Zhuk_ON_i_dr_Sanitarnaia_i meditsinskaia mikrobiologiia

Санитарная и медицинская микробиология

дыхательных путей, проявляющиеся приступами судорожного кашля. Клинически почти идентичные, но вызываются разными видами Bordetella'. В. pertussis и В. parapertussis.

Материалом для исследования служат мокрота и кровь.

Диагноз коклюша и паракоклюша в первые дни болезни подтверждается выделением чистых культур и идентификацией их с помощью диагностических агглютинирующих сывороток, а спустя две недели от начала заболевания, когда в мокроте бордетеллы не обнаруживаются, - постановкой РА и РСК.

Бактериологический метод. При наличии кашля мокрота засевается на селективные для бордетелл картофельно-глицериновый кровяной или казеиново-угольный (КУА) агары, разлитые в чашки Петри.

пенициллином, подносят на несколько секунд ко рту кашляющего ребенка. При

Метод "кашлевых пластинок". При его применении открытую чашку ПетриÐепозиторисо средой, орошенной для подавленияйсопутствующей микрофлоры

отсутствии кашля среды засевают тампоном, которым отбирают отделяемое

слизистой оболочки задне-глоточного п ост анства. Тампон вводят через рот,

реже - через носовые ходы. Выращивают бо детелл в термостате, желательно в

эксикаторе. Рост коклюшных б рдетелл начинается через 2-5 суток. Типичные

колонии бактерий коклюша нап минают маленькие капельки ртути, имеют вязкую сметанообрачнуюÏолесÃÓконсис енцию. Мало чем отличаются от них колонии паракоклюшных бактер й, ко орые, как правило, растут быстрее и несколько

больше в размерах. Из колоний делают мазки. При наличии в них грамотрицательных, ово дных мелких палочек ставят реакцию агглютинации

на стекле с к клюшн й и паракоклюшной ыворотками, разведенными 1:10. Затем выделяют чистую культуру и ид нтифицируют ее по ряду признаков.

12. Bacillus

Сибирская язва - острая зоонозная инфекция, проявляющаяся

образовани м кожн го карбунку а или возникновением тяжелой

геморрагической пневм нии, диареи и сепсиса. Вызывается Bacillus anthracis.

В зависимости от клинической формы сибирско язвы исследуют содержимое

сибиреязвенного карбункула, мокроту, испражнения, а при подозрении на сепсис - кровь.

Диагноз сибирской язвы подтверждается обнаружением в материале больных грамположительных стрептобаиилл, окруженных капсулой, при обработке флюоресцирующей сывороткой - ободком свечения и положительной реакцией на антраксин. Для определения зараженности сырья (кожи, меха) и мяса животных ставится реакция термокольцепреципитации

Асколи, позволяющая выявить в них даже следы сибиреязвенного антигена. Бактериоскопическое исследование. Для обнаружения сибиреязвенной

бациллы мазки делают из содержимого карбункула, мокроты и крови. После фиксации их окрашивают по Граму, Пешкову и Книге для того, чтобы выявить не только грамположительные цепи бактерий, но и споры, а главное, капсулы как характерный морфологический признак возбудителя сибирской язвы,

Полесский государственный университет Страница 111

Санитарная и медицинская микробиология

который позволяет дифференцировать возбудителя сибирской язвы от бескапсульных сибиреязвенноподобных сапрофитов (В. megaterium, В. cereusvar. mycoides и В. subtilis), широко обсеменяклцих внешнюю среду.

Выделяя чистую культуру сибиреязвенных бацилл, на каждом этапе ее идентификации проводят все ту же дифференциацию с сапрофитическими формами бацилл.

13. Clostridium

Ботулизм - очень тяжелая острая пищевая токсикоинфекция, протекающая с поражением центральной и вегетативной нервной системы.

Возбудителем является Clostridium botulinum.

У больных берут рвотные массы, промывные воды желудка, кровь, мочу, испражнения, при наличии - остатки пищевых продуктов, напитки, воду и пр.

выдерживают в термостате при 30-35 °С в течение 30 мин, затем каждую из них по 1,5 мл внутрибрюшинно вводят двум белым мышам. Морских свинок

разведенный наполовину 0,85 % изотониче ким раствором натрия хлорида. Ботулизм ра вивается у животных, зараженных нативным нагретым

материалом и его смесью негомологичными сыворотками по отношению к содержащемуся в нем т ксину. Не забол вают те, которые получили прогретый мат риал го смесь, нейтра изованную антитоксинами.

У мыш ботулизм прояв яется общей слабостью, парезом конечностей, запад ни м мышц жив та, п яв ением "осиной тапии". У морских свинок наблюдается резкое расслабление мускулатуры, обнаруживается симптом "спины": положенные на спину, они не могут перевернуться и принять обычное

бактериологическое исследование для подтверждения диагноза излишне. И только в редких случаях, при стертом течении болезни, могут исследоваться гной, кусочки ткани, вырезанные из раны, и кровь на наличие в ней экзотоксина, так как возбудитель столбняка инвазивностью не обладает.

Анаэробная инфекция - это раневая инфекция, сопровождающаяся тяжелой интоксикацией, массивным отеком и омертвением поврежденных мышечной и соединительной тканей (гангрена), часто сплошь пронизанных

Полесский государственный университет Страница 112

Санитарная и медицинская микробиология

пузырьками газа (в прошлом "газовая гангрена").

Анаэробная инфекция вызывается одним или ассоциацией двух-трех видов токсигенных спорообразующих анаэробных бактерий рода Clostridium, расщепляющих углеводы (гликоген) с газообразованием (С. perfringens, С. novyi, С. septicum) или способностью расщеплять ткани (С. histolyticum). Вследствие этого она является полиэтиологическим, или полимикробным, заболеванием. Развитие истинных возбудителей в ране потенцируют близкие им по морфологии и культуральным свойствам, но нетоксигенные анаэробные сапрофитические клостридии, стафилококки, стрептококки, эшерихии, протей и другие гноеродные бактерииаэробы, понижающие окислительновосстановительный потенциал и вызывающие некроз поврежденной ткани.

Симптоматика анаэробной инфекции настолько специфична, что

ÐепозиторийКлинический ÏолесÃÓдиагноз туберкулеза подтверждается обнаружением в мазках из патологических материалов больного, окрашенных по ЦилюНельсену, ярко-красных (рубиновых) палочек. У детей раннего возраста большое диагностическое значение имеет положительная аллергическая реакция Манту. Культуру микобактерий от больных туберкулезом выделяют главным образом для определения лекарственной резистентности и разработки

правильный диагноз ставится на основании клинической картины заболевания. В затруднительных случаях исследуют гной, а после туалета раны - сукровицу, отечную жидкость из пузырей, кусочки некротизированных мышц, прилегающих к здоровой ткани. Обна ужен е в мазках грамположительных крупных палочек (изредка - нитей) с эндоспорами, обрубленными или

закругленными концами, бессистемно азб осанных, попарно расположенных

друг к другу под углом, в длину или короткими цепочками, может свидетельствовать о наличии в ране оксигенных клостридий.

14. Mycobacterium

Туберкулез - хроническое инфекционное заболевание, при котором

поражаются легкие другие внутренние органы, твердая мозговая оболочка,

патог нных микобактерий: Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium bovis.

Мат риалом для микробио огического исследования в зависимости от локализации процесса служат м крота, гной, моча, спинномозговая жидкость,

испражнения.

индивидуальной схемы этиотропного лечения.

Лепра (проказа) - хроническое инфекционное заболевание с образованием на коже узлов (лепроматозная форма) или пятен с измененной чувствительностью и пигментацией (туберкулоидная форма). Вызывается лепра

Mycobacterium leprae.

Основной метод микробиологической диагностики лепры - бактериоскопия соскобов слизистой оболочки носа и кожных узлов после предварительного среза над ними эпидермиса. Мазки окрашивают по Цилю-

Полесский государственный университет Страница 113

Санитарная и медицинская микробиология

Нельсену, однако в связи с меньшей кислотоустойчивостью микобактерий лепры по сравнению с микобактериями туберкулеза обесцвечивают их 0,5 % раствором серной кислоты.

Микобактерий лепры располагаются в основном внутриклеточно в виде скоплений красных палочек, коккобацилл и шаров. Внеклеточно группируются в виде пачек-сигар.

15. Proteus

Proteus - постоянные обитатели кишечника человека, многих видов позвоночных и беспозвоночных животных, встречаются в почве, сточных водах и гниющих органических субстратах. Протеи вызывают инфекции

иммунотерапииÐепозгнойнÏолесÃÓиторийв спалительных заболеваний и осложнений, вызванных протеем. Вакцину применяют для взрослых подкожно.

мочевыводящих путей, сепсис у больных с иммунодефицитами.

Прямые палочки размерами 1-3 х 0,4-0,8 мкм, иногда выглядят в виде нитей или кокков, обладают подвижностью за счет жгутиков (перитрихи), факультативные анаэробы, хемоорганотрофы, имеют дыхательный и ферментативный метаболизм. Обладают каталазной активностью, сбраживают углеводы с образованием кисл ты и газа, разжижают желатин, выделяют

сероводород, гидролизуют мочевину, в сстанавливают нитраты.

Протеи определяют по харак ерн му роящемуся, ползучему росту на плотных питательных средах, когда они образуют концентрические кольца по

периферии колонии. Ч тые куль уры идентифицируют на виды по свойствам на дифференциально-д агност ческих средах. В отличие от других

энтеробактерий протеи де аминируют фенилаланин. Можно использовать фаготипирование пр тейным фагом.

Нес ецифическая профилактика - общесанитарные мероприятия. Для

16. Corynebacterium

В род коринебактерий входят десятки патогенных и непатогенных бактерий, имеющих определенную роль в патологии человека, животных, растений.

С. diphtheriae - возбудители дифтерии; С. xerosis - сапрофиты; С. cistitidis вызывают образование камней в мочевыводящих путях, циститы, пиелонефриты; С. minutissimum вызывают септицемии, абсцессы мозга, остеомиелиты; С. ulcerans вызывает дифтериеподобные поражения - фарингиты, реже поражения кожи; С. pseudodiphthericum могут встречаться в носоглоточной слизи здоровых людей, не принося вреда, но, попадая в кровь, могут быть причиной сепсиса.

Наибольшую роль в патологии играют С. diphtheriae. Заболевание

Полесский государственный университет Страница 114

Санитарная и медицинская микробиология

известно очень давно, еще в 1 веке до н.э. сирийский врач Аратей охарактеризовал его как «злокачественные язвы на миндалинах, ведущие к удушью».

Дифтерия - острое инфекционное заболевание, вызываемое токсигенными коринебактериями. Характеризуется образованием фибринозных пленок у входных ворот и интоксикацией, приводящей к токсическим поражениям сердечно-сосудистой, нервной и других систем и органов.

Культуральные свойства - факультативные анаэробы, метаболизм окислительноферментативный. На кровяном и сывороточном агарах через 1820 часов образуются крошковидные колонии кремового цвета, напоминающие «булыжную мостовую».

свойствамÐепозиторс использованиемÏолесÃÓспецифическихиймонорецепторных сывороток.

17. Haemophilus

Гемофильные бактерии относятся к семе ству Pasteurellaceae, роду

Haemophilus, который включает 16 в дов, среди них есть сапрофиты и патогенные микроорганизмы.

Наибольшую роль в пат л гии иг ает Н. influenzae, вызывающий воспалительные процессы дыхательных путей, менингиты, бронхиты, и Н. ducreyi - возбудитель мягк го шанкра. Н. aprophilus, Н. paraprophilus

вызывают эндокардиты.

Являются мелк ми коккобак ериями, выражен полиморфизм, имеют капсулу, не обра уют спор, не имеют жгутиков, по Граму окрашиваются отрицательно. Факультативные анаэробы, прихотливы к питательным средам.

Санитарная и медицинская микробиология

Модуль 5 (М-17)

ОСНОВЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

(1 час)

1.Основы профилактики и терапии инфекционных болезней: вакцины

исыворотки, химиотерапевтические средства.

1.Основы профилактики и терапии инфекционных болезней: вакцины и сыворотки, химиотерапевтические средства.

них – на активный и пассивный и, в свою очередь, активный делится на стерильный и нестерильный.

Искусственный активный иммунитет еще называют поствакцинальным и он вырабатывается после введения вакцин или анатоксинов.

патогенных бактерийÏолесÃÓ. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной ос ы человека, в кач стве которой используется непатогенный для

Вакцина — медицинский препарат, предназначенный для создания

иммунитета к инфекц онным болезням.

Классификации вакц н:

1.Живые вакц ны - препараты, действующим началом в которых

челов ка вирус ос ы коров.

2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры пат генных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечѐнные из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своѐм составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адьюванты.

Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

Корпускулярные вакцины – содержащие в своем составе протективный антиген

3.Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип получения – токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде превращают в нетоксичную, но сохранившую свою антигенную специфичность

Полесский государственный университет Страница 116

Санитарная и медицинская микробиология

форму путем воздействия 0.4% формальдегида при 37t в течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют адьюванты.

4.Синтетические вакцины. Молекулы эпитопов сами по себе не обладают высокой иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти молекулы сшиваются с полимерным крупномолекулярным безвредным веществом, иногда добавляют адьюванты.

5.Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько разнородных антигенов.

Способы приготовления.

Инактивированные (убитые, корпускулярные или молекулярные)

вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечѐнные из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащ е в своѐм составе проективные

ÐепозиторийЖивые вакциныÏолесÃÓ- препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но

(гликопротеинов, ЛПС, белков) п именяют т ихлоруксусную кислоту, фенол, ферменты, изоэлектрическое саждение.

Их получают путем выращивания патогенных бактерий и вирусов на искусственных питательных средах, инактивируют, выделяют антигенные комплексы, очищают, конс ру руют в виде жидкого или лиофильного

препарата.

Преимуществом данного типа вакцин является относительная простота получения (не требуется длительного изучения и выделения штаммов). К недостаткам же тн сятся низкая иммуног нность, потребность в трехкратном

непродолжит л н.

В настоящее время применяются следующие убитые вакцины: брюшнотифозная, обогащенная Vi антигеном; холерная вакцина, коклюшная

вакцина

сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Аттенуация (ослабление) возможна путѐм воздействия на штамм

химических (мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие общие протективные антигены с патогенными для человека микробами. Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекмбинантных штаммов, несущих протективные антигены

Полесский государственный университет Страница 117

Санитарная и медицинская микробиология

патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины, бактерии получают путѐм выращивания на искусственных питательных средах, культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило, добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию.

Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

В процессе культивирования природных патогенных микробов можно

получить протективный антиген, синтезируемый этими бактериями токсин затем превращается в анатоксин, сохраняющий специфическую антигенность и иммуногенность. Анатоксины являются одним из видов молекулярных вакцин.

неÐепозиторийиспользуются. ÏолесÃÓ Антитоксические сыворотки имеют антитела – антитоксины. Принцип

Анатоксины – препараты, полученные з бактериальных экзотоксинов,

полностью лишенные своих токсическ х свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Получение: токс генные бактерии выращивают на жидких средах, фильтруют с помощью бакте иальных фильтров для удаления микробных тел, к фильтрату д бавляют 0,4% формалина и выдерживают в термостате при 30-40t на 4 недели до полного исчезновения токсических

используются, т. к. содержат большое количество балластных веществ, неблагоприятно влияющ х на организм. Анатоксины подвергаю физической и

действия: нейтрализация токсина. Получают путем гипериммунизации лошадей. По окончании курса иммунизации берут 10 мл крови и проверяют с помощью реакции флоккуляции, каков уровень антител - антитоксинов. При достаточном титре сыворотки проводят кровопускание (6-8 литров) в стерильный сосуд. Кровопусканиеповторить через 2-3 дня.

К приготовленной сыворотке добавляют 0.75 хлороформа и 0,5% фенола. За единицу силы антитоксической сыворотки принята антитоксическая

единица (АЕ), которая имеет различное определениедля разных сывороток. Например, за АЕ противодифтерийной сыворотки принято наименьшee

количество иммунной сыворотки, которое нейтрализует 1000 IE дифтерийного токсина для морской свинки весом 250 грамм. Титр антитоксической

Полесский государственный университет Страница 118

Санитарная и медицинская микробиология

сыворотки - содержание АЕ в 1 мл. Антитоксические сыворотки

1.Противоботулиновая моновалентная сыворотка (чаще А тип).

2.Противоботулиновая поливалентная сыворотка (тип А, В, С, Диаферм 3).

3.Противогангренозная моно- и поливалентная сыворотки. (Диаферм 3).

4.Противодифтерийная (диаферм 3). Вводят в/м, дозируют в АЕ.

Так как это гетерогенные чужеродные лошадиные сыворотки, их вводят

по Безредке (0,1 мл и через 1 час все остальные количества).

Химиотерапия - применение цитотоксических средств, действующих через кровь (chema - кровь), т.е. после всасывания. Если патологический процесс обусловлен чужеродными для человеческого организма клетками

(паразиты, микроорганизмы, вирусы, клетки злокачественных опухолей), используются химиотерапевтические средства.

аналогиÐепозиторийгомологи)ÏолесÃÓживых к ток (бакт риальных, грибковых, растительного или животного происхождения), избирательно подавляющие

Цитотоксичностью, например, обладают все антисептики, Однако, для целей химиотерапии они непригодны в связи с малой избирательностью действия, поэтому антисептики можно пр менять только местно (на поверхности кожи. слизистых, в полостях), в отличие от химиопрепаратов,

природные соединен я (продукты жизнедеятельности микроорганизмов, растений, жив тных), бладающие избирательной цитотоксичностью, и их синтетические анал ги и гомологи.

Антиби тики - продукты жизн д ятельности (или их синтетические

функционирование других к ет к - микроорганизмов, опухолевых клеток и т.д. Термин антибиоз ("жизнь пр тив жизни") предложил Л.Пастер, а вещества, реализующие антибиоз, назвали антибиотиками. Эта группа включает десятки и сотни препаратов различной химической структуры, отличающихся спектром и механизмом действия, возможными побочными эффектами, профилем использования в медицинской практике и т.д. Как химиопрепараты антибиотики применяют для лечения инфекций и опухолевых заболеваний.

Санитарная и медицинская микробиология

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

Модуль 2 (М-10) УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ (2 часа)

Тема 5 ИНФИЦИРОВАНИЕ МАКРООРГАНИЗМА

(2 часа)

Цель: Изучить вопросы по теме «Инфицирование макроорганизма». Материалы и оборудование: Дидактические и презентационные

материалы по теме работы.

ÐепозиторийТемы для рефератовÏолесÃÓпрезентаций:

Задание 1: Изучить следующ е вопросы с использованием

предложенного методического и п езентационных материалов:

Задание 2: Подгот вить рефераты, презентации, выступления по теме

«Учение об инфекции».

1. Виды инфекционного процесса

2. Условия возникновения инфекционной болезни

3. Кишечные инфекционные болезни

4.Инфекции кожных покровов и слизистых оболочек

5.Экзогенные и эндогенные инфекции