- •Введение.
- •1Этиологическая структура внебольничных пневмоний
- •1.1Полученные результаты
- •Распределение результатов обследования больных внебольничной пневмонией на монкультуру и ассоциации основных возбудителей
- •Распределение основных возбудителей внебольничных пневмоний, выделенных у больных в монокультуре и в ассоциации в группах больных первого и второго годов службы.
- •2Микробиологическая диагностика основных возбудителей внебольничной пневмонии
- •2.1Основные возбудители: краткая микробиологическая характеристика и клиническая значимость
- •2.2Забор материала
- •2.2.1Мокрота.
- •2.3Микроскопия нативного материала
- •2.3.1Бактериоскопическая диагностика
- •2.4Культуральная диагностика
- •2.4.1Среды, оптимальные для культивирования
- •2.4.1.2Среды, пригодные для культивирования s.Pyogenes.
- •2.4.1.3Среды, пригодные для культивирования h.Influenzae
- •2.4.1.3.1Шоколадный агар для выделения и идентификации h.Influenzae
- •2.4.1.3.2Шоколадный бульон
- •2.4.1.3.3Двухфазная среда для посева крови и спинномозговой жидкости
- •2.4.1.3.4Нтм агар
- •2.4.1.4Среды, пригодные для культивирования m. Сatarrhalis
- •2.4.2Идентификация выделенных возбудителей
- •2.4.2.2.1Идентификация Haemophilus influenzae
- •7.Тест на определение o-нитрофенил-бета--d-галактопиранозидазы (onpg, бета-галактозидазы)
- •8.Тест на продукцию цитохромоксидазы
- •10. Идентификация h.Influenzae с использованием X и V факторов
- •2.4.2.2.2Биотипирование h.Influenzae.
- •Биотипирование h.Influenzae
- •3Серологическая диагностика и серотипирование
- •Серотипирование выделенных штаммов пневмококка основными групповыми сыворотками (%)
- •4Резистентность к антибактериальным препаратам основных возбудителей внебольничных пневмоний
- •4.3Полученные результаты
- •Чувствительность к антибиотикам среди выделенных штаммов пневмококка, выделенных от больных
- •Частота выделения штаммов, резистентных к антибактериальным препаратам
- •5Атипичные возбудители пневмоний
- •5.1Методы диагностики пневмоний , вызванных атипичными возбудителями
- •Лабораторная диагностика инфекций, вызванных м.Pneumoniae
- •5.1.1Среды, применяемые для культуральной диагностики атипичных возбудителей внебольничных пневмоний
- •Йодометрический метод определения пенициллиназной активности микроорганизмов в бульоне.
2.4.2.2.2Биотипирование h.Influenzae.
М. Килиан (M. Kilian), изучавший таксономию рода Haemophilus, предложил использовать ряд биохимических тестов для биотипирования H.influenzae. На основании тестов на продукцию индола, уреазную и орнитиндекарбоксилазную активность выделяют 8 биотипов H.influenzae (табл. 5).
Биотипирование гемофильной палочки имеет большое эпидемиологическое значение. Показано, что различные биотипы имеют связь с определенными типами инфекций. Например, по данным ряда исследований, подавляющее количество менингитов вызываются биотипом I (93,1%), тогда как на биотипы II и IV приходится соответственно 4,6 и 2,3%. Большинство штаммов Hib принадлежит к биотипу I, а нетипируемые штаммы – к биотипам II и III.
Таблица 5
Биотипирование h.Influenzae
|
* Орнитиндекарбоксилаза.
В ряде исследований отмечена также ассоциация биотипов II и III с конъюнктивитом. Биотип IV чаще вызывает инфекции в акушерской и гинекологической практике, перинатальные и неонатальные инфекционные заболевания.
2.4.2.3Moraxella catarrhalis
При бактериоскопии окрашенных мазков обнаружение грамотрицательных кокков (часто парных, иногда с образованием тетрад) является ориентировочным маркером M.catarrhalis, поскольку "сапрофитные" нейссерии, нередко контаминирующие мокроту, имеют сходную морфологию. Посевы осуществляют на кровяной или шоколадный агар, и чашки инкубируют при 35°С в обычных условиях или в атмосфере с содержанием углекислого газа 5–7%. Идентификацию проводят по ключевым признакам в общепринятых тестах (см. таблицу) или с помощью коммерческих биохимических панелей (Gonochek-II, quardFERM+, NEISSERIA-KWIK, HNID Panel, Neisseria/Ha-emophylus Identification Card). Дополнительно используют тест с нитроцефином для определения продукции моракселлами бета-лактамаз.
Таблица 6
Дифференциальные признаки родов семейства Neisseriaceae
Признаки |
Neisseria spp. |
Moraxella |
Acinetobacter spp. |
Kingella spp. |
Oligella spp. |
|
Moraxella spp. |
Branchamella spp. |
|||||
Кокки1 |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
Палочки1 |
+2 |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
Оксидаза |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
Каталаза |
+3 |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
Метаболизм глюкозы4 |
Ф |
И |
И |
О или И |
Ф |
И |
Редукция нитратов |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
Примечание. 1Для дифференциации истинных кокков от кокковидных форм используют следующий тест [8]: на засеянную культурой поверхность агара накладывают диск с пенициллином (10 ед); через 18-24 ч инкубации готовят окрашенный мазок из культуры, выросшей на границе зоны задержки роста, и микроскопируют. Под действием субингибирующих концентраций пенициллина кокковидные формы преобразуются в удлиненные палочковидные и нитевидные клетки, а истинные кокки сохраняют свою форму. 2 Только N.elongata. 3 Кроме N.elongata. 4 Ф - ферментация; О - окисление; И - инертны. |