговицу, конъюнктиву, передний и задний отделы пищеварительного тракта (многослойный плоский неороговевающий эпителий), кожу (многослойный плоский ороговевающий эпителий).

2. Бланк графического отчёта по практическому занятию

(рисунки в альбоме)

Многослойные эпителии Рис. 1. Роговица. Передний эпителий – многослойный плоский неороговевающий. Окраска гематоксилином и эозином. Рис. 2. Кожа пальца человека. Эпидермис – многослойный плоский ороговевающий эпителий. Окраска гематоксилином и эозином. Рис. 3. Мочевой пузырь. Переходный эпителий. Окраска гематоксилином и эозином. Рис. 4. Схема переходного эпителия при растянутой и нерастянутой стенке мочевого пузыря.
	выполнил
	принял

3. Учебная информация для использования на занятии

Многослойные эпителии, относящиеся к кожному типу, выстилающие слизистую оболочку мочевого пузыря (переходный эпителий), роговицу, конъюнктиву, передний и задний отделы пищеварительного тракта (многослойный плоский неороговевающий эпителий), кожу (многослойный плоский ороговевающий эпителий) имеют эктодермальное происхождение.

В многослойном плоском неороговевающем эпителии выделяют базальный, шиповатый и поверхностный слои.

Базальный слой – камбиальный, обеспечивает обновление переднего эпителия роговицы за 7 суток, слизистой оболочки пищевода – за 35-40 суток. Состоит из расположенных в один ряд базальных клеток призматической формы с закруглённой верхушкой, овальным ядром и базофильной цитоплазмой, содержащей свободные рибосомы и кератиновые тонофиламенты. С базальной мембраной клетки соединяются полудесмосомами, с эпителиоцитами – десмосомами.

Следующий слой состоит из шиповатых клеток, образующих 6-8 рядов в переднем эпителии роговицы и 18-20 рядов в слизистой оболочке пищевода. Шиповатая клетка полигональной формы с округлым ядром. Содержит пучки тонофиламентов (тонофибриллы) и шипики, напоминающие микроворсинки. Верхушки шипиков соседних клеток соединяются десмосомами. Межклеточное пространство заполняет тканевая жидкость и нервные окончания. На границе с базальным слоем в шиповатом располагаются хвостатые клетки. Они полигональной формы и с 1-2 отростками, которые посылают к базальной мембране.

Поверхностный слой состоит из 2-4 рядов плоских клеток, ядра которых богаты гетерохроматином или сморщены. Заканчивая свой жизненный цикл, клетки утрачивают связь с соседними эпителиоцитами и слущиваются.

Многослойный плоский ороговевающий эпителий кожи на ладонной и подошвенной поверхностях образован базальным, шиповатым, зернистым, блестящим и роговым слоями.

Базальный слой – камбиальный, состоит из расположенных в один ряд на базальной мембране базальных кератиноцитов призматической формы с закруглёнными верхушками, одиночных призматической формы длинноотростчатых пигментных клеток (меланоцитов) и короткоотростчатых осязательных клеток. Кератиноциты имеют овальное ядро, базофильно окрашенную цитоплазму, свободные рибосомы и кератиновые тонофиламенты. Соединяются с базальной мембраной полудесмосомами, друг с другом – десмосомами. Клетки обеспечивают обновление эпидермиса в течении 30-90 суток.

Меланоциты (клетки Массона) и осязательные клетки Меркеля нейрального происхожения. Выявляются импрегнацией серебром. Меланоциты имеют округлое ядро, гранулярную ЭПС, комплекс Гольджи и везикулы – меланосомы с аргентаффинной гранулой пигмента меланина, защищающего хромосомный аппарат клеток кожи от УФО. Осязательные клетки со сладчатым ядром и аргентаффинными секреторными гранулами, содержащими серотонин, энкефалин и ВИП, выделение которых вызывает приятное ощущение прикосновения.

Шиповатый слой в комплексе с базальным рассматривается как ростковый, так как часть его кератиноцитов сохраняет способность к делению. Шиповатые клетки располагаются в 4-10 рядов, имеют полигональную форму и округлое центрально расположенное ядро. Более мощный пласт клеток формируется между сосочками и более тонкий – над сосочками, подпирающими базальную мембрану и базальный слой эпидермиса. Кроме шипиков с десмосомами и тонофибрилл для кератиноцитов данного слоя характерны лизосомы и кератиносомы. В шиповатом слое обнаруживаются неэпителиальные дендритные клетки Лангерганса (внутриэпидермальные макрофаги), лимфоциты, свободные нервные окончания.

В зернистом слое начинает проявляться ороговение кератиноцитов, которые приобретают вытянутую полигональную форму и располагаются в 3-4 ряда. Ядра клеток становятся тёмными палочковидноыми, сморщиваются и разрушаются. Пучки тонофиламентов в цитоплазме цементируют крупные базофильно окрашенные гранулы кератогиалина – аморфного продукта лизосомального переваривания органелл. Плазмолемму от воздействия ферментов защищает белок кератолинин. Липопротеиды кератиносом, выделяясь наружу, цементируют клетки.

Блестящий слой – «невидимый» в световой микроскоп, поскольку образован 1-2 рядами безъядерных постклеточных структур уплощённой формы, не содержащих органелл за исключением тонофибрилл и заполненных аморфным материалом элеидином, сильно преломляющим свет. Элеидин – слабооксифильный продукт деградации органелл и кератогиалиновых гранул.

Роговой слой состоит из плоских роговых чешуек – корнеоцитов. Это постклеточные безъядерные структуры содержат роговое вещество (мягкий кератин белковой природы, производный элеидина), образующее плотный матрикс, цементирующий тонофибриллы.

Переходный эпителий состоит из клеток, обратимо изменяющих форму в зависимости от степени растяжения стенки органа, которые объединяются в три слоя.

Базальный слой представлен тёмными и светлыми клетками кубической формы с закруглённой верхушкой, округлым ядром. Тёмные клетки – недифференцированные камбиальные, содержат свободные рибосомы. Время обновления переходного эпителия мочевого пузыря за счёт камбия составляет 30-60 суток. Светлые клетки – эндокринные.

Промежуточный слой состоит из хвостатых клеток овоидной формы, связанных с базальной мембраной узкой цитоплазматической ножкой. Форма тела клеток с округлым ядром может изменяться.

Покрывающий слой включает один ряд крупных полиплоидных или двуядерных зрелых неделящихся клеток, напоминающих зонтик. Они прочно связанны между собой десмосомами, имеют тонофиламенты, осмотически и механически устойчивую апикальную плазмолемму с мощным гликокаликсом и плотными блюдцеобразными белковыми пластинками на внутренней поверхности и «гребнями» между ними. Над десмосомами по периметру располагаются плотные межклеточные контакты. В зависимости от натяжения форма клеток изменяется от куполообразной до плоской.

Описание гистологических препаратов

Роговица. Окраска гематоксилином и эозином. Передний эпителий роговицы – многослойный плоский неороговевающий подразделяется на 3 слоя: базальный, шиповатый и поверхностный. Базальный слой – камбиальный. Состоит из базальных клеток, расположенных в один ряд на гладко контурированной базальной мембране. Эпителиоциты имеют призматическую форму, закруглённую верхушку, овальное апикально расположенное ядро и базофильную цитоплазму. Шиповатый слой состоит из шиповатых и хвостатых клеток, образующих 6-8 рядов. Они полигональной формы с округлым ядром, гетерофильно или оксифильно окрашенной цитоплазмой. Поверхностный слой состоит из 2-4 рядов плоских клеток, заканчивающих жизненный цикл, ядра которых богаты гетерохроматином или сморщены.

Кожа пальца человека. Окраска гематоксилином и эозином. Эпидермис – многослойный плоский ороговевающий эпителий. В коже пальца в нём различают 5 слоёв: базальный, шиповатый, зернистый, блестящий и роговой. Камбиальный базальный слой состоит расположенных в один ряд на складчатой базальной мембране базальных кератиноцитов призматической формы с закруглёнными верхушками, овальным ядром и базофильно окрашенной цитоплазмой. Шиповатые клетки располагаются в 4-10 рядов, имеют полигональную форму и округлое центрально расположенное ядро. Более мощный пласт клеток формируется между сосочками и более тонкий – над сосочками, подпирающими базальную мембрану и базальный слой эпидермиса. Зернистый слой – с начальными проявлениями ороговения кератиноцитов. Клетки вытянутой полигональной формы с гладкой поверхностью располагаются в 3-4 ряда. Ядра тёмные палочковидные (в некоторых – лишь «тень» ядра). Гранулы кератогиалина в цитоплазме окрашиваются базофильно. Блестящий слой образован 1-2 рядами безъядерных слабо оксифильных постклеточных структур уплощённой формы, производных кератиноцитов. Роговой слой состоит из плоских роговых чешуек – полностью ороговевших безъядерных кератиноцитов (корнеоцитов).

Мочевой пузырь. Переходный эпителий. Окраска гематоксилином и эозином. В эпителии слизистой оболочки органа три слоя: базальный, промежуточный и покрывающий. Базальный слой представлен тёмными камбиальными клетками кубической формы с закруглённой верхушкой и светлыми эндокриноцитами конической формы. Ядра клеток округлые. Промежуточный слой состоит из хвостатых клеток, связанных с базальной мембраной узкой цитоплазматической ножкой. Форма тела клеток с округлым ядром овоидная. Покрывающий слой включает один ряд крупных полиплоидных или двуядерных зрелых эпителиоцитов, напоминающих зонтик. Форма клеток промежуточного и покрывающего слоёв определяется степенью натяжения стенки мочевого пузыря.