3 курс / Фармакология / ФАРМАКОЛОГИЯ_ПРЕПАРАТОВ_НА_ОСНОВЕ_ПРИРОДНЫХ_АЛЮМОСИЛИКАТОВ_И_ИХ
.pdfТаблица 35 – Влияние бентонита на биохимические показатели
крови цыплят-бройлеров (M±m; n=6)
|
Контрольная группа |
Опытная группа |
|||
Показатели |
Дни опыта |
Дни опыта |
|||
|
1 |
27 |
1 |
27 |
|
Общий белок, г/л |
29,5±0,5 |
30,3±0,9 |
30,9±0,7 |
35,8±1,3* |
|
Белковые фракции, %: |
45,5±1,1 |
46,2±0,6 |
45,3±0,2 |
50,8±0,4 |
|
Альбумины |
|||||
|
|
|
|
||
α-глобулины |
21,8±0,4 |
19,3±0,5* |
21,7±0,6 |
18,1±0,8* |
|
β-глобулины |
12,7±1,4 |
14,4±0,7 |
11,6±1,0 |
14,9±0,5** |
|
γ-глобулины |
20,0±0,3 |
20,2±0,7 |
21,8±0,5 |
21,2±1,0 |
|
Глюкоза, ммоль/л |
14,8±0,2 |
12,3±0,7* |
14,3±0,3 |
13,8±2,2 |
|
Мочевина, ммоль/л |
3,4±0,07 |
3,5±0,06 |
3,6±0,08 |
3,5±0,76 |
|
Холестерин, ммоль/л |
2,9±0,06 |
2,6±0,11 |
2,7±0,09 |
3,6±5,82* |
|
АсАт, ЕД/л |
201,5±7,7 |
196,8±14,8 |
198,2±3,1 |
203±4,5 |
|
АлАт, ЕД/л |
23,3±0,9 |
29,2±,0,7** |
21,8±1,1 |
14,7±0,5* |
|
Триглицериды, ммоль/л |
0,92±0,01 |
0,49±0,07* |
0,88±0,01 |
0,91±0,15 |
|
Общий билирубин, |
1,4±0,05 |
1,72±0,18 |
1,6±0,08 |
2,0±0,16*** |
|
мкмоль/л |
|||||
|
|
|
|
||
Креатинин, ммоль/л |
25,9±1,4 |
20,1±1,1** |
21,6±0,5 |
19,1±1,6 |
|
Кремний, мкг/л |
98,7±1,7 |
100,2±1,7 |
105,8±2,1 |
129,8±3,6* |
|
Кальций общий, ммоль/л |
2,8±0,07 |
2,7±0,06** |
2,6±0,06 |
3,0±0,09* |
|
Фосфор неорганический, |
2,4±0,03 |
2,3±0,07 |
2,3±0,04 |
2,4±0,05 |
|
ммоль/л |
|||||
|
|
|
|
||
Ca/P |
1,18±0,03 |
1,2±0,02 |
1,13±0,03 |
1,2±0,04 |
|
Цинк, мкг% |
231,1±9,7 |
234,1±14,2* |
177,8±5,4 |
194,6±8,9* |
|
Медь, мкг% |
62,3±1,6 |
54,4±2,8* |
50,3±1,5 |
58,5±2,2* |
|
Магний, ммоль/л |
0,82±0,06 |
0,89±0,02 |
0,81±0,02 |
1,09±0,04* |
Примечание: степень достоверности * –Р ≤ 0,001; ** –Р ≤ 0,01, *** –Р ≤ 0,05
То есть, в условиях применения бентонитов отмечена активизация процессов биологического синтеза белка, и, в первую очередь, его альбуми-
новой фракции. Метаболическая активность алюмосиликатов обусловлена содержанием в них широкого спектра макро- и микроэлементов, в частности,
таких, как Са, Р, Mg, Zn, Cu, которые могут включаться в нуклеиновый об-
мен, предопределяющий дальнейший этап белкового обмена – биосинтез белка, увеличивая, тем самым, объем пластического материала.
171
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Кроме того, бентониты, в силу своих кристаллохимических и адсорб-
ционных особенностей пролонгируют пассаж содержимого кишечника на всем его протяжении, тем самым, способствуя более активному всасыванию питательных веществ из кормовых рационов. Этим, в частности, можно объ-
яснить и более низкие затраты потребляемого корма на килограмм прироста подопытной птицы.
Уровень глобулиновых фракций в обеих группах на протяжении всего пе-
риода наблюдений имел умеренные функциональные колебания и находился в пределах видовой нормы, что свидетельствует о достаточном иммунном статусе.
Использование бентонитов оказало влияние на липидный обмен, в част-
ности, на содержание триглицеридов. И хотя повышение данного показателя к концу исследований у опытных цыплят отмечено на уровне тенденции (на
3,4%), у контрольных аналогов в этот период выявлено существенное сниже-
ние (р ≤ 0,001) концентрации нейтральных жиров – в 1,88 раза от фоновых значений. То есть, в условиях интенсивного роста птицы происходит значи-
тельное расходование энергетических запасов организма, приводящих к сни-
жению в печени запасов нейтральных жиров, а скармливание бентонитов спо-
собствует биосинтезу эндогенных триглицеридов, поступающих с пищей и сохранению их физиологически нормальной концентрации в сыворотке крови.
Уровень глюкозы в обеих группах к концу экспериментального перио-
да имел тенденцию к снижению – на 3,4% (контроль) и 16,9% (опыт) соот-
ветственно, однако это было связано с возрастными изменениями в физиоло-
гическом состоянии цыплят-бройлеров и не выходило за пределы нормаль-
ных значений. Можно просто отметить, что у опытных цыплят интенсифика-
ция обменных процессов проявлялась более выражено, что и отразилось на энергетическом балансе организма птицы.
По содержанию аспартатаминотрансферазы, общего билирубина, креа-
тинина и мочевины значимых изменений между группами установлено не бы-
ло, тогда как, по уровню аланинаминотрансферазы выявлено повышение ак-
172
тивности данного фермента в контрольной группе на 21,9% при одновремен-
ном его снижении в опытной группе на 29,8%. Нормализация активности АлАт у подопытных цыплят может быть обусловлена сорбционной активно-
стью бентонитов, способствующих выведению из организма продуктов мета-
болизма или токсических веществ, попавших с кормами. Тогда как возраста-
ние данного фермента у контрольной птицы может служить одним из призна-
ков усиления регистрируемого цитолитического синдрома, в результате кото-
рого происходит разрушение стенок гепатоцитов и нарушение структуры кле-
точных мембран, приводящие к выведению ферментов в кровяное русло.
Назначение бентонита оказало выраженное положительное влияние на минеральный обмен опытных цыплят-бройлеров. Для активного и продук-
тивного роста костной и хрящевой ткани необходимо введение в организм молодняка птицы оптимально-корректных сочетаний многих микро- и мак-
роэлементов, из которых наиболее значимыми для формирования костной системы являются кальций, фосфор, кремний, цинк и магний.
Кальциевый метаболизм в организме птицы происходит наиболее ин-
тенсивно, в результате чего часто возникают дефицитные состояния по дан-
ному минералу. А поскольку обмен общего кальция напрямую связан с об-
меном неорганического фосфора, нарушения Ca : Р соотношения часто при-
водят к тяжелым расстройствам минерального обмена и возникновению бо-
лезней остеодистрофического характера. В нашем случае, дисбаланс в мак-
роэлементах был связан с повышенным содержанием неорганического фос-
фора (на уровне 2,3–2,4 ммоль/л при верхних значениях нормы 1,8 ммоль/л),
тогда как концентрация общего кальция не достигала средних границ видо-
вой нормы. Однако к концу экспериментального периода у подопытных цыплят уровень общего кальция увеличился (р ≤ 0,001) на 15,3% относитель-
но фоновых значений и на 11,1% относительно интактной птицы, тогда как в контроле произошло снижение данного показателя 3,6%.
173
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
По уровню неорганического фосфора значимых изменений в группах выявлено не было. При этом динамика кремния в сыворотке крови цыплят-
бройлеров имела существенные колебания между опытной и контрольной птицей. В начале исследований его концентрация варьировала в пределах 98-
106 мкг/л. Но уже к 40-му дню уровень кремния у цыплят опытной группы увеличился на 22,7% при высокой степени достоверности (р ≤ 0,001) в отли-
чие от контрольных аналогов, у которых эти изменения были несуществен-
ными (1,5% от фоновых значений).
Применение бентонитов способствовало отложению кремния и каль-
ция в организме птиц и положительно сказалось на развитии костей конечно-
стей опытных цыплят по сравнению с контрольными (фото 1-2).
Фото 1 – Рентгеновские снимки задней конечности контрольного цыпленка
Так, у контрольных цыплят трубчатые кости были более тонкими, менее плотными, кортикальный слой истончен и неровный, костномозговой канал расширен. Вместо обычной ровной узкой полоски просматривается широкое эпиметафизарное просветление. В некоторых случаях отмечались признаки крупнопетлистой костной структуры, спонгиозирование кортикального слоя.
Аморфный кремний, поступивший в пищеварительный тракт опытных цыплят под действием силиказы (фермент, освобождающий кремний из его соединений) становится растворимым, всасывается в двенадцатиперстной
174
кишке и в верхнем отделе тонкого кишечника, и далее, кровотоком разносит-
ся во все органы и ткани тела, в том числе, в костную систему птицы, где ис-
пользуется для формирования основного вещества кости и хряща. Он прини-
мает активное участие и в процессе минерализации костной ткани, физиоло-
гическая роль кремния при этом связана в основном с синтезом гликозами-
ногликанов и коллагена. При этом образуются Si-замещенные фосфаты каль-
ция (Si-ФК), которые обладают более выраженными остеопластическими свойствами по сравнению с обычными фосфатами кальция.
Фото 2 – Рентгеновские снимки задней конечности опытного цыпленка
Если говорить о других минеральных составляющих бентонитовых глин, включающихся в минеральный обмен цыплят-бройлеров, то разница в содержании цинка, меди и магния между группами тоже имела существен-
ные различия. Так, цинк в крови опытных цыплят к концу исследований по-
высился на 9,4%, медь – на 16,3%, магний – на 34,6% соответственно. У ана-
логов контрольной группы показатель цинка оставался на уровне фоновых исследований, а концентрация меди снизилась на 12,7%.
Таким образом, минералы, входящие в состав бентонита Кантемиров-
ского месторождения, проявляют себя как доноры макро- и микроэлементов,
175
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
включаясь, при этом, в окислительно-восстановительные реакции организма в качестве коферментов, что способствует иммобилизации ферментных си-
стем, активизации обменных процессов и более эффективному использова-
нию питательных веществ рациона. В тоже время кремний способствует лучшей минерализации органического костного матрикса, и как следствие,
повышению прочности, непроницаемости и плотности костной ткани птицы.
3.3.2 Оценка детоксикационных свойств природных алюмосиликатов
(бентонита, нонтронита и тиононтрита-S) при экспериментальном
хроническомкормовоммикотоксикозе
Продуктивность и здоровье животных во многом зависят от качества потребляемых кормов, которое в свою очередь определяется степенью их за-
грязнения плесневыми грибами и продуктами их жизнедеятельности (Коже-
мяка Н., Придыбайло Н.,1993; Ахметов Ф.Г., Иванов А.В., Тремасов М.Я. 2001). Зонами повышенного токсического риска являются южные районы России, согласно данным исследований Краснодарского ВНИИ биологиче-
ской защиты растений, за последние 10-15 лет объем корма, пораженного ми-
котоксинами зерна пшеницы, увеличился в 20 раз. Наиболее часто в загряз-
ненном микотоксинами зерне обнаруживают зеараленон в количестве от 0,13
до 1,2 мг/кг, ДОН (деоксиниваленол) до 0,47 мг/кг, охратоксин А до 27,5 мг/кг и др. (Дорофеева С., 2003; Корочкин О.Л., Монастырский О.А., 2001).
Исследование по изучению детоксикационных свойств природных алюмосиликатных минералов и препаратов на их основе при эксперимен-
тальном хроническом кормовом микотоксикозе было проведено на лабора-
торных животных.
Предварительно была смоделирована клиническая картина хроническо-
го сочетанного (ассоциативного) микотоксикоза и изучены симптомы инток-
сикации, а также проведена оценка влияния микотоксинов на воспроизводи-
176
тельную функцию крыс и полученное от них потомство, исследованы основ-
ные показатели крови и патологанатомические изменения органов и тканей лабораторных животных.
Для моделирования хронического кормового микотоксикоза было сформировано 2 группы крыс-аналогов с массой тела 80-120 г (опытная и контрольная, n=50). В течение 21-го дня опытным животным скармливали корм, намеренно подвергшийся плесневению в естественных условиях с це-
лью накопления в нем микотоксинов.
Проведенный микологический, токсико-биологический и иммунофер-
ментный анализ корма (по ГОСТ 13586.3-83) установил наличие в нем спор грибов Fusarium sp., Mucor sp., Penicillium sp., а также микотоксины – фумо-
низин В1, охратоксин А, Т-2 токсин, зеараленон, суммарное содержание ко-
торых превышало максимально допустимые уровни, на основании чего корм был отнесен к разряду токсичных (таблица 36).
Крысам контрольной группы скармливали доброкачественный корм. В
течение всего опытного периода за животными осуществляли клинический контроль, учитывая общее состояние, изменения массы тела, реакцию на внешние раздражители, патологоанатомические изменения органов и тканей.
Таблица 36 – Результаты микологического анализа пораженного корма
Микологический анализ
Виды грибов |
Количество спор грибов |
Fusarium sp. |
25.000 |
Mukor sp. |
12.000 |
Penicillum sp. |
20.000 |
Общее количество спор в 1 г. корма |
57.000 |
Концентрация микотоксинов |
|
Наименование показателя |
Содержание, мг/кг |
Зеараленон |
3,6 |
Охратоксин А |
0,2 |
Фумонизин В1 |
6,2 |
177
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Первые признаки интоксикации у опытных крыс стали проявляться на
5-7 день: крысы становились пугливыми, с повышенной возбудимостью, ап-
петит снижен, шерстный покров был взъерошенный и без блеска, у живот-
ных возрастала жажда, к концу эксперимента опытные крысы заметно отста-
вали в росте (таблица 37), шерстный покров тусклый с участками аллопеции.
В ходе анализа динамики массы тела крыс установлено снижение сред-
несуточного прироста опытных животных относительно контрольных анало-
гов на 20,5 %. При этом средние значения массы тела крыс опытной группы были ниже показателей животных контрольной на 5,2 г.
Таблица 37 – Динамика массы тела крыс при скармливании корма,
пораженного микотоксинами и спорами грибов (n=50)
|
Масса тела в |
Масса тела в |
Средне- |
В процентах |
|
Группы |
начале |
конце опыта, |
суточный |
к контролю, |
|
|
опыта, г |
г |
прирост, г |
% |
|
Опытная, |
103,8±2,33 |
124,2±2,94 |
0,97±0,04* |
79,5 |
|
токсичный корм |
|||||
|
|
|
|
||
Контрольная, добро- |
106,1±2,38 |
131,7±3,12 |
1,22±0,03 |
100 |
|
качественный корм |
|||||
|
|
|
|
||
Примечание: степень достоверности: * – Р≤0,05 |
|
|
Скармливание контаминированного корма оказало неблагоприятное влия-
ние на морфо-биохимические показатели крови опытных крыс (таблица 38).
Отмечено снижение общего белка (на 19,2%), глюкозы (на 17,8%), хо-
лестерина (на 22,5%) и триглицеридов (на 18,5%). Неблагоприятное влияние микотоксинов на функцию печени подтверждало повышение активности трансаминаз, которая значительно (по аспартатаминотрансферазе на 61,4%,
по аланинаминотрансферазе – на 40,2%) превышала таковые показатели у контрольных животных.
Микотоксины оказывали негативное влияние процессы эритро- и гемо-
поэза, о чем свидетельствовало снижение у крыс опытной группы содержа-
ния гемоглобина (на 11,2%) и количества эритроцитов (на 14,7%).
178
Таблица 38 – Влияние скармливания зараженного микотоксинами корма на
морфо-биохимические показатели крови крыс (М±m, n=6)
|
Группы животных |
||
|
|
|
|
Показатели |
Контрольная, |
Опытная, |
|
доброкачественный |
|||
|
токсичный корм |
||
|
корм |
||
|
|
||
|
|
|
|
RBC (Эритроциты), 1012/л |
6,33±0,31 |
5,4±0,23*** |
|
WBC (Лейкоциты), 109/л |
8,07±0,29 |
9,8±0,57** |
|
HGB (Гемоглобин), г/л |
127,32±4,25 |
113,0±3,74*** |
|
|
|
|
|
Общий белок, г/л |
79,93±2,94 |
64,6±4,33** |
|
|
|
|
|
АсАТ, ЕД/л |
93,33±3,06 |
150,67±6,41* |
|
|
|
|
|
АлАТ, ЕД/л |
69,67±6,13 |
97,67±3,47* |
|
|
|
|
|
Щелочная фосфатаза, ЕД/л |
547,33±21,84 |
621,67±13,07 |
|
|
|
|
|
Глюкоза, ммоль/л |
8,07±0,63 |
6,63±0,42 |
|
|
|
|
|
Мочевина, ммоль/л |
7,57±0,47 |
8,37±0,31 |
|
|
|
|
|
Креатинин, мкмоль/л |
25,3±1,1 |
28,3±1,15 |
|
|
|
|
|
Холестерин, ммоль/л |
2,27±0,14 |
1,76±0,05* |
|
|
|
|
|
Триглицериды, ммоль/л |
0,54±0,03 |
0,44±0,03*** |
|
|
|
|
Примечание: * – степень достоверности Р ≤ 0,001; ** –Р ≤ 0,01; *** –Р ≤ 0,05
Длительное скармливание токсичного корма оказало негативное влия-
ние на процессы оплодотворения и онтогенеза самок крыс. Так, к концу экс-
периментального периода в опытной группе животных у трех крыс родилось по 1-2 крысенка, 2 из них были мертворожденными, остальные крысята (3)
оказались нежизнеспособными и в течение 2-х дней погибли.
По истечении срока наблюдения из каждой группы животных (опытной и контрольной) из эксперимента выводили по три крысы, которых подверга-
ли эвтаназии методом усыпления эфиром (с соблюдением принципов биоэ-
тики) для учета патологоанатомических изменений внутренних органов.
При проведении патоморфологических исследований у опытных крыс был выявлен ряд изменений. При внешнем осмотре установлен цианоз види-
мых слизистых оболочек, шерстный покров взъерошен, тусклый.
179
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
При патологоанатомическом вскрытии обнаруживалось геморрагиче-
ское воспаление слизистой желудка, тонкого и толстого отделов кишечника,
кишечник местами вздут, легкие отечны, полнокровны. Печень увеличена в размерах, дряблая, темно-красного цвета, местами просматриваются серова-
того цвета участки некроза, желчный пузырь переполнен.
Сердце несколько увеличено, с очагами микронекроза и кровоизлия-
ний, мышца сердца дряблая (рисунок 25). Почки увеличены, розово-серого цвета, у самок вульва отечна, семенники увеличены в размерах.
Рисунок 25 – Ткань сердца (опытная группа), кровоизлияние
(окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)
При гистологическом исследовании наиболее характерные изменения были обнаружены в тканях печени: в гепатоцитах уменьшено количество гликогена, в цитоплазме отмечалась зернистая и жировая дистрофия (рису-
нок 26), вакуолизация гепатоцитов, пролиферация желчных протоков. В пе-
ченочных дольках нарушено радиальное расположение балок из-за округле-
ния гепатоцитов.
В почках – зернистая и жировая дистрофия эпителия извитых каналь-
цев, пролиферация, начальная стадия некроза (рисунок 27). В сердце измене-
ния поперечной исчерченности волокон. В селезенке истощение лимфоид-
180