- •Микробиология теория
- •1. Предмет и задачи микробиологии: ее место в современной биологии, роль для народного хозяйства и охраны здоровья.
- •2. Клеточная стенка: структура, химический состав и функции, окраска по Грамму.
- •3. Питательные среды.
- •4. Методы микробиологических исследований. Микроскопия. Правила работы с микроскопом.
- •5. Спиртовое брожение.
- •6. Процессы трансформации соединений фосфора.
- •7. Краткая история развития микробиологии.
- •8. Поступление питательных веществ в клетку прокариот (пассивная диффузия, облегченная диффузия, пассивный перенос, активный транспорт).
- •9. Взаимоотношения микроорганизмов с человеком и животными: нормальная микрофлора и патогенные микроорганизмы.
- •10. Особенности морфоструктуры прокариот.
- •11. Бактериальный фотосинтез и его отличие от фотосинтеза растений.
- •12. Влияние физических факторов среды на бактерии: лучистая энергия, ультразвук, реакция среды, свет.
- •13. Формы прокариот.
- •14. Карбонатное дыхание прокариот.
- •15. Процессы трансформации соединений серы.
- •16. Постоянные и временные структуры бактериальной клетки
- •17. Аэробное дыхание прокариот
- •18. Виды плазмид и их роль.
- •19. Цитоплазма и внутрицитоплазматические включения: строение и их функции.
- •20. Питание прокариот. Питательные вещества, факторы роста. Физиологические группы прокариот.
- •21. Структура генома прокариот.
- •22. Генетический аппарат прокариот.
- •23. Метаболизм прокариот: энергетический и конструктивный.
- •24. Общая характеристика представителей отдела Tenericutes.
- •25. Поверхностные структуры бактериальной клетки: капсула, слизистые чехлы, ворсинки.
- •26. Нитратное дыхание прокариот.
- •27. Разложение целлюлозы, гемицеллюлозы, лигнина и пектина.
- •28. Жгутики: их строение, размещение на клетке, механизм функционирования.
- •29. Пропионовокислое брожение.
- •30. Общая характеристика представителей отдела Firmicutes.
- •31. Эндоспоры и другие покоящиеся формы бактерий.
- •34. Химический состав прокариотической клетки.
- •35. Закономерность роста бактерий в периодической чистой культуре. Кривая роста, фазы роста бактериальной популяции.
- •36. Процессы трансформации соединений железа.
- •37. Ферменты: классификация ферментов, их роль в жизни микроорганизмов, особенности ферментативных реакций.
- •38. Процессы трансформации углеродсодержащих веществ.
- •39. Взаимоотношения микроорганизмов с растениями: Микрофлора ризосферы.
- •40. Молочнокислое брожение (гомо- и гетероферментативное).
- •41. Культивирование иммобилизационных клеток микроорганизмов.
- •42. Рекомбинация генетического материала прокариот. Трансформация, трансдукция, конъюгация.
- •43. Пути катаболизма глюкозы: путь Эмбдена-Мейергофа-Парнаса (Гликолиз).
- •44. Выделение чистой культуры и определение ее чистоты.
- •45. Общая характеристика представителей отдела Mendosicutes.
- •46. Анаэробное дыхание прокариот.
- •47. Микробные популяции: колонии, биопленки, зооглеи.
- •48. Влияние химических факторов среды на бактерии.
- •49. Маслянокислое брожение
- •50. Методы стерилизации.
- •51. Распространенность микроорганизмов в природе и их роль в круговороте веществ и других процессах.
- •52. Сульфатное дыхание прокариот.
- •53. Непрерывное проточное культивирование.
- •54. Взаимоотношения микроорганизмов. Ассоциативные и конкурентные взаимоотношения.
- •55. Фумаратное дыхание прокариот.
- •56. Получение накопительной культуры.
- •57. Инфекции.
- •58. Пути катаболизма глюкозы: путь Варбурга-Диккенса-Хореккера (пентозофосфатный).
- •59. Систематика прокариот: задачи, подходы при идентификации, системы классификации.
- •60. Влияние физических факторов среды на бактерии: температура, кислород.
- •61. Биосинтезы органических соединений у микроорганизмов.
- •62. Особенности культивирования анаэробных бактерий.
- •63. Эпифитные и фитопатогенные микроорганизмы.
- •64. Понятие роста, размножения. Основные параметры роста культур: время генерации прокариот, скорость роста и выход биомассы.
- •65. Классификация мутаций.
- •66. Распространение микроорганизмов в природе.
- •67. Поддержание (хранение) культур микроорганизмов.
- •68. Аммонификация белков, нуклеиновых кислот и мочевины.
- •69. Понятие о стерилизации, асептике, антисептике, дезинфекции. Пастеризация.
- •70. Фенотипическая и генотипическая изменчивость прокариот.
- •71. Подходы и критерии при идентификации.
- •72. Иммунитет. Факторы и механизмы естественной устойчивости.
- •73. Нитрификация. Денитрификация.
- •74. Общая характеристика представителей отдела Gracillicutes.
- •75. Антибиотики: механизм и спектр действия антибиотиков.
55. Фумаратное дыхание прокариот.
Ответ. Фумаратное дыхание отличается от всех описанных ранее способов анаэробного дыхания следующими особенностями. Это единственный пример анаэробного дыхания, когда роль конечного акцептора электронов в дыхательной цепи играет органическое вещество (фумаровая кислота). Этот тип получения энергии не является единственно возможным для какой-либо определенной таксономической группы бактерий. Во всех известных в настоящее время случаях бактерии, способные осуществлять фумаратное дыхание – хемоорганотрофы, которые обладают также способностью к брожению. Таким образом, использование фумарата в качестве акцептора электронов при дыхании является лишь дополнительным механизмом, позволяющим бактериям получать большее количество энергии в анаэробных условиях. Восстановление фумарата в бактериальных клетках часто сопровождается образованием сукцината, который может выделяться в среду в довольно больших количествах, а бактерии, осуществляющие этот процесс, называют сукциногенными. К ним относят, в первую очередь, некоторые виды родов Bacteroides, Fibrobacter, Wolinella. Все они являются микроаэрофилами, способными к аэробному дыханию при низких концентрациях кислорода, но в отсутствии О2 могут использовать альтернативный акцептор электронов – фумарат. Кроме сукциногенных бактерий, к фумаратному дыханию способны многие другие хемоорганотрофы, но их метаболизм не сопровождается выделением заметных количеств янтарной кислоты. К числу таких микроорганизмов можно отнести энтеробактерии (роды Escherichia, Proteus, Salmonella, Klebsiella и др.), представителей рода Propionibacterium. Все перечисленные роды добывают энергию в анаэробных условиях в результате брожения, при этом пропионовокислые бактерии в ходе брожения осуществляют этап фумаратного дыхания. Для перечисленных бактерий добавление фумарата к питательной среде значительно улучшает их рост, что связано с увеличением эффективности синтеза АТФ за счет окислительного фосфорилирования в дыхательной цепи при восстановлении фумарата.
56. Получение накопительной культуры.
Ответ. В основе выделения и определения численности представителей отдельных групп микроорганизмов лежит получение накопительных культур с помощью создания элективных условий. Накопительными называют такие культуры, в которых преобладают представители одной группы или даже одного вида микроорганизмов. Элективными называют условия, обеспечивающие преимущественное развитие определенной группы или вида микроорганизмов. При создании элективных условий учитывают особенности физиологии и метаболизма микроорганизмов: требования их к источникам питания, отношение к кислотности среды, аэрации, температуре, способность к образованию эндоспор и т.д. Особенно часто элективные условия создают путем подбора соответствующей питательной среды. Источником для получения бактериальных культур, родовую и видовую принадлежность которых необходимо определить, могут служить почва, воздух, вода, пищевые продукты, надземные и подземные части растений, а также различные тканевые жидкости животных и человека, отделяемое ран, слизистой оболочки и т.д. Методы накопления имеют целью добиться увеличения относительного количества данного микроорганизма за счет создания благоприятных условий для его роста и выживания по сравнению с другими или путем пространственного отделения его из популяции. К физическим методам, которые могут быть использованы при получении накопительной культуры, следует отнести регуляцию роста температурой, тепловую и ультразвуковую обработку, ультрафиолетовое облучение и др. Можно использовать также и особенности некоторых других физических свойств данного микроорганизма, например, его размеры, подвижность, что позволяет отделять данный микроорганизм от других членов популяции. В качестве примеров можно привести следующие. Использование освещения для получения культур цианобактерий. Такие виды легко выделяются из пресной воды и морских осадков. Для получения накопительных культур, образцы инкубируют при 25 °С и постоянном освещении от 500 до 3000 лк. Через 4–7 дней наблюдается увеличение мутности культуры, имеющей часто розовую, коричневую, желтую окраску. Инкубация при низкой температуре для получения культур психрофильных бактерий. Низкая температура способствует задержке роста многих бактерий. На первом этапе проводят инкубирование при температурах 0–5 °С в течение 14–24 дней. При использовании химических методов применяют токсические вещества, которые убивают или подавляют рост оставшейся части популяции, не влияя на выделяемый микроорганизм. Кроме того, эти вещества могут быть источниками питания, используемыми преимущественно отдельными бактериями в смешанной популяции. Примерами использования химических методов для выделения микроорганизмов являются следующие. Условия инкубирования в кислой среде для выделения культур лактобацилл. Для выделения бактерий из сыров, высев производится на среду, которая за счет ацетатной буферной системы имеет рН, равный 5,3. В этом случае Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum способны образовывать колонии, а другие молочнокислые бактерии – нет. Ингибирование роста пенициллином для получения культур микоплазм. Поскольку микоплазмы лишены клеточной стенки, они устойчивы к высоким концентрациям пенициллина, который подавляет рост многих бактерий с клеточной стенкой. Антибиотик, добавленный к питательной среде в концентрации 100–200 Е/мл, позволяет избавиться от посторонней чувствительной к нему микрофлоры. Целлюлоза как субстрат для цитофаг. Для получения накопительных культур цитофаг, разлагающих целлюлозу, на поверхность основного минерального агара помещают кусочки фильтровальной бумаги. На бумагу кладут частицы почвы или растительного материала и инкубируют чашки при комнатной температуре. Следят за образованием вокруг частиц желтой, оранжевой или розовой окраски, а также за процессом лизиса бумаги. Биологические методы включают использование специфических хозяев выделяемого микроорганизма, а также преимуществ некоторых свойств патогенных микроорганизмов. К ним относятся такие методы как. Получение накопительной культуры бактерий, патогенных для животных организмов. Патогенные для животных бактерии можно выделить, заражая восприимчивое животное-хозяин смешанной культурой исследуемого материала, в котором предполагается его присутствие. В инфицированном животном патогенный микроорганизм часто преобладает и обнаруживается в крови и тканях в виде чистой культуры. При этом в результате действия защитных механизмов животного рост непатогенных сопутствующих микроорганизмов ингибируется и они гибнут. Например, чистую культуру пневмококков можно получить через 4–6 часов после внутрибрюшинного введения мыши 1 мл эмульгированной мокроты, содержащей Streptococcus pneumoniaе. Пробы перитонеальной жидкости берут из брюшинной полости животного с помощью стерильной остроконечной капиллярной пипетки. Симбиоз растений с Rhizobium. Клубеньки, образуемые на корнях бобовых растений, представляют собой природную накопительную культуру симбиотических азотфиксирующих бактерий. Корни бобовых растений, содержащие клубеньки, промывают и отделяют часть корня с клубеньками. После поверхностной стерилизации корень помещают в воду, раздавливают пинцетом в одной чашке Петри, 1–2 петли такой суспензии переносят в следующую чашку и т. д. К каждому разведению добавляют расплавленный и остуженный агар с маннитом. После застывания агара чашки инкубируют при оптимальной температуре. Во многих случаях для получения накопительной культуры определенных бактерий используют сочетание физических, химических и биологических методов.