Zhuk_ON_i_dr_Sanitarnaia_i meditsinskaia mikrobiologiia

Санитарная и медицинская микробиология

Омелянского подразумеваеся, что на поверхности агара в чашке Петри с площадью 100 см2 за 5 мин из воздуха оседает такое количество микробов, которое находится в его 10 л.

Аспирационный метод более точный по сравнению с предыдущим и используется для исследования как воздуха помещений, так и атмосферного воздуха.

Для определения общей бактериальной обсемененности воздуха закрытых помещений используют две чашки Петри с мясопептонным агаром и пропускают через аппарат по 100 л воздуха. После подращивания посевов в течение 48 ч при температуре 37°С подсчитывают количество выросших колоний на обеих чашках, вычисляют среднее арифметическое и делают пересчет на количество микробов в 1 м3 воздуха.

При определении санитарно-показательных бактерий используют две чашки Петри с 3—5% кровяным агаром (определение - и -гемолитических стрептококков), а также две чашки Петри с молочно-желточно-солевой средой (обнаружение золотистых стафилококков). П этом через аппарат пропускают по 250 л воздуха. Через сутки под ащивания в термостате и еще одни сутки сохранения при комнатной температу е п оизводят макро- и микроскопическое исследование колоний, определяют пат генность бактерий по общепринятым тестам.

Состав микрофлоры воздуха оценивают с учетом спорообразующих анаэробов. С этой целью посев воздуха в объеме 200—300 л производят на чашку с железосульф тной средой (среда Вильсона — Блера) и заливают ее 15 мл расплавленн го хлажденного до 45°С мя опептонного агара для создания анаэробных усл вий. П сле суток подращивания в термостате подсчитывают

Аспирационный метод. Основан на принудительном оседании микроорганизмов на поверхность плотной питательной среды или в улавливающую жидкость. Для этой цели используются аппарат Кротова, бактериоуловитель Речменского, прибор ПОВ-1 и др.

Санитарная и медицинская микробиология

Определение стафилококков

Обнаружение патогенных стафилококков в воздухе закрытых помещений имеет санитарно-показательное значение и свидетельствует об эпидемическом неблагополучии. Отбор проб проводят с помощью аппарата Кротова в количестве 250 л воздуха на 2 чашки Петри с молочно-солевым агаром и на чашку с кровяным агаром. Посевы инкубируют при 37°С 48 ч. Из подозрительных на стафилококк колоний выделяют чистую культуру на скошенном агаре. После 24 ч инкубации при 37° проверяют плазмокоагулирующую активность культуры.

Определение стрептококков

Отбор проб воздуха при исследовании на наличие α- и β- гемолитических стрептококков проводят аппаратом Кротова на чашках Петри с кровяным агаром. Исследуют 250 л воздуха. Посевы выдерживают в термостате 24 ч, а затем еще 48 ч при комнатной температуре. Подсчет количества выросших колоний проводят на 1 м3 с последующ м контрольным микроскопированием и выборочным пересевом колоний на к овяной агар ли сахарный бульон.

Задание 2. Учесть результаты исследования воздуха на общую обсемененность микробами, п дсчи ать число колоний, выросших на чашках с мясопептонным агаром, определи ь количество микробов в 1 м воздуха. Произвести микроскоп ческое сследование колоний, выросших на кровяном и молочно-желточно-солевом агарах, определить количество золотистых стафилококков и стрептококков в 1 м3 воздуха.

Материалы и б руд вание: Посевы, деланные тудентами на занятии 1; аппарат для счета колоний.

Методические указания к выполн нию работы. Пояснение к работе и таблицу см. в занятии 1 (задание 1). Р зультаты записать в таблицу.

бактерии группы протея, стрептококки и стафилококки) и методы их выявления.

5. Количественные показатели санитарного состояния среды: микробное число, титр, индекс.

6. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха.

7. Микрофлора почвы, методы микробиологического исследования.

8. Санитарно-показательные микроорганизмы почвы.

Санитарная и медицинская микробиология

Тема 11 ОСОБЕННОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОБНОЙ

ОБСЕМЕНЕННОСТИ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ

(6 часов)

Санитарно-микробиологическое исследование пищевых продуктов проводится в плановом порядке или по эпидемическим и эпизоотологическим показаниям.

В плановом порядке проводятся исследования на: 1) общее микробное обсеменение; 2) обнаружение санитарно-показательных бактерий, например, БГКП и энтерококков, а также иногда обнаружение патогенных микроорганизмов.

По эпидемическим показаниям исследования проводятся на обнаружение патогенных микроорганизмов — возбуд телей пищевых отравлений микробной этиологии.

Задание 1 Определить общую мик обную обсемененность молока,

сделать посев из разведении пр дукта на мясопептонный агар.

Материалы и оборудование. Пр бирка с молоком или мороженым пробирки со стерильной водой по 9 мл, пипе ки на 1—2 мл, стерильные чашки Петри, пробирки с мясопептонным агаром по 10 мл, в дяная баня, термометр.

Методические указан я к выполнению работы. Общее микробное обсеменение пищевого продукта определяется путем высева из 10-кратных разведении продукта на мясопептонный агар, последующего подращивания при температуре 37°С перерасчета по выросшим колониям количества мезофильных микр б в — аэробов и факультативных анаэробов на 1 г продукта. Х д ределения сводит я к приготовлению разведении пробы продукта в соотношении 1:10, 1:100, 1:1000 и высеву по 1 мл из каждого разв д ния в чашки Петри, которые заливают 10 мл расплавленного и охлажд нного (до 45°С) мяс пептонного агара. Посевы инкубируют 48 ч при темп ратуре 37° С. Результаты записать в таблицу 12.

Таблица 12 – Определение микр бного числа пастеризованного молока

Задание 2 Определить коли-титр молока (I этап): посеять исследуемый продукт в пробирки со средой Кесслера.

Материалы и оборудование. Пробирка с молоком, пробирка с молоком, разведенным в 10 раз, 6 пробирок со средой Кесслера по 5 мл, пипетки на 1-2 мл.

Санитарная и медицинская микробиология

Методические указания к выполнению работы. Для определения коли-

титра молока и молочных продуктов используют посевы различных объемов или развода ний проб продукта в среды Кесслера (в ряде случае используют среду Хейфеца). БГКП при росте на среде Кесслера расщепляют глюкозу, о чем судят по образованию газа в поплавке, при росте на среде Хейфеца происходит исходит изменение цвета из красно-фиолетового на желтый впоследствии - до салатово-зеленого в результате появления кислых продуктов. Результаты записать в таблицу 13.

Таблица 13 – Определение коли-титра пастеризованного молока

* Знаком + отмечают п мутнение и образование газа в среде Кесслера.

Методические указания к выполнению работы. Молоко, сливки,

пахту, простоквашу, ряженку, к фир зас вают по 1 мл в 3 пробирки со средой Кессл ра и о 1 мл из разведения 1:10 (0,1 мл продукта) также в 3 пробирки со средой К ссл ра. Наличие в среде Кесслера генцианового фиолетового препятству т росту мол чнокис ых бактерий. Посевы выдерживают сутки при температуре 43°С.

Задание 3. Провести исследование продуктов из рыбы на коли-титр: изучить колонии, выросшие на среде Эндо, из характерных колоний сделать

дать заключение.

Материалы и оборудование.

Посевы на среде Эндо, сделанные студентами на занятии 4, среда Симонса, Кеслера, жидкая среда с глюкозой.

Методические указания к выполнению работы.

При отсутствии роста колоний БГКП на среде Эндо считается, что молоко практически не загрязнено; коли-титр более 3,0. При росте на среде Эндо красных с металлическим блеском колоний готовят мазки и окрашивают их по Граму. При обнаружении в мазках грамотрицательных палочковидных бактерии проводится дополнительное исследование: пересев колоний на жидкую среду с глюкозой (вторая бродильная проба) и подращивание при 43°С

Санитарная и медицинская микробиология

в течение суток. Одновременно делают посев и на цитратную среду Симонса, инкубируют сутки при 37°С.

Показателем фекального загрязнения служат грамотрицательные палочки, имеющие характерный рост на среде Кесслера, Эндо и жидкой среде с глюкозой, способные вызывать брожение среды Кесслера и жидкой среды с глюкозой при 43°С и не дающие роста на среде Симонса (цитратотрицательные кишечные палочки).

Полученные результаты записывают в таблицу 13.

Задание 4. Провести бактериоскопическое исследование сметаны и кефира: приготовить мазки, окрасить метиленовым синим, микроскопировать, зарисовать.

Материалы и оборудование. Пробирки со сметаной и кефиром, предметные стекла, флакон с метиленовым с н м.

Методические указания к выполнен ю работы. Общее микробное обсеменение не определяют в кисломолочных продуктах — твороге, сметане, кефире и других, содержащих специфическую микрофлору (молочнокислые стрептококки, ацидофильные пал чки). В этих продуктах определяют микробный пейзаж мол чнокисл й флоры бактериоскопическим исследованием неразведенных пр дукт в, окрашенных метиленовым синим. Присутствие молочной плесени, дрожжей и отсутствие молочнокислых стрептококков указывает на неудовлетворительное приготовление, нарушение технологии или неправ льное хранение продукта. Исключение составляет кефир и кумыс, где обя ательно при ут твуют в поле зрения 2—5 дрожжевых клеток, поск льку эти продукты — результат комбинированного брожения — молочнокисл го и спирт вого.

Оценку качества м лока и молочных продуктов следует давать согласно следующим бактериологическим нормативам (таблица 14).

Таблица 14 – Ориентир в чные санитарно-бактериологические нормативы для молока молочных пр дуктов

Санитарная и медицинская микробиология

Санитарная и медицинская микробиология

Основная литература

1.Айзман, Р. И. Основы медицинских знаний и здорового образа жизни: учебное пособие / Р. И. Айзман. - Новосибирск: Сибирское университетское издательство, 2009. - 214 с.

2.Жмакин, А. И. Общая микробиология. Иммунология. Медицинская бактериология. Вирусология: рабочая тетрадь для студентов факультета иностранных учащихся с русским языком обучения / А. И. Жмакин, М. В. Горецкая; Министерство здравоохранения Республики Беларусь, Учреждение образования "Гродненский государственный медицинский университет ",

Республики Беларусь, Белорусск й государственный медицинский университет, Кафедра микробиологии, ви усологии и иммунологии. - 8-е изд. - Минск: БГМУ, 2015. - 63 с. К ничев, А. С. Основные термины молекулярной

биологии: учебное пособие / А. С. К ничев, Г. А. Севастьянова. - М.: Колос,

ÏолесÃÓ заведений / М. Н. Мисюк. - 2-е изд., испр. и доп. - М.: ЮРАЙТ, 2012. - 431 с.

2006. - 188 с.

4. Клиническая, эп дем ологическая и санитарная микробиология:

практикум / Т. А. Канашн кова [и др.]; Министерство здравоохранения

Республики Беларусь, Белору кий государственный медицинский

университет, Кафедра микробиологии, виру ологии и иммунологии . - 9-е изд. - Минск: БГМУ, 2016. - 63 с.

5. Мурадова, Е. О. Микробиология: конспект лекций / Е. О. Мурадова, К. В. Ткач нко. - М. : Эксмо, 2007. - 336 .Белясова, Н. А. Биохимия и

мол кулярная биологи: / Н. А. Бе ясова. - Минск: Книжный дом, 2004. - 416 с 3.

Алб ртс, Б. Молекулярная би гия к етки. 2-е изд. В 3-х т. Т. 2 / Пер. с англ. /

Б. Албертс, Д. Брей, Дж. Льюис, М. Рэфф, К. Робертс, Дж. Уотсон. ‒ М.: Мир,

7.Практикум по микробиологии: учебное пособие / ред. А. И. Нетрусов.

-М.: Академия, 2005. - 608 с.

8.Глазко, В. И. Толковый словарь терминов по общей и молекулярной биологии, общей и прикладной генетике, селекции, ДНК-технологии и биоинформатике. В двух томах: словарь. Т. 1. А-О / В. И. Глазко, Г. В. Глазко. -

М.: Медкнига, 2008. - 530 с.

Дополнительная литература

8.Актуальные проблемы современной медицины и фармации 2015:

Санитарная и медицинская микробиология

программа 69-й Научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием, 15-17 апреля 2015 г. / Министерство здравоохранения Республики Беларусь, Учреждение образования "Белорусский государственный медицинский университет", Студенческое научное общество.

-Минск: БГМУ, 2015. - 152 с.

9.Клиническая, эпидемиологическая и санитарная микробиология: практикум / Т. А. Канашникова [и др.]; Министерство здравоохранения Республики Беларусь, Белорусский государственный медицинский университет, Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии. - 9-е изд. - Минск: БГМУ, 2016. - 63 с.

10.Медицинская микробиология, вирусология, иммунология:

университет, Кафедра микробиологии, в русолог и и иммунологии. - 2-е изд.,

практикум / Т. А. Канашникова [и др.]; Министерство здравоохранения Республики Беларусь, Бел русский государственный медицинский

университет, Кафедра микроби л гии, вирусологии и иммунологии. - 9-е изд., - Минск: БГМУ, 2016.ÏолесÃÓ- 120 с.

12. Медицинская м кробиология, вирусология, иммунология:

практикум / Т. А. Канашн кова [и др.]; Министерство здравоохранения

Республики Беларусь, Белору кий государственный медицинский

университет, Кафедра микробиологии, виру ологии и иммунологии. - Минск :

БГМУ, 2015. - 136 с.

13. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология:

практикум / Т. А. Канашникова [и др.]; Министерство здравоохранения

Республики Беларусь, Бе орусский государственный медицинский

унив рсит т, Кафедра микр би гии, вирусологии и иммунологии . - 7-е изд.,

- Минск: БГМУ, 2015. - 91 .

14. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: практикум / Т. А. Канашникова [ др.] ; Министерство здравоохранения

университет, Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии . - 8-е изд., испр. - Минск: БГМУ, 2015. - 120 с.

15.Микробиология с основами иммунологии: практикум для фармацевтического факультета / Т. А. Канашникова [и др.].; Министерство здравоохранения Республики Беларусь, Белорусский государственный медицинский университет, Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии . - 2-е изд., испр. - Минск: БГМУ, 2015. - 104 с.

16.Молекулярные основы вакцинопрофилактики чумы / С. В. Дентовская [и др.] // МОЛЕКУЛЯРНАЯ ГЕНЕТИКА МИКРОБИОЛОГИЯ И ВИРУСОЛОГИЯ: Научно-теоретический журнал. - 2013.

17.Современные молекулярно-генетические методы, используемые для

Санитарная и медицинская микробиология

этиологической диагностики сепсиса/ С. Н. Гаврилов [и др.] // ЖУРНАЛ МИКРОБИОЛОГИИ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И ИММУНОБИОЛОГИИ: Научнопрактический журнал. - 2016. - N 2. - С. 91-99 .

18. Сутин, И. А. Медицинская микробиология / И. А. Сутин, Г. Р. Финн, Л. Н. Зеленская. - 3-е изд., испр. и доп. - М.: Медгиз, 1958. - 380 с.

Вопросы к экзамену по дисциплине «Санитарная и медицинская и микробиология»

для специальности 1-31 01 01 Микробиология

1.Предмет, цели и задачи медицинской микробиологии, ее место в системе

17.Роль макроорганизма в развитии инфекционного процесса. Влияние факторов внешней среды на резистентность макроорганизма.

18.Противоинфекционный иммунитет.

19.Иммунопатология. Аллергия.

20.Искусственный иммунитет как основная мера профилактики.

21.Вакцины, принципы их приготовления и классификация.

22.Возможности использования вакцин для терапии.

23.Профилактические и лечебные сыворотки, использование сывороток для диагностики инфекционных заболеваний.

характерные для представителей следующих родов бактерий: Bordetella, Haemophilus.

36.Морфологические, культуральные, антигенные и патогенные свойства, основные симптомы, лечение и профилактика вызываемых заболеваний, характерные для представителей следующих родов бактерий:

Corynebacterium, Mycobacterium.

37.Значение состояния окружающей среды для распространения инфекционных заболеваний.

38.Методы оценки микробиологического загрязнения среды патогенами.

39.Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах.